Analiza blata na prisotnost protozojev

Odkrivanje in diferenciacija protozojev v analizi blata (razlikovanje patogenih oblik od nepatogenih) je precej zapletena naloga. Večina enoceličnih organizmov v blatu se nahaja v dveh oblikah: vegetativni (stadij trofozoita) - aktivni, mobilni, vitalni, zlahka dovzetni za škodljive učinke (zlasti ohlajanje) in zato po izločanju iz črevesja hitro odmrejo, in v obliki cist (oocist), odpornih na zunanje vplive. V oblikovanem blatu se protozoji običajno nahajajo le v encistiranem stanju; za odkrivanje vegetativnih oblik je treba blato pregledati, ko je še toplo. To je posledica dejstva, da v ohlajenem blatu vegetativne oblike protozojev hitro odmrejo in so, medtem ko so mrtve, hitro podvržene delovanju proteolitičnih encimov, zaradi česar izgubijo značilne lastnosti svoje strukture. Poleg tega se pri ohlajanju zmanjša in nato izgine mobilnost protozojev - pomemben pomožni dejavnik pri njihovi diferenciaciji.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

Vrste parazitov v blatu

Glavne vrste parazitov in najboljše metode za njihovo odkrivanje

Vrsta parazita	Pogosto prizadeti organi	Diagnostična metoda
Donovanova lišmanija	Vranica, jetra, bezgavke	Odkrivanje parazitov v punkcijah vranice, jeter, kostnega mozga, prizadete kože, odkrivanje specifičnih protiteles v krvi
Trypanosoma rhodesiense in T. gambiense	Bezgavke in možgani	Odkrivanje parazitov v prizadeti koži, bezgavkah, cerebrospinalni tekočini
Echinococcus granulosus ali Echinococcus multilocularis	Jetra, pljuča, možgani	Odkrivanje specifičnih protiteles v krvi
Schistosoma haematobium, S. mansoni, S. japonicum itd.	Sečila, jetra, portalna vena	Odkrivanje jajčec parazitov v urinu, blatu, rektalni biopsiji, tkivu jeter ali specifičnih protitelesih v krvi
Jetrna fasciola	Jetra	Odkrivanje jajčec parazitov v blatu ali specifičnih protiteles v krvi
Clonorchis sinensis, Opisthorchis felineus, Opisthorchis viverrini	Žolčni sistem	Odkrivanje jajčec parazitov v blatu ali žolču
Trichostrongylus capricola, T. vitrinus	Tanko črevo	Odkrivanje jajčec parazitov v blatu
Echinostoma ilocanum	Tanko črevo	Odkrivanje jajčec parazitov v blatu
Angiostrongylus costaricensis	Tanko in debelo črevo	Odkrivanje jajčec Pri črevesni biopsiji
Pasji dipilidum	Tanko in debelo črevo	Odkrivanje jajčec parazitov ali zaužitega blata

V blatu je mogoče zaznati 20 vrst protozojev (8 patogenih in oportunističnih ter 12 komenzalnih). Črevesni protozoji živijo v tankem ali debelem črevesu v stadiju trofozoita in/ali ciste. Spadajo v eno od 4 skupin: amebe, bičkarji, migavke in kokcidije.

Dizenterična ameba v blatu

Entamoeba histolytica (dizenterična ameba) povzroča amebo pri ljudeh. Lokalizira se v debelem črevesu in se izloča v obliki trofozoitov (s tekočim blatom) in/ali cist (v oblikovanem blatu). Ker večina vrst ameb (črevesna, Hartmannova, Bütschlijeva) ni patogenih za ljudi, je potrebna velika previdnost pri ocenjevanju rezultatov preiskave blata. Le odkrivanje hematofagnih trofozoitov (tkivna oblika E. histolytica forma magna) je lahko zanesljiv znak amebne dizenterije in/ali amebnega ulceroznega kolitisa pri bolniku. Prisotnost eritrocitov v protoplazmi ameb je zelo pomemben diagnostični znak, saj jih nepatogene oblike ameb nikoli ne vsebujejo. V vseh drugih primerih odkrivanje oblik trofozoitov, podobnih E. histolytica, ki ne vsebujejo eritrocitov, ni osnova za diagnozo ameboze kot bolezni. Rezultati odkrivanja samo cist E. histolytica (luminalna oblika), ki jih je mogoče odkriti pri posameznikih, ki okrevajo po akutni amebiazi, pri tistih, ki trpijo za kronično obliko amebiaze, in pri nosilcih, se ocenjujejo na podoben način.

