Neuralne izvorne celice

Eksperimentalni dokazi za možnost regeneracije celic v osrednjem živčevju smo pridobili veliko prej odkritje raziskav izvornih celic zarodkov, ki je pokazala prisotnost v neocortex, hipokampus in vohalne žarnice v možganskih celicah odraslih podganah, zanimive 3H-timidina, da je sposobnost za sintezo beljakovin in delitev. Že v 60-ih letih prejšnjega stoletja se je domnevalo, da so te celice predhodniki nevronov in so neposredno vključeni v učenje in spomin. Nekoliko kasneje je pokazala prisotnost sinaps tvorjenih de novo v nevronih in prvo delo o uporabi izvornih celic za induciranje neyronogeneza vitro. Na koncu poskusov XX stoletja z usmerjeno diferenciacijo ESS v živčnih matičnih celic, dopaminergični in serotonergični nevroni privedlo do revizije klasičnih konceptov sposobnost živčnih celicah sesalcev za regeneracijo. Številne študije so pokazale, prepričljivo, kako realnost rekonstrukcije nevronskih mrež in razpoložljivost neyronogeneza celotnem obdobju poporodni organizmu sesalcev.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Viri živčnih izvornih celic

Nevronskih matičnih celic, izoliranih med operacijami v subventricular območju stranskih prekatov in dentate gyrus v hipokampusu, ki je v kulturi celic, da se tvori neurospheres (nevronskih krogel) je po razprševanje in preformirovaniya preteklost - vse večjih celičnih tipov CŽS ali v posebnem okolju, z novimi mikro-kroglic. V suspenzijskih kulturah disociranih tkiv, izoliranih iz periventrikularnih delov možganov, se pojavljajo tudi nevroferi.

Markerji nezrelih možganskih celic nestinski, beta-tubulin III (nevronska dvojno podajo linija), vimentin, GFAP in NCAM, za imunocitokemijski identifikacijo monoklonskih protiteles, ki se uporabljajo. Nestin (protein z vmesnimi nevrofilamenti tipa IV) izraža multipotentne nevroektodermalne celice. Ta protein je bila uporabljena za identifikacijo in izolacijo multipotentne CŽS neuroepithelial matičnih celic z monoklonskimi protitelesi Rat-401, ki lahko zazna do 95% celicah nevralne cevi podganjih zarodkov na enajsti dan gestacije. Nestin ni izražen na diferenciranih potomcih živčnih matičnih celic, temveč je prisoten v zgodnjih živčnih progenitornih celicah, postmitotičnih nevronih in zgodnjih nevroblastih. S pomočjo tega označevalca so bile ugotovljene nevroepitelijske celice progenitorja in dokazali obstoj matičnih celic v osrednjem živčevju. Vimentin (beljakovina vmesnih nevrofilamentov tipa III) je izražen z živčnimi in glialnimi progenitornimi celicami ter nevroni, fibroblasti in gladkimi mišičnimi celicami. Zato imata obe imunocitokemični markerji posebno specifičnost, ki je potrebna za ločeno identifikacijo nevronskih izvornih in progenitornih celic. Uporaba beta-III tubulina vzpostavi nevronskih rodu izvornih celic, ker tipa so astrocitov I označene z izražanjem GFAP in oligodendrocite specifičen galactocerebroside (GA! C).

Mitogen za nevronskih matičnih celic, so FGF2 in EGF, podpirajo proliferacije predniških celic v kulturi z oblikovanjem neurospheres. Hitrost delitve živčnih matičnih celic se močno poveča pod vplivom FGF2, pa tudi pri uporabi kombinacije FGF2 + EGF. Proliferativne učinke FGF2 posredujejo receptorji FGF2-R1. Heparin poveča afiniteto receptorske vezave FGF2 in dramatično izboljša njegov mitogeni učinek na nevroepitelne celice. V zgodnjih fazah embriogeneze FGF2 receptorjev, izraženih v podganji telencephalon, v kasnejših fazah njihove lokalizacije omejenega območja prekata. Najvišja ekspresija FGF2-R1 po postmitotičnih celicah opazimo po koncu obdobja zgodnje nevrogeneze. Za začetno obdobje razvoja telencephalon je značilna nizka raven izražanja receptorjev EGF, predvsem v celicah ventralne regije. V kasnejših fazah embriogeneze se izražanje EGF-R dviga v dorzalni smeri. Pri podganah možganih ima visoko afiniteto EGF receptor, transformirajočega rastnega faktorja beta (TGF-beta-R), in ki prednostno veže. Posredno funkcionalna vloga EGF-R kažejo podatke o kortikalne dysgenesis forebrain nastale v poznem obdobju embriogenezo ter poporodne zorenjem, funkcijo spuščanja forebrain, skorje in ectopia smrt hipokampusa celic knockout miši gena receptor EGF. Poleg tega je prisotnost TGF-a v hranilnem mediju absolutno bistvena za tvorbo nevrosefere. Po odstranitvi rastnih faktorjev iz kondicionirati celični medij stop delitvijo in se zanj spontano diferenciacijo da se tvori nevronov, astrocitov in oligodendroblastov.

Glede na to, je matična celica reaggregation iz leta disociiranih neurospheres in kultiviranje izvedemo v gojitvenem mediju, ki vsebuje EGF in osnovno FGF ali FGF2, vendar brez dodatka seruma. Izkazalo se je, da ESPG inducira proliferacijo izvornih celic subependimnoy območju stranskih prekatov in osnovna FGF spodbuja proliferacijo izvornih celic striatumu, hipokampus, neocortex in vidnega živca zrele možganov. Kombinacija EGF in osnovne FGF je nujno za aktivno proliferacijo izvornih celic, izoliranih iz ependymal tretje in četrte prekate z forebrain ter hrbtnega kanalu ledvenih in prsnih hrbtenjače.

Po suspenzija disociacije nevronskih matičnih celic, gojene v posodah iz umetne snovi ali več vdolbinami brez lepilno podlago za povečanje obsega novih neurospheres tvorjene, ki ponavadi traja približno 3 tedne. Metoda večkratne disperzije in razmnoževanja nevrospere omogoča pridobitev zadostnega števila linearnih klonov multipotentnih izvornih celic za intracerebralno presaditev. To načelo temelji tudi na ustvarjanju banke izvornih celic, izoliranih iz človeških embrionalnih možganov. Njihova dolga (večletna) kloniranje omogoča pridobivanje stabilnih linij živčnih matičnih celic, iz katerih nastanejo kateholaminergični nevroni med inducirano diferenciacijo.

Če neurospheres ne prenaša in jih gojili na lepilni substratov v mediju, ki nimajo rastne faktorje, proliferirajoče matičnih celic začnejo spontano razlikovanje, da se tvori nevronskih predhodnikov celice in glialnih celic z ekspresijo markerjev vseh vrst živčnih celic: MAP2, Tau-1, NSE, neun beta -tubulin III (nevroni), GFAP (astrociti) in CalC, 04 (oligodendrociti). Nasprotno, v kulturah nevralne izvorne celice v deležu nevronov do več kot 40% diferenciranih celic (pri glodavcih - od 1 do 5%) celic pri miših in podganah, vendar je mnogo manj oligodendrocitov, kar je zelo pomembno za celično zdravljenje razgledne demielinizacijska bolezni. Problem je rešen z dodajanjem gojišča B104, ki spodbuja nastanek celic, ki proizvajajo mielin.

Ko kultivirane celice nevronske matičnih mozga človeških zarodkov v mediju, ki vsebuje ESPG osnovno FGF in LIF, število vrstic nevronskih matičnih celic povečanj 10 milijonov krat. Ponovljene celice in vitro ohranjajo sposobnost preseljevanja in diferenciacije v živčne in glialne celice po presaditvi v možgane spolno zrelih podgan. Vendar pa je in vivo število razdelkov večpotentnih progenitornih celic omejeno. Večkrat je ugotovil, da je mejna Hayflick za "odrasle" nevralne izvorne celice (okoli 50 mitoze) Še nedosegljiv tudi v eksperimentu - celic v obliki neurospheres ohrani svoje lastnosti le 7 mesecev in šele po 8 prehodih. Verjetno je, da je to zaradi značilnosti metod za njihovo disperzijo med pasažo (tripsinizacija ali mehanska učinek), ki drastično zmanjša proliferativno aktivnost celic zaradi oslabljene medceličnih stikov. Dejansko, če se namesto disperzije metode razdelitve nevrošerjev na 4 delov, se preživetje celic med prehodom bistveno poveča. Ta tehnika omogoča gojenje človeških živčnih matičnih celic za 300 dni. Vendar pa po tem obdobju celice izgubljajo mitotično aktivnost in se podvržejo degeneraciji ali pa na stopnjo spontane diferenciacije s tvorbo nevronov in astrocitov. Na podlagi tega avtor meni, da je 30 mitoz omejeno število delitev za gojene neravne matične celice.

Pri gojenju človeških nevralnih matičnih celic in vitro se tvorijo predvsem GABA -ergični nevroni. Brez ustvarjanje posebnih pogojih, nevralne predniške celice povzročati dopaminergične nevrone (potrebnih za celični terapiji Parkinsonove bolezni) samo v prvih prehodov, po kateri se vsi nevronov v kulturi sestavljajo izključno GABAergic celic. Pri glodalcih indukcijo dopaminergičnih nevronov in vitro povzročajo IL-1 in IL-11, kot tudi fragmenti živčnih celičnih membran, LIF in GDNF. Vendar pa ta metoda ni bila uspešna za moškega. Kljub temu se pri intracerebralni GAMK-ergični presaditvi nevrona in vivo pod vplivom mikroelektričnih dejavnikov pojavijo živčne celice z različnimi fenotipi mediatorja.

Iskanje nevrotrofičnih faktorjev kombinacije pokazala, da FGF2 in IL-1 inducira dopaminergičnih neuroblasts, ki pa ne morejo proizvajati dopaminergične nevrone. Razlikovanje izvornih celic v hipokampusa glutamatergične ekscitatorni in inhibitornih GABAergic nevronov vplivajo nevrotrofini, EGF in IGF1 inducira nastanek glutamatergične in GABAergic nevronov iz živčnih matičnih celic človeških zarodkov. Z zaporednim dodajanjem kulture retinojske kisline in nevrotrofin 3 (NT3) znatno poveča diferenciranje izvornih celic v hipokampusu zrele možgane v nevronih različno mediator, sicer pa s kombinacijo možganskega nevrotrofičnega faktorja (BNDF), NT3 in GDNF v kulturah hipokampusa in neocortical voljo piramidni nevroni.

Tako rezultati številnih študij kažejo, da so najprej matične celice iz različnih možganskih struktur pod vplivom lokalnih specifičnih tkivnih dejavnikov sposobne razlikovati in vivo v nevronskih fenotipih, ki so sestavni del teh struktur. Drugi cilj inducirane diferenciacije nevronskih izvornih celic in vitro s kloniranjem predhodnih celic daje možnost pridobivanja nevronskih in glialnih celic pri želenih lastnosti fenotipskih za intracerebralno presajanju v različnih oblikah možganov patologije.

Nedvomno da pluripotentnih matičnih celic, pridobljenih iz zarodkov ali odraslih centralnem živčnem sistemu, se šteje kot vir novih nevronov in se uporabljajo v kliniki za zdravljenje nevroloških motenj. Vendar pa je glavna ovira za razvoj praktičnega Neurotransplantation celic je dejstvo, da je večina živčnih matičnih celic ne razlikujejo v nevronov po implantaciji v nonneural zreli območju centralnega živčnega sistema. Pri mimo te ovire, se predlaga zelo izvirno tehniko, ki omogoča in vitro, da dobimo čisto populacijo nevronov iz fetalnih živčnih matičnih celic po presaditvi v CNS odraslih podgan. Avtorja trdita, da razlikovanje vsajenega celic s to metodo za posledico tvorbo holinergičnega nevronske fenotipa, zaradi vpliva mikrookolja obdaja dejavnikov. Predlagana tehnologija je zanimiva z vidika razvoja novih terapij, ki temeljijo na izvornih celicah in nadomestijo poškodovane zaradi travme ali nevrodegenerativnih bolezni nevronov kot holinergični nevroni vodilno vlogo pri razvoju motorike, spominsko funkcijo in učenja. Zlasti lahko holinergičnih nevronov, izpeljani iz človeških embrionalnih matičnih celic se uporabljajo za zamenjavo motornih nevronih izgubljenih v amiotrofično lateralno sklerozo ali poškodbe hrbtenjače. V tem trenutku ni podatkov o metodah izdelave znatnega števila holinergičnih nevronov iz populacije izvornih celic, ki jih je izvedel mitogen. Avtorji predlagajo dokaj preprost, vendar učinkovit način za stimuliranje mitogen predhodno oblikovanih primarnih embrionalne izvorne celice živčevja v smeri razvoja v skoraj čistih nevronov po implantaciji v nonneural in nevrogenega CNS pri odraslih podganah coni. Najpomembnejši rezultat njihovega dela je pretvorba dovolj velikega števila presajenih celic v holinergičnih nevronov pri presajenih na povprečno membrano in hrbtenjače.

Poleg tega je za preformacijo nevralne izvorne celice možganskih 8 tednov holiyergicheskie človeških zarodkov nevronov in vitro skorje predlagajo uporabo različnih kombinacij naslednjih trofičnih faktorjev in kemikalije: rekombinantni osnovno FGF, EGF, LIF, amino-terminalni zvoka peptid miš (Pst-N ), trans retinojska kislina, NGF, BDNF, NT3, NT4, naravna laminin miške in heparin. Začetna linija človeških živčnih matičnih celic (K048) smo ohranjali in vitro za dve leti in prestal 85 prehodi nespremenjene proliferacije in diferenciacije lastnosti pri ohranjanju normalne diploidnih kariotip. Undispersed neurospheres 19-55 drugi prehodi (38-52 tednov e) posajene na poli-D-lizina in laminin in jo nato obdelamo z zgornjimi dejavniki v različnih koncentracijah povezav in zaporedij. Kombinacija sestoji iz osnovne FGF, heparin in laminin (akronimom FHL), saj edinstven učinek. Po enem dnevu zarodka gojenje živčnih matičnih celic v mediju z ali brez FHL Pst-N (kombinacija Pst-N + FHL v kratica SFHL) opazili hitro razmnoževanje večjih ploščatih celic. Vsi drugi dan protokol (npr kot osnovno FGF + laminin), nasprotno pa so privedle do omejenim širjenjem radialno od vretenaste oblike celice, te celice ni zapustil temeljne neurospheres. Po 6 dneh aktivacije in kasnejše desetih diferenciacije mediju, ki vsebuje B27, na robu FHL-aktiviranih kroglic polipolyarnye velike nevronske podobne celice niso bili najdeni. V drugem protokolu, je večina skupine nevronov celic majhna in bipolarne ali unipolarne. Imunocitokemijski analiza je pokazala, da so bile ali GABA-Ergić ali glutamatergične ker večina velikih polipolyarnyh celice, ki se nahajajo na robu FHL aktivirani neurospheres izkazalo holinergično, izraženimi označevalcev značilnih holinergičnih nevronov majhne (<20 mikronov) bipolarna ali monopolarni celice (Islet-1 in ChAT). Nekatere od teh nevronov hkrati izraženo sinapsinski 1. Kot rezultat, pet serije neodvisnih poskusov, so avtorji ugotovili, da nevroni je le 27,8 celotna populacija celic v eni območjih za 45,5% diferencirajo v nevronih TuJl +, medtem holinergične (ChAT ^) % celic v isti populaciji. Po 10 več dni diferenciacije in vitro, poleg holinergičnih nevronov v FHL-activated neurospheres so bile znatne količine malih nevronov - glutamatergične (6,3%), GABA-Ergić (11,3%), in astrocit (35,2% ) in nestacionarne celice (18,9%). Pri uporabi druge kombinacije rastnih faktorjev holinergičnih nevronov odsotna ter robni celice tvorjene neurospheres ali astrocite, ali nekoliko glutamatergične in GABA-Ergić nevronov. Spremljanje backup in aktivne potenciale z uporabo celih celic patch objemke tehniko, je pokazala, da se je po sedmih dneh FHL-aktiviranje polipolyarnyh veliko večino celic imeli preostali potencial predstavljajo -29.0 ± 2.0 mV, v odsotnosti akcijskega potenciala. Po 2 tednih počitka možnih povečanj -63.6 ± 3.0 mV, ki so opazili akcijske potenciale pri indukciji depolarizing tokov in 1M tetrodotoxin blokirani, kar kaže, da je funkcionalna aktivnost nezrelih holinergičnih nevronov.

Nadalje avtorji ugotovili, da FHL- sama ali SFHL- aktivacija in vitro nima za posledico tvorbo zrelih nevronov in poskuša ugotoviti, ali lahko predhodno tvorjena s pomočjo FHL SFHL ali matične celice se diferencirajo v holinergičnih nevronov pri presajeni v zreli podganji CNS. Za to injekcijo aktiviranih celic v nevrogenega regiji je bila izvedena (hipokampus) in nonneural na številnih področjih, vključno odsek čelnega korteksa povprečno membrano in hrbtenjače odraslih podgan. Sledenje implantiranih celic je potekalo s pomočjo CAO - ^ p vektorja. Znano je, da OKM etikete hkrati tako ultrastruktura celice in celične procese (molekularnem nivoju) brez puščanja in je mogoče direktno vizualizacijo. Poleg tega,-OPP označeni nevronske matične celice podpirajo nevronske profil in glije diferenciacije enaka profila nepretvorjenih embrionalne matične celice v možganih.

En do dva tedna po implantaciji 5 x 10 ⁴ aktivirane in označeni nevronskih izvornih celic so našli v hrbtenjači ali možganov podgan so bile + celice ROC predvsem v bližini mesta injiciranja. Procesi migracije in integracije so bili opaženi že en mesec po presaditvi. Migracije Razpon različno glede na mesto injiciranja: uvedba odsek v čelnega korteksa OCD + celice so se nahajale v 0.4-2 mm mestu injiciranja, pri implantaciji v srednji membrano, hipokampus, ali hrbtenjače celice migrira veliko večji razdalja -. 1-2 cm cepljen celice smo lokaliziran v centralnem živčnem sistemu zelo struktur, vključno frontalnem korteksu, povprečni membrane, hipokampus in hrbtenjače. Označeni nevronski elementi, označeni z OCD, so bili opaženi že prvi teden po presaditvi, njihovo število pa se je znatno povečalo 1 mesec po operaciji. Stereološka analiza je pokazala višjo stopnjo preživetja implantiranih celic v različnih strukturah možganov v primerjavi s hrbtiščem.

Znano je, da shranijo regionalna populacija matičnih celic, preoblikovanje v zrele celice so urejene s posebnimi faktorji tkiv v večini odraslih tkiv sesalcev. Proliferacije izvornih celic, diferenciacijo zarodnih celic in nastanek specifične strukture možganov nevronskih fenotipov in vivo v veliko večji meri izražen v možganih plodu, kot zaradi prisotnosti visokih koncentracij morfogenezo dejavnikov lokalno mikrookolje določi - nevrotrofini BDNF, NGF, NT3, NT4 / 5 in rasti faktorji FGF2, TGF-a, IGF1, GNDF, PDGF.

Kje so nevronske matične celice?

Ugotovljeno je, da nevronske izvorne celice ekspresijo fibrilarne beljakovine glialne kisline, ki se med zrelimi celicami nevronske linije ohranja le na astrocitih. Zato je lahko rezervo s steblom v zreli osrednji živčni sistem astrocitične celice. Dejansko je v vohalnih žarnice in ozobljenih gyrus nevronov so bile ugotovljene, ki izvirajo iz GFAP-pozitivne prekurzorja, kar je v nasprotju s tradicionalnimi pogledi o vlogi praočetu radialne glia, GFAP ni izražen v dentate gyrus pri odraslih. Možno je, da v osrednjem živčnem sistemu obstajata dve populaciji izvornih celic.

Vprašanje lokalizacije izvornih celic v subventrikularni coni ostaja tudi nejasno. Po mnenju nekaterih avtorjev, ependymal celice tvorijo področja v kulturi klonov, ki niso prave neurospheres (subependimy celic klonov), saj je le možnost, da se diferencirajo v astrocitov. Po drugi strani pa po fluorescentne ali virusnih ependymal celic označevanje dvojno podajo odkritih v celicah subependimnogo sloja in vohalne žarnice. Tako označene celice in vitro tvorijo nevrospere in se razlikujejo v nevronih, astrocitih in oligodendrocitih. Poleg tega se je pokazalo, da je približno 5% Ependimska Celica celice izražena označevalce stebla - nestinski, zarezo-1 in Mussashi-1. Predpostavlja se, da mehanizem asimetrično mitoze povezan z neenakomerno porazdelitev Zareza-1 membranski receptor, pri čemer slednje ostane v odvisnih celic membranskih lokaliziranih v ependymal cono, medtem matične celice selijo v subependimny plasti izgubi tega receptorja. S tega stališča lahko subependimnuyu cona šteti kot zbiralnik predniških nevronskih predhodnih sestavin in glialnih celic, pridobljenih iz izvornih ependymal plasti. Po mnenju drugih avtorjev, v repne subventricular območju nastala le glije celice, celice so vir neyronogeneza lezije rostralnog-stranska oddelka. V tretjem izvedbenem primeru, prednje in zadnje pregrade subventricular območje od stranskih prekatov prenaša nevrogenskega enakim učinkovitost.

Prednostno, če četrti izvedbi organizacija možganskega debla rezervo v centralnem živčnem sistemu, pri čemer je v subventricular območju so trije glavni tipi nevronskih prednikov - A, B in C. V prvih celice izražajo nevronskih markerjev (PSA-NCAM, TuJl) in obdan s celicami B, ki jih identificiramo z izrazi antigenov kot astrocite. C-celice, ki nimajo antigenske lastnosti nevronov ali glia, imajo visoko proliferativno aktivnost. Avtor prepričljivo pokazalo, da so celice B predhodniki A-celic in tvorijo de novo nevronih vohalnih žarnice. Med migracijo so A-celice obdana s sklopom nevronskih matičnih celic, ki se močno razlikuje od mehanizma po mitotične neuroblasts migracije vzdolž radialnih glialnih celic zarodka možganih. Migracije se zaključi v delitvi vohalne žarnica mitotičnem tako A- in B-celic, derivati, ki so vključene v plasti granulozne celic v glomerularne plasti vohalnih področjih možganov.

V možganih razvoju zarodkov se ne razlikuje ependymal celic in v prekatih vključujejo pomnoži izvornih celic prekata germenativnoy th subventricular območja, ki migrirajo primarno nevro- in glioblastom. Na podlagi tega, nekateri avtorji menijo, da je regija subependimnaya zrel možgani vsebuje nižjo germenativnuyu zarodkov nevronske tkivo, sestavljeno iz astrocitov, neuroblasts in neznanih celic. Pravilne nevronske matične celice predstavljajo manj kot 1% celic v hermetični coni lateralne stene. Delno zaradi tega, pa tudi v zvezi s podatki, ki so subependimnoy cona astrociti nevronske predhodniki izvornih celic ne izključujejo možnosti astrocitov glialne transdifferentiation celic za pridobitev nevronskih fenotipskih značilnosti.

Glavna ovira za dokončno rešitev problema lokalizacije nevronskih izvornih celic in vivo je odsotnost specifičnih markerjev za te celice. Vendar pa je zelo zanimivo, s praktičnega vidika, je predstavil poročilo, da so nevronske matične celice izolirane iz centralnega živčnega sistema s službami, ki ne vsebujejo subependimnyh območij - tretji in četrti prekati za forebrain, spinalni kanal prsne in ledvene hrbtenice. Zlasti pomembno je dejstvo, da za poškodbe hrbtenjače okrepljeno proliferacije ependymal izvornih celic centralnega kanala s tvorbo zarodnih celic selijo ter razlikovanje v astrocitov gliomezodermalnogo vampu. Poleg tega matičnih celic in oligodendrocitov astrofizika najdemo v nepoškodovanem hrbtenjači odraslih podgan.

Tako podatki iz literature, močno kažejo na prisotnost centralnega živčnega sistema odraslih sesalcev, vključno s človekom, regionalni stebla rezerve, regenerativno in plastike z zmogljivostjo, na žalost, lahko zagotovi le fiziološke regeneracijo procesov tvorijo nove nevronske mreže, vendar ne izpolnjuje potrebe reparative regeneracija. To predstavlja problem pri iskanju načinov za povečanje sredstev, centralnega živčnega sistema izhajajo eksogeni način, da ni mogoče rešiti brez jasnega razumevanja mehanizmov oblikovanja centralnega živčnega sistema v času embrionalnega obdobja.

Danes vemo, da je v procesu razvoja zarodka, matične celice iz nevralne cevi celice so vir treh vrst - nevronov, astrocitov in oligodendrocitov, kar pomeni, da so nevroni in nevroglija celice, ki izhajajo iz skupnega predhodnika. Razlikovanje od ectoderm v grozde nevronskih matičnih celic se začne pod vplivom proneural genov bHLH družino proizvodov in blokira ekspresijo transmembranski receptor proteinski derivati Notch družini genov, ki omejujejo določitev in zgodnje diferenciacije nevronskih matičnih celic. Po drugi strani pa ligande zarezo receptorjev delujejo transmembranski proteini Delta sosednjih celic zaradi zunajcelične domene, ki so neposredni stiki celica-celica z induktivnim interakcijo med izvornih celic.

Nadaljnja izvedba programa embrionalne nevrogeneze ni nič manj zapletena in se zdi, da bi morala biti specifična za vrsto. Vendar pa rezultati neyroksenotransplantatsionnyh študije kažejo, da imajo matične celice izrazito razvojno konzervativne, da nevronske matične celice se lahko selijo in razvijati, ko so presajeni v podganjih možganov.

Znano je, da ima pri sesalcih CNS zelo nizko kapaciteto za reparativnega regeneracijo, za katero je značilno pomanjkanje zrele možgane vsi znaki novih celic, za zamenjavo mrtve celice zaradi nevronske poškodbe. Vendar pa je v primeru presaditve neuroblasts preteklosti ne samo prizhivlyayutsya, razmnožijo in se razlikujejo, ampak tudi sposobni integrirati v strukturo možganov in deluje nadomestiti izgubljenih nevronov. Ko so bili storjeni presnovni celici nevronskih celic, je bil terapevtski učinek bistveno šibkejši. Takšne celice so pokazale majhno sposobnost migracije. Poleg tega nevralne progenitorne celice ne reproducirajo arhitekture nevronskih mrež in se funkcionalno ne vključijo v možgane prejemnika. V zvezi s tem se aktivno proučujejo vprašanja reparativno-plastične regeneracije pri presaditvi neformiranih večpotentnih živčnih izvornih celic.

Študija M. Alexandrova s sodelavci (2001) je v prvem izvedbenem primeru, so bili poskusi prejemniki zrelih samicah podgan in donatorji so razvoj 15-dnevni zarodkov. Prejemniki smo odstranili del temenske skorje in votlina presajenih mehansko blokiran domnevno zarodkov skorje tkivo, ki vsebuje multipotentne matične celice prekata in subventricular regijo. V drugi izvedbi eksperimentov izvedli presaditev nevronskih izvornih celic 9 tednov človeških fetalnih možganov polovozrelh podgan. Iz periventrikularne zarodkov območja avtorji so rezine Izoliran možganskih tkivih, v njihov gojitvenem mediju in F-12 dobimo s ponovnim pipetiranjem celične suspenzije, nato gojimo v posebnem srednje NPBM dopolnjen z rastnimi faktorji - FGF-ja, EGF in NGF. Celice gojimo v suspenzijski kulturi pred tvorbo neurospheres, ki so dispergirani in ponovno oborjene v kulturi. Po 4 odsekih s celotnim obdobjem gojenja 12-16 dni so bile celice uporabljene za presaditev. Prejemniki so desyatisutochkye zreli podgane in dvomesečno Wistar podgan, ki je v predelu stranske prekata injicirali 4 xl suspenzijo človeških živčnih matičnih celic brez imunosupresijo. Rezultati kažejo, da so celice ločena prekata in subventricular pas zarodka možganske skorje zaznamkov podgane alotransplantata pri odraslih možganih še razviti, da se, faktorji različno prejemnik mikrookolje možganov ni blokira rast in diferenciacijo nevronskih izvornih celic zarodka. V zgodnjem obdobju po presaditvi multipotentne celic nadaljeval mitotićno delitev in aktivno preselili iz območja tkiv v možganih prejemnika. Presajene embrionalne matične celice, ki imajo velik potencial za migracije, so na voljo v skoraj vseh plasteh skorje presadka prejemnik mozga ob progi in v beli zadevi. Dolžina migracije sredino živčnih celic je vedno znatno nižje (do 680 mikronov) kot glialnih celic (do 3 mm). Strukturne vektorji za prehod astrocitov so krvne žile in vlaknenih struktur možganov, ki so opazili tudi v drugih študijah.

