Dermalni ekvivalent. Zgodovina in rezultati kliničnih preskušanj

V poznih osemdesetih letih smo na Univerzi Stanford razvili tekočo obliko govejega kolagena, ki se je na telesni temperaturi preoblikovala v mehko elastičen substrat. Zdravilo je bilo registrirano in odobreno za uporabo v več evropskih državah kot vsaditev zdravila, imenovano Zyderm Collagen Implantant. Ta droga je bila prva implantacija. Kasneje so se pojavila druga sredstva za konturno plastiko, kot so restilan, perlen, farmakrilni gel, artekol, biopolimerni gel in drugi. Ta zdravila se je začela uporabljati ne samo za modeliranje kontur in korekcijo starostnih sprememb na koži, temveč tudi za zdravljenje, oziroma za izenačevanje reliefnih brazgotin. Vsi so bili vbrizgani v spodnji del trebuha.

Iskanje za boljše tretmaji hypotrophic brazgotin nas je pripeljala do zamisli o uporabi za ta namen umetno ustvarjeno kolegom kože - "dermalna enakovreden" (DE), ki se uporablja tudi tekoče kolagena. Variante umetnih kožnih nadomestkov bilo veliko, vendar je ideja skupnega - ustvariti strukturne komponente povrhnjico podobnih kožnega tkiva, ki ne bi bile zavrnjene v primeru transplantacije in imeli dobro podlago za kalitev svojih sestavin usnjice in povrhnjice. Znano je, da so osnovne strukturne komponente dermisov celični, vlaknati elementi in intersticijska snov. Vlaknat elementi so večinoma kolagena in elastina vlakna, intersticijski snov - glikoproteini, proteoglikani in glikozaminoglikani. Glavni funkcionalni celični element dermis je fibroblast, celična populacija fibroblastov je vir skoraj vseh strukturnih komponent dermisa. Zato pri ustvarjanju "kožnega nadomestka" večina znanstvenikov uporablja kolagenski substrat, pomešan s fibroblastami in glikozaminoglikani. Predvsem v taki ali drugačni obliki plasti keratinocitov se uporablja za ustvarjanje polnosloynoy kožo in hitrejša ponovna vzpostavitev presajene ekvivalenta kože, kar olajšuje številne keratinocitov izločajo rastne faktorje. Eno od prvih variant "življenjskega ekvivalenta kože" so leta 1983 predlagali E. Bell in soavtorji. Kokos fibrobasti smo mešali s kolagenom, plazemskim in rastnim medijem, kar je pripeljalo do tvorbe gela, na površini katerega so gojili keratinociti. Vse gojijo za 1 -2 tedna vilro, nakar dermalni obravnavanim zreli in zastopan v obliki izvedljiva tkivni prosojnega elastičnega masa ekvivalenta. Avtorji predlagajo prenos celotne plasti strukture kože na rane površin opeklin pacientov. Kot osnova za draženje ekvivalenta, so nekateri avtorji uporabljajo kolagensko gobico ali kolagena matriko, pokrita proteoglikane in poseljena z fibroblastov, ki se goji na vrhu katerih avtolognih keratinocitov. Zato je bil ustvarjen tako imenovani tridimenzionalni model kože. Za gojenje keratinocitov za poznejše jih prenese na površino rane, nekateri avtorji so bili uporabljeni tudi kot umetnem substratu matriksu iz kolagena in glikozaminoglikani hitozanskega trupla kožo, prašičje kože. 7 do 14 dni po zaćetku kulture je bila presaditev polne pufre, ki vsebuje dermis in povrhnjico, na rane bolnikov ali živali.

Umetni nadomestek kože je bil uporabljen ne samo za obnovitev kože opečenega, ampak tudi za testiranje zdravil za citotoksičnost, za raziskovanje rastnih dejavnikov in vitro.

Nezadostna, v našem vidika operativne učinkovitosti dermoabrazijo globokih hypotrophic brazgotine v kombinaciji s prenosom IPC dal priložnost poskusiti uskladiti topografijo kože s inokulacijo vdolbino hypotrophic brazgotina analogni dermalno enakovredno. Podlaga za ustvarjanje dermalngogo ekvivalent postala tekoča kolagen, pridobljen v laboratoriju, kjer so bile uvedene suspenzijo fibroblastov. Kožna ekvivalent, kot tudi IDC, specializirani laboratorij overjen za to dejavnost, na dan in uro obratovanja povzročajo je podano v stekleni viali v posodi z ledom na kliniki.

Operativni brusilni brazgotine, ki se izvajajo na običajen način po antiseptično zdravljenje kože, lokalno anestezijo 2% lidokaina ali novokain ali articaine. Z mletjem je bila površina rumena izravnana, hkrati pa so bili ustvarjeni pogoji za vlečenje kultiviranih celic ali celičnih sestav. Po tem, ohlajeni tekoči kolagenski gel inokulirali s fibroblastov ga uporablja s sterilno spatulo na polirani površini hypotrophic brazgotin (brazgotino vdolbini), kadar je pod vplivom temperature polimerizacije telesa.

Kot rezultat, po 5-10 minutah, iz tekočega stanja kolagena s fibroblasti polimeriziramo v gosto gelsko stanje. Po zgostitvi DE je bila na vrhu nameščena povojka s suspenzijo ali IPC na substratu.