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Giardia v blatu

Lamblia intestinalis (Giardia) spada v razred bičkarjev. Giardia parazitira v tankem črevesu, predvsem v dvanajstniku, pa tudi v žolčniku. Obstoj trofozoitov (vegetativne oblike Giardia) zahteva tekoče okolje, zato se Giardia ob vstopu v debelo črevo cistira, v blatu pa se nahajajo le ciste. Le pri obilni driski ali po delovanju odvajal lahko v blatu zaznamo vegetativne oblike.

Balantidije v blatu

Balantidium coli je edini ciliatni parazit v človeškem črevesju, ki povzroča bolezni različnih stopenj resnosti, od blagega kolitisa do hudih ulceroznih lezij. Patogen se nahaja v blatu v obliki trofozoitov ali cist. Prenašanje je možno pri zdravih ljudeh.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Kriptosporidi v blatu

Predstavniki rodu Cryptosporidium trenutno veljajo za najpomembnejše povzročitelje driske. Cryptosporidium (iz grščine "skrita spora") so obvezni paraziti, ki prizadenejo mikrovile sluznice prebavil in dihal ljudi in živali. Okužbe prebavil, ki jih povzročajo kriptosporidije, so bile registrirane v vseh državah sveta. Tako široka razširjenost kriptosporidioze je povezana z velikim številom naravnih rezervoarjev okužbe, nizkim kužnim odmerkom in visoko odpornostjo patogena na razkužila in antiparazitska zdravila.

Med kriptosporidijami sta za ljudi potencialno patogeni vrsti Cryptosporidium parvum in Cryptosporidium felis (ugotovljeni pri posameznikih, okuženih z virusom HIV). Najpogostejša lokalizacija okužbe pri ljudeh so distalni deli tankega črevesa. Pri bolnikih s hudimi imunskimi pomanjkljivostmi je lahko okužen celoten prebavni trakt - od orofarinksa do sluznice danke.

Diagnoza kriptosporidioze v večini primerov temelji na odkrivanju oocist kriptosporidij v blatu in/ali (veliko redkeje) v biopsiji sluznice tankega črevesa v primerih sindroma vodene driske. Uporablja se mikroskopija pripravljenih preparatov, obarvanih po Gramu. V večini primerov ta metoda barvanja ne omogoča odkrivanja oocist zaradi njihove šibke sposobnosti zadrževanja barvila in nezmožnosti razlikovanja od kvasovkam podobnih gliv. Zato se uporablja kislinsko odporno barvanje. Pri tej metodi barvanja so oociste kriptosporidij obarvane rdeče ali rožnato in so jasno vidne na modro-vijoličnem ozadju, na katerem so obarvani drugi mikroorganizmi in črevesna vsebina.

Pri akutni kriptosporidiozi je število oocist v blatu veliko, zaradi česar jih je enostavno odkriti z mikroskopijo obarvanih preparatov. Pri kronični kriptosporidiozi z blagim potekom, ko je število oocist v blatu majhno, pa je treba uporabiti metode obogatitve, da se poveča verjetnost njihovega odkrivanja. V zadnjih letih so za diagnozo kriptosporidioze postale pogoste serološke metode.

Kriptosporidioza žolčnih poti se lahko kaže kot holecistitis, veliko redkeje kot hepatitis (s povečano koncentracijo bilirubina, AST, ALT, aktivnosti alkalne fosfataze v krvi) in sklerozirajoči holangitis. Za diagnozo biliarne kriptosporidioze se pregledajo biopsije jeter in žolč, kjer je mogoče odkriti kriptosporidije v različnih fazah razvoja.

Za spremljanje učinkovitosti zdravljenja protozojskih črevesnih lezij se blato pregleda glede na ugotovljeno bolezen: v primeru amebijaze, balantidiaze - takoj po zdravljenju, v primeru giardiaze - po 1 tednu. Po zdravljenju invazij žolčnih poti lahko učinkovitost spremljamo tako s pregledom blata kot žolča.

[ 13 ], [ 14 ]

Strganje iz perianalnih gub za enterobiozo

Strganje perianalnih gub za enterobiozo je ciljni test za odkrivanje jajčec glist (Enterobius vermicularis). Ker odrasle samice glist izlezejo ven in odložijo jajčeca v gube okoli anusa, jih redko najdemo v blatu; lažje jih je odkriti v strganju iz gub okoli anusa ali v rektalni sluzi.