Prej smo verjeli, da je kopičenje označenih astrocitov v območju poškodbe možganske skorje prejemnika morda posledica nastanka gialne pregrade med tkivom presadka in prejemnikom. Vendar pa je študija strukture kompaktno lociranih celičnih cepljenk pokazala, da je njihova cytoarhitaktika značilna po naključju, brez plasti čne porazdelitve presajenih celic. Stopnja naročanja na presajenih nevronov, ki se približujejo, da normalnih korteks možganskih celic le v odsotnosti glialne pregrade med tkiva darovalca in prejemnika. V nasprotnem primeru je bila struktura celic presaditve netipična in nevroni so bili podvrženi hipertrofiji. Z neyroimmunohimicheskogo tipkanja presajenih celic v transplantacijah inhibitorne GABA-Ergić nevroni PARV pokazala bili odkriti ekspresija proteinov, CALB in NPY. Posledično v vzgojnih možganih vztrajajo mikroekološki dejavniki, ki lahko podpirajo proliferacijo, migracijo in specifično diferenciacijo nevronskih večpotentnih celic.

V kulturi človeških izvornih celic, izoliranih iz možganov periventrikularne 9 tednov starih zarodkov, M. Alexandrova et al (2001) v četrtem prehoda nestinpozitivnyh na voljo številne multipotentne celic, od katerih nekateri so bili obdelani diferenciacije in vitro in razvije nevronske tipa, ki se ujema rezultate raziskav drugih avtorjev. Po presaditvi v možgane odraslih podgan kultiviramo človeških izvornih celic mitotically razdeljena in potuje v tkanino heterolognega možganov prejemnika. V presaditvah celic so avtorji opazili dve populaciji celic - majhnih in večjih. Pred kratkim preselili v parenhima in strukture vlaken v možganih prejemnika rahlo razdalje - do 300 mikronov. Najdaljši pot migracije (do 3 mm), je značilnost majhnih celic, od katerih so nekateri deli na astrocitov, ki so se z uporabo monoklonskih protiteles GFAP. Obe vrsti celic smo našli v steni stransko prekata, kar kaže, da je proizvodnja transplantiranih celic v lezije rostralnog migracijskega toka. Astrocitov pridobljene nevralne izvorne celice človeških in podganjih preselili večinoma s krvne kapilare in strukture vlaken prejemnice možganov, ki sovpada s podatki drugih avtorjev.

Analiza diferenciacije človeških izvornih celic in vivo z uporabo monoklonskih protiteles proti GFAP, CALB in VIM je pokazala nastanek astrocitov in nevronov. Za razliko od celic podganjih cepljenk, je bilo veliko človeških matičnih celic vampin-pozitivno. Zato se del človeških večpotentnih celic ni razlikoval. Kasneje, isti avtorji so pokazali, da so bile človeške nevronske matične celice presadili brez uporabe imunskim po opravljenem presaditev v možganih podgan za 20 dni, brez dokazov imunskega agresije na glialnih celic odraslih možganih.

Ugotovljeno je bilo, da celo nevralne izvorne celice Drosophila prizhivlyayutsya in opraviti diferenciacijo v možganih je tako obrnjena proč od taksonov žuželk, kot podgana. Pravilnost avtorjev poskusa ni dvoma: v transgenih Drosophila vrstice, ki vsebujejo gene humane nevrotrofičnih faktorjev NGF, GDNF, BDNF, smo vstavili v vektor v skladu Casper Drosophila Ste šok promotor, tako da je telesna temperatura sesalca samodejno pokliče njihovo izražanje. Avtorji prepoznala Drosophile celice stroja bakterijske galaktozidaze gen z histokemična X-Gal obarvanje. Poleg tega se je izkazalo, da so nevralne izvorne celice Drosophila specifično reagirajo na nevrotrofičnih faktorjev, ki ga kodira človeških genov: The ksenotransplantacija celic iz transgenih linij Drosophila vsebujejo GDNF gena v njegovi diferenciacijo nevronskih izvornih celic močno poveča sintezo tirozin hidroksilazo in gen NGF celic aktivno proizvajajo acetilholinesteraze . Podobno genzavisimye Reakcijsko inducira v ksenotransplantata presajenega alotransplantata z njim embrionalnega živčnem tkivu.

Ali to pomeni, da specifična diferenciacija živčnih izvornih celic povzroča vidonsko specifični nevrotrofični dejavniki? Glede na rezultate avtorji ksenogenskega proizvajajo nevrotrofnih dejavniki imajo poseben vpliv na usodo presadkov, ki je nato razvil bolj intenzivno in je 2-3 krat večja od velikosti presadkov, vstopili v možgane brez dodatka presadkov. Zato ksenotransplantata celice vsebujejo promotor gena, zlasti gen kodira nevrotrofičnega faktorja (GDNF) humani-izveden iz glije izvaja na razvoj transplantacij vidonespetsifichesky učinka podobno delovanju ustreznega promotor. Znano je, da GDNF povečali preživetje dopaminergične nevrone pri zarodkov podgane srednjih možganov in povečuje presnovo dopamina s temi celicami in inducira diferenciacijo tirozin hidroksilazo pozitivnih celic, povečanja rasti aksonov in nevronov naraščajočo velikostjo telesa. Podobni učinki so opazili v kulturi dopaminergičnih nevronov v srednjih možganih podgan.

Po ksenotransplantacija nevronskih izvornih celic v možganih odraslih podgan izrazili aktivno migracije. Znano je, da proces migracije in diferenciacije živčnih matičnih celic nadzira niz posebnih genov. Sprožitev signalne migracijski predniške celice na vrh diferenciacije se daje proteinski produkt v proto-onkogena c-ret skupaj GDNF. Naslednji signal prihaja iz gene mash-1, ki nadzira izbiro poti razvoja celic. Poleg tega je specifična reakcija diferencirnih celic odvisna tudi od a-receptorja ciliarnega nevrotrofičnega faktorja. Tako je dobil povsem drugačne genske sestave ksenogenskih človeške izvorne celice živčevja in možganske celice prejemnik podgana, je treba priznati, ne le vidonespetsifichnost nevrotrofnih dejavnikov, ampak tudi najvišji evolucijski ohranjanje genov, ki so odgovorni za posebne diferenciacije nevronskih matičnih celic.

Bo mogoče ksenotransplantacija zarodka neyromateriala v nevrokirurških praksi zdravljenje nevrodegenerativnih patološke procese zaradi zmanjšane sinteze mielinskega oligodentrocitnega viden. V tem času, najbolj intenzivno reševanje problematike Neurotransplantation, povezani s pridobitvijo embrionalnih ali zrelih alogensko popkovnične živčnih matičnih celic v kulturi, nato pa njihovo usmerjeno diferenciacijo v neuroblasts ali specializiranih nevronov.

Transplantacija nevronskih izvornih celic

Za spodbujanje širjenja in diferenciacijo živčnih matičnih celic organizma odraslih lahko presadijo zarodka živčne tkiva. Ni izključeno, da ga alotransplantata uvedena z matičnimi celicami v živčnem tkivu samega zarodka lahko opravi proliferacijo in diferenciacijo. Znano je, da po poškodbe hrbtenjače regeneracija živčnih vodnikov speljani skozi raztezka poškodovanih aksonov in brstenja aksonov kolateralno brstenje motoričnih nevronov nepoškodovane. Glavne ovire za spinalno regeneracijo vrvi, se tvorba vezivnega poškodbe tkiva v območju brazgotin, anoksijskih in degenerativne spremembe v centralnih nevronov, NGF primanjkljaja in prisotnost v razgradnih mielinskega produktov prizadeta območja. Izkazalo se je, da presaditev v poškodovani hrbtenjači različnih celičnih tipov - drobcev ishiadičnega živca odraslih živali, zarodka temenske korteksa, hipokampus, hrbtenjače, Schwannovih celic, astrocitov, microglia, makrofagih, fibroblastih - prispeva k regeneraciji poškodovanih aksonov z brstenje in omogoča novo nastali aksonov rastejo preko površina poškodbe hrbtenjače. To je eksperimentalno dokazano, da presaditev plodu živčnega tkiva poškodbe hrbtenjače z delovanjem nevrotrofičnih faktorjev pospešuje rast prizadetih aksonov, preprečuje nastanek glialne brazgotine in razvoj anoksijskih in degenerativnih procesov v centralnih nevronov, ker celice presadijo zarodkov nevronske tkivo postopku hrbtenjače, integracijo s sosednjimi tkivi in spodbujanje brstenja aksonov skozi prizadetem območju z oblikovanjem sinaps den driticheskogo vrsto spinalnih nevronov.

To področje regenerativne medicine in plastike prejel največji razvoj v Ukrajini zaradi dela znanstvene ekipe, ki jih VI vodi Tsymbalyuk. Najprej, to eksperimentalna študija učinkovitosti presaditve zarodka živčnega tkiva poškodbe hrbtenjače. Pri avtolognih perifernih živcev najbolj izrazite spremembe destruktivne avtorji opazili distalni tesnilno območje, kjer je 30. Dan po operaciji so v povezavi z naravo popravljalni procesov. Ko alograft morphofunctional stanje vsajene živca na 30. Dan je značilna huda degradacija pojavov maščobne degeneracije in amiloidoze v ozadju osrednjega vnetne infiltracije limfoidnokletochnoy s prevladujočo atrofijo Schwannovih celic. Presaditvijo zarodka živčnem tkivu veliki meri pripomogel k obnovitvi hrbtenjače prevodnosti, zlasti pri živalih, ki Operacija je bila izvedena v prvih 24 urah po poškodbi: proti izboljšanju vnetnih porušitve procesov označena hipertrofija in hiperplazija sinteze proteina in energoprodutsiruyuschih ultrastrukturni elementov hrbtnega nevroni hipertrofija in oligodendrocite hiperplazija, 50% zmanjšanje amplitude akcijskega mišic potenciala in 90%, - hitrost gospodarski zagon. Pri ocenjevanju učinkovitosti presaditve fetalne nevralne tkiv odvisno od območja je bilo ugotovljeno, da so opazili najboljše rezultate, kadar ga dajemo direktno v območje presaditvijo poškodbe hrbtenjače. Pri popolnem prehodu hrbtenjače presaditve fetalnega živčnem tkivu je izkazala za neučinkovito. Dinamični študije so pokazale, da so optimalni čas za presajanje zarodka živčnim tkivom v prvih 24 urah po poškodbo hrbtenjače, medtem operacija obdobju izrazito sekundarne ishemije in vnetnih sprememb, ki se pojavljajo v th dan 2-9 po poškodbi, je treba priznati nepraktično.

Znano je, da huda kraniocerebralne poškodbe izzove močno in trajno aktiviranje peroksidacije lipidov v začetnih in vmesnih fazah posttravmatske obdobju v poškodovanega možganskega tkiva in celotnega organizma, in daje tudi metabolizem energije v poškodovani možgani. Pod temi pogoji cepljenje fetalne živčnem tkivu za travmatsko poškodbo prispeva k stabilizaciji procesov peroksidacijo lipidov in poveča zmogljivost antioksidativnega sistema možganov in celotnega organizma, poveča antiradical zaščito v 35-60 th dnevnem posttravmatski obdobju. V istem časovnem obdobju po transplantaciji zarodnih živčnem tkivu običajnih energijo metabolizma in oksidativne fosforilacije procesov v možganih. Poleg tega se je pokazalo, da je prvi dan po eksperimentalni travmatske poškodbe možganov Vprašanje poloble impedanco tkiva zmanjša z 30-37% od kontralateralno - 20%, kar kaže na razvoj generalizirane možganskega edema. Pri živalih, ki so doživeli presaditev plodu živčnega tkiva edem involucijo pojavi veliko hitreje - že sedmi dan je povprečna vrednost impedance tkiva travmatizirane polobli dosegla 97,8% ravni nadzora. In popolno obnovo vrednosti impedance na 30. Dan so opazili le pri živalih presajenih z zarodka živčnem tkivu.

Smrt nevrone v možganih po hude travmatične poškodbe možganov, je v veliki meri prispeva k razvoju posttravmatskega zapletov. Še posebej občutljivi nevroni škode vključiti dopaminergičnih in noradrenergičnih sistemov, srednjih možganov in možgansko deblo. Zmanjšanje ravni dopamina v striopallidarnoy kompleksno in možganske skorje bistveno poveča tveganje za motnje gibanja in psihiatričnih motenj, epileptoformnih države in zmanjšanje proizvodnje dopamina v hipotalamusu je lahko vzrok številnih avtonomnih in telesne motnje, ugotovljenih v daljni posttravmatski obdobju. Rezultati študij na testnih travmatske poškodbe možganov kažejo, da presaditev fetalne živčnem tkivu prispeva k obnovitvi dopamina v poškodovano polobli možganov, dopamina in noradrenalina - v hipotalamusu, kakor tudi povečanje ravni noradrenalina in dopamina v srednjih možganov in hrbtenjače. Poleg tega, kot posledica presaditve zarodka živčnem tkivu v živalskih modelih možganske poškodbe polobli normirane odstotek fosfolipidov in povečano vsebnost maščobnih kislin (C16: 0, C17: 0, C17: 1, C18: 0, C18: 1 + C18: 2, C20 : 3 + C20: 4, C20: 5).

Ti podatki potrjujejo stimulacijo regenerativno-plastičnih procesov s transplantiranim embrionalnim nevronskim tkivom in nakazujejo reparativno-trofični učinek cepljenja na možgane prejemnika kot celote.

Posebno pozornost je treba nameniti kliničnim izkušnjam osebja nevrokirurškega inštituta. A.P. Romodanov Academy of Medical Sciences Ukrajine o presaditvi zarodka živčnega tkiva v cerebralno paralizo - zelo kompleksne bolezni s hudimi kršitvami motoričnih funkcij. Klinične oblike cerebralne paralize je odvisna od stopnje poškodbe integriranih struktur, ki so odgovorni za ureditev mišični tonus in oblikovanje motornih stereotipov. Trenutno obstaja veliko dokazov, ki bi kazali, da so kršitve motorike in mišični tonus pomembnih patoloških sprememb pri nadzoru motorja striopallido-thalamocortical sistema. Striopallidarnoy povezava v tem sistemu izvaja prevladujoč funkcijo prek nigrostriatni proizvodnjo dopamina. Direktna pot prične izvajanje nadzora nad thalamocortical nevronov lupini posredovane gammaaminomaslyanoy kislina (GABA) in substanco P in projekcijah neposredno na področju motornega notranjega segmenta Globus pallidus in substantia nigra. Indirektna pot katerega učinek je realiziran vključuje GABA in enkefalin, izvira iz lupine nevronov in vpliva na jedro bazalnih ganglijih preko priključka sekvenco, ki obsega zunanji segment Globus pallidus in subtalamičnem jedru. Motnje prevajanja povzroči hipokinezija ravno pot, medtem ko zmanjšanje prevodnosti struktur posredno pot vodi do hiperkinezij z ustreznimi spremembami v mišični tonus. Celovitost GABAergic poti na različnih ravneh v sistemu nadzora motorja in integracijo dopaminergičnih povezav na ravni lupine so bistvenega pomena za uravnavanje thalamocortical interakcij. Najpogostejša manifestacija motorja patologije v različnih oblikah cerebralne paralize je kršitev mišičnega tonusa in je tesno povezano spremembo refleksne aktivnosti mišic.

Transplantacija embrionalnega nevralnega tkiva v otroški možganski paralizi zahteva natančno analizo narave poškodb možganskih struktur. Na podlagi ugotovljenega dopamina in GABA v Subarahnoidalna cerebrospinalni avtorjev tekočine so podrobno stopnjo integracije funkcionalnih motenj možganskih struktur, zaradi česar je mogoče objektivizirati rezultate kirurškega posega in da popravi ponoviti Neurotransplantation. Fetalni živčnega tkiva (abortny Industrijska 9-tedensko zarodkov) smo presadili v parenhima lupine precentral gyrus možganskih polobel, odvisno od resnosti atrofičnega sprememb. V pooperativnem obdobju niso opazili nobenih zapletov ali poslabšanja bolnikov. Pozitivne dinamika so opazili pri 63% bolnikov z spastičnih oblikah, 82% otrok s kloničnih-estetski obliki in le pri 24% bolnikov z sklepne bolezni. Ugotovili smo negativen učinek na rezultate delovanja visokega nivoja nevrozenzitivnosti s prisotnostjo avtoantivij do nevrospecifičnih proteinov. Neučinkovito presaditev zarodkov živčnem tkivu se pojavili pri bolnikih, starih od 8-10 let in več, pa tudi pri bolnikih s hudo srbenja sindromom in episindroma. Klinična učinkovitost transplantaciji zarodnih živčnem tkivu pri bolnikih z spastičnih oblikami cerebralne paralize kaže statomotornyh nastajanje novih spretnosti in prostovoljne premike s popravkom patoloških gibalnih vzorcev in zmanjšanja stopnje spastičnost, nenormalno držo in odnosom. Avtorji menijo, da je pozitiven učinek presaditve zarodka živčnem tkivu rezultat normalizacijo vpliva na funkcionalno dejavnost supraspinalni struktur, vključenih v regulacijo tonu drže in prostovoljnih gibanj. V tem primeru so pozitivni klinični učinki transplantaciji zarodnih živčnem tkivu spremlja zmanjšanje vsebnosti nevrotransmiterjev v subarahnoidno cerebrospinalni tekočini, kar kaže, da je predelava sestavni interakcije vpliva na možganske strukture.

Obstaja ena težje oblike nevrološke bolezni - minimalno zavestno stanje, problem zdravljenje katerih žal še zdaleč rešen. Predstavlja minimalno zavestno stanje polyetiology subakutne ali kronične bolezni, ki izhajajo iz težkih organskih poškodb centralnega živčevja (predvsem korteksa), in označen z razvojem in panapraksii panagnozii na relativno shranjenih funkcija segmentnih odsekov izhajajo formacije in limbični možgani mrežastim kompleks. Nadaljnje študije (1 do 3 let) so pokazali, da je minimalno zavestno stanje ni končna diagnoza trajne poškodbe živčnega sistema pri otrocih, in se pretvori v organsko ali demence ali kronično vegetativno stanje. V Oddelku za rehabilitacijsko nevrokirurgijo Inštituta za nevrokirurgijo. A.P. Romodanov Sciences Ukrajine 21 bolnikov z posledice apaličnim sindrom transplantaciji zarodnih živčnem tkivu izvedemo. Pod splošno anestezijo smo uporabili rezalnik krona igle luknje na površini najbolj izrazite atrofični sprememb, opredeljenih v računalniku ali magnetno resonanco, in v prisotnosti razpršenega atrofije sive ali bele snovi, ki prihaja v presadka in osrednji precentral gyrus možganov. Po odprtju Mater kosov Dura od 8-9 tednov star zarodek tkiva Zaznamki sensorimotor skorje intracortical vsadili s posebno napravo. Število vzorcev vsajene tkiva je od 4 do 10, ki je odvisna od količine in velikosti igle vrtine lokalne spremembe sredice. Za razliko od drugih vrst patologije na apaličnim sindromom, so avtorji poskušali vsaditi toliko tkivo ploda v najbolj ugodnih področjih možganov. Dura mater je bila šivana, izdelana je bila plastika okvare lobanje. Med operacijo, pri vseh bolnikih je pokazala izrazitih sprememb tako korteks (atrofija, pomanjkanje pregibi, razbarvanje in pulziranja sredice) in možganske ovojnice (zadebelitev dura mater, pomemben odebelitev arahnoidnih membrane z ki ima tudi svojo krvne žile, zlitje lupine z osnovno možgansko snovjo). Te spremembe so bolj izraziti pri bolnikih z anamnezo obstajajo znaki prenesenim vnetnih možganskih lezij. Pri bolnikih, ki so CŽS hipoksije, ki jo razpršene atrofični sprememb snovi možganov, zlasti kortikalnih oddelkov, s povečanjem subarahnoidno prostoru prevladujejo, brez pomembne spremembe v membranah možganov. Polovica bolnikov je pokazala povečano krvavitev mehkih tkiv, kosti, možganske snovi. Po operacijah v obdobju od šestih mesecev do treh let, se je stanje pri 16 bolnikih izboljšalo, pet bolnikov je ostalo nespremenjeno. Pozitivna dinamika je bila opazovana tako s strani motorja kot z duševne sfere. Mišični tonus je zmanjšal v desetih bolnikov in bolnikova telesna aktivnost povečala (zmanjšala parezo, izboljšati koordinacijo gibanja), je manipulativno sposobnost zgornjih okončin pri petih otrocih bistveno povečal. Štirje bolniki zmanjšajo pogostost in resnost epileptičnih napadov in enega otroka za celotno obdobje opazovanja napadov po operaciji ni obstajal. Agresivnost se je v dveh otrok, pri dveh bolnikih s hudo okvaro bulbarna izboljšano požiranju, so dva otroka lahko grickanje sami v 2 tednih po operaciji. Ugotovil je zmanjšanje resnosti duševnih motenj, devet otrok po operaciji je postal bolj miren spanec in pozornost izboljšal v sedmih bolnikih. Trije bolniki s posledicami apaličnim sindromom začel prepoznati svoje starše, eno - da sledite navodilom, dva - torej besede, tri se je zmanjšala stopnjo dizartrije. Avtorji ugotavljajo, da znatno izboljšanje pri bolnikih, ki se začne po 2 meseca po operaciji, doseže največ 5-6 mesecev, nato pa se je stopnja izboljšanja upočasnjuje in konec leta, 50% bolnikov procesu stabilizacije. Pozitivni učinek neurotransplantation služil kot osnova za reoperation pri šestih bolnikih s posledicami apaličnim sindrom, vendar na drugi polobli možganov. Tehnike in druga metodologija presaditev so enake tistim iz prve operacije, vendar klinični učinek drugem koraku je bila nižja, vendar pa ne pride po prvi in po drugi operaciji resnih zapletov. Po avtorjev, terapevtsko mehanizem delovanja povezan s neurotransplantation nevrotrofični vpliva transplantiranega embrionalnega živčnem tkivu, ki vsebuje veliko količino rasti, hormonskih in drugih biološko aktivnih snovi, ki spodbuja popravilo poškodovanih nevronov in plastični reorganizacije prejemnik možganskega tkiva. Ni izključeno in aktiviranje vpliva na aktivnost živčnih celic, ki so se ohranili morfološko, ampak so ga izgubili zaradi funkcionalno aktivnost bolezni. Je hiter nevrotrofični učinek je mogoče razložiti z izboljšanjem funkcij bulbarna pri nekaterih otrocih ob koncu prvega ali drugega tedna po operaciji. Predpostavlja se, da so poleg tistih iz tretjega, četrtega meseca med vsadki in gostiteljico možganih ustanovljena morfofunkcionalne komunikacijo prek katerega neyrotransplantat nadomešča funkcijo mrtvih možganskih celic, ki je podlaga za izboljšanje tako v motorju in duševnih funkcij bolnikov.

Transplantata Učinek ploda živčnega tkiva za reorganizacijskih interneuronal vezi preučevali eksperimentalno. Avtorji na belih podgan z uporabo lipofilnega fluorescentne oznake dil (1,1-dioctadecyl-3,3,3 \ 3'-tetrametilindokarbotsianina perklorata) in konfokalna vzorce laserskega skeniranja raziskano obnovitvenih medmodulnimi aksonskih povezav v območju mehanskih poškodb možganske skorje na embrionalnih presaditve ozadju živčno tkivo in brez njega. Ugotovilo da uvedba fetalne živčnem tkivu v poškodovanem območju predvideva rast aksonov, ki se po prehodu skozi presadka priključen na sosednjem možganskem tkivu, ker brez transplantaciji plodu nevronske poškodbe tkiva coni je za gojenje aksonov nepremostljivo oviro. V tem delu je presajanje zarodka (15-17 th dan brejosti) neocortex. Naši rezultati - Nadaljnji dokazi v korist aktivno vplivne zarodka nevrološkega presadka tkiva na posttravmatska preureditev interneuronal razmerja sosednjih strukturnih in funkcionalnih modulov možganski skorji. Presaditvijo zarodka živčnem tkivu zagotavlja delno okrevanje odnosov med razdeljenimi odseki poškodb možganske skorje z ustvarjanjem ugodnih pogojev za rast aksonov v coni presadka neyrotrofichoskih dejavnikov. Obstoj takega učinka je izkazala eksperimentalno in obravnavane v literaturi kot dokaz visoke možnosti plastičnih poškodovane možganov odraslih živali. V zvezi s tem je presaditev celic zdaj obravnava kot optimalno terapevtske strategije za ponovno vzpostavitev funkcije poškodovanega človeškega centralnem živčnem sistemu.

Naši podatki o učinkovitosti ploda možganov živčnem tkivu kot eksogenih presaditvi medij za aksonskih možnosti za rast potrjujejo namensko oblikovanje komunikacijskih povezav med sosednjimi neokrnjenih delov možganov. Zdi se dejansko delo za preučevanje učinka transplantaciji živčnem tkivu od dinamike funkcionalnih parametrov osrednjega živčevja, katerih naloga je bila raziskati vpliv transplantaciji fetalnih zaznamki locus coeruleus (LC) na morphofunctional indikatorjev LC nevronov in prejemnikov gibalne aktivnosti. Prejemniki so bili ženski Wistar podgane, donatorji - 18-dnevni zarodki podgan na isti liniji. Transplantacija embrionalne LC je bila izvedena v votlini tretjega možganskega možganskega ventrikla. Histološko je bilo odkritje transplantacij v 75% prejemnikovih živali. V primerih vsaditev leži ob steno prekata za zapolnitev 1 / 5-2 / 5 svojih lumen, in je bila uspešna. Po 1 in 6 mesecev po operaciji je presajenih nevronska tkivo morfološka značilnost je struktura, ki bi prišlo, če je to normalno ontogenetski razvoj, LC strukture. Naši podatki kažejo, da je pri živalih, ki so bile presajene zavihek LC ploda spreminja dinamično aktivnost in povečano aktivnost matrika LC celična jedra kromatina. Zato, da je okrepitev dejavnosti nevronov lastne LC, ampak dobil navajeni presadka je tudi funkcionalno aktiven. Znano je, da tako imenovana lokomotorna regija srednjega možgana praktično sovpada z lokalizacijo LC. Avtorji menijo, da je podlaga za spremembe v dejavnosti motorja podgan prejemnic aktivacija TK celic, tako lastniško in presadka, z dodelitvijo, ki je posledica velike količine noradrenalina, tudi v hrbtenice segmentih vrvjo. Tako se predvideva, da je povečanje lokomotorno aktivnost v pogojih presajanje LC v intaktni živali možganov zaradi prisotnosti funkcionalno aktivne presaditev integrirana z možgani prejemnika in ki prispevajo k aktiviranju delovanja gibalnega podgan.

Poleg tega je dokazano, da presajeni zarodkov neuroepithelial celice zaznamki neocortex hrbtenjače preživijo in se razlikujejo od neuroblasts, mlade in zrele nevrone 1-2 mesecih po presaditvi je poškodovanemu ishiadičnega živca odraslih podgan. V študiji dinamike NADRN pozitivni nevronov zaznamkov embrionalnih hrbtenjače in neocortex podgane heterotopične alotransplantati (15 podgana zarodkov na dan) za vzdolžni prerez ishiadičnega živci podganah prejemnikov pokazala vsadek od 70 do 80% neyrotransplantatov ki so bili odvisni od časa opazovanja. Neuroblasts enovito in bipolarna obliko z zaobljenimi svetlo jeder in enim ali dvema nukleoli začnejo se tvori v cepičev na en teden po operaciji, ki ga je spremljala nastajanje grozdov. Med neuroblasts avtorji niso odkrili celice, ki vsebujejo NADPH-diafopazy (NADPH-D). Po 7 dneh NADPH-pozitivnih so samo celičnih elementov krvnih žil - endotelijske celice kapilar v notranjosti presadka in endotelijske in vaskularnih gladkih mišičnih celicah ishiadičnega živca prejemnika. Ker pri celic vaskularnega gladkega mišičja, indukcija NO-sintaze (NOS) pojavi pod vplivom IL-1, so avtorji pripisujejo videz NADPH-pozitivnih celic gladkega mišičja v krvnih žilah ishiadičnega živca prisotnosti IL-1, sintetiziranega v poškodovanih živčnih debla. Znano je, da je v pogojih neyronogenez transplantaciji fetalnih možganov zaznamkov sinhroniziran z razvojem nevronov in situ. Rezultati morfoloških raziskav kažejo, da je razlikovanje med živčnih elementov presaditev sedem dni po presaditvi ustreza celične diferenciacije podobno možganih novorojenih podgan. Tako v heterotropične presaditev v periferno živčnih presajeni živčnih zarodkov celice kažejo sposobnost sinteze NADPH-D. V presaditev hrbtenice mozga razkriva več nevronov, ki vsebujejo NADPH-D, cepiči kot v neocortex, vendar sintezo dušikovega oksida v presajenih nevronov začne najkasneje razvoj in situ. V vretenčarjev centralnega živčnega sistema pojavljajo NOS-pozitivne celice že v prenatalno obdobje. Menijo, da NO prispeva k tvorbi sinaptičnih povezav v možganih v razvoju, in prisotnost NOS-pozitivnih živčnih aferentov zagotavljajo neuroblasts NO sintezo v malih možganih, stimulira migracijo in diferenciacijo nevronov, pri čemer se tvori Cytoarchitectonics normalno možgane. Pomembna vloga NO v sinapsogeneze nameščen v tectum - NOS-pozitivni nevroni so bili le tisti, ki so imeli na sinaptične povezave z mrežnice celic.

Znano je, da je dušikov oksid eden od regulatorjev možganske aktivnosti, kjer