Večplastna sterilna oblačila so bila določena kot pri presaditvi IPC. Odvisno od površine brazgotine je bila prekrivna rana, na kateri so bili položeni keratinociti in vrsta mletja, povoj v 7 do 12 dneh.

Načini Kombinirano zdravljenje hypotrophic brazgotine uporabo obratovalnih Mehanična dermoabrazija, ki ji sledi prenos v vdolbini vampu "dermalne ekvivalent" in keratinocitih iz večslojnega rezervoarju goji pod posebnimi rane obloge ali kot suspenzijo, lahko dosežemo bistveno boljše kozmetično sprejemljive rezultate z zmanjšanjem ali popolno izginotje ( -) krpo. Dermalni ekvivalent tvori lastno tkivo (dermis), brazgotinsko tkivo pa ostane pod novo oblikovanim tkivom. IPC ustvarja normalno debelino in funkcionalno delovanje povrhnjice, zaradi česar je celoten videz brazgotine na to kaže, da je pomemben napredek za več mesecev.

Takšno taktiko zdravljenja hipotrofnih brazgotin v tem trenutku lahko imenujemo optimalno pri reševanju tega problema. Vendar pa različica DE, ki jo uporabljamo v obliki kolagena gela s filoblasti, inokulirana v njej, ni zelo primerna pri delu. DE za delo s hipotrofičnimi brazgotinami bi bilo na začetku treba debelejše, tako da bi ga lahko postavili v poglabljanje brazgotine, jo razdelili. Po kateri je bila topna rana navita s keratinocitom. Tako je mogoče reči, da se ta smer pri delu s hipotrofnimi brazgotinami načrtuje le, vendar so napovedi za njegov nadaljnji razvoj in študij zelo optimistični.

Zapletenost in visoki stroški izdelave večslojne plasti keratinocitov, kot terapevtsko materiala potrebujejo stimuliranih iskanje drugih izvedbah celic sestavkov. Zelo zanimiva je raziskovalci kultiviranje fibroblaste, ki ob presajanje na površini rane imajo učinek, v mnogih pogledih podobne rezultate presaditev keratinocitov, vendar je veliko bolj preprost in poceni celic materiala. V naših raziskavah smo z mezoterapijo izvajali več bolnikov s hipotrofičnimi brazgotinami z uporabo suspenzije fibroblastov za brazgotinjenje.

Suspenzija fibroblastov v rastnem mediju z 1,5-2 milijona celic na ml. Je bil pod brazgotinami podvržen z mezoterapevtskimi tehnikami (mikropapulmonary, infiltrative). Število zdravljenja od 4 do 10, odvisno od zastaranja rouge, bolnikove starosti in globine okvare. Interval med sejami je 7-10 dni. Praviloma je uvedbo suspenzije avtolognih in alogenskih fibroblastov spremljala rahla, hitra vaskularna reakcija.

Kot rezultat, klinične študije so pokazale, da je pod vplivom presajenih IDC zmanjšuje trajanje vnetni odziv na koži in brazgotin po Mehanična dermoabrazija operativno in pospešitev epithelization od rane površin v povprečju 3-4 dni.

Pri delu z normotrofičnimi in hipertrofičnimi brazgotinami je najpomembnejši pospešek zdravljenja pooperacijskih erozij, saj v tem leži možnost pridobitve optimalnega terapevtskega učinka.

Transplantacija kožnega ekvivalenta je privedla do polnjenja (-) tkiva hipotrofnih brazgotin, glajenja njihovega reliefa, glajenja z okoliško kožo, ki je občutno zmanjšala površino brazgotin.

Uvedba suspenzije fibroblastov v hipotrofne brazgotine je privedla do izenačitve reliefa kože in zmanjšanja območja brazgotin.

V vseh primerih presaditve celičnega materiala je bil ugotovljen učinek poznejšega učinka, ko je več mesecev prišlo do izboljšanja estetskega videza brazgotin, ki je postalo dermoid podobna struktura.

Vsi učinki, ki smo jih opazili, so povezani z realizacijo biostimulacijskega potenciala s presajenimi celicami. Ni najmanjša vloga, kot se nam zdi, je dejstvo, da je število celičnih plasti v presadkih praviloma 10-30% višje. Posledično je skupni celični potencial na enoto površine že 10-30% višji od normalnega. Poleg tega so bili najboljši rezultati pri presaditvi keratinocitov in fibroblastov pridobljeni s presaditvijo celičnega materiala od mladih zdravih ljudi. To dejstvo, mimogrede, govori v prid uporabi alogenske kulture, pridobljene od mladih in zdravih darovalcev. Bioenergetski in informacijski potencial takšne kulture se prenaša v svoje celice, včasih zelo mlade prejemnike, zaradi česar se izboljša "kakovost" njihovih lastnih tkiv in celic.

Tako uporaba kulture keratinocitov in fibroblastov omogoča:

• Pospešite epitelizacijo brazgotin po dermabraziji.
• Zmanjšajte videz brazgotin, ne le zaradi poravnave njihove površine s površino okolice, temveč tudi zaradi oblikovanja polne povrhnjice nad njimi.
• Za izboljšanje rezultatov operativne dermabrazije zaradi učinka citokinov transplantiranih celic na brazgotino, ki se navsezadnje spreminja v dermalno podobno strukturo.
• Za doseganje estetsko sprejemljivejših rezultatov zdravljenja bolnikov z normotrofičnimi, hipotrofičnimi, hipertrofičnimi, atrofičnimi brazgotinami in strijami.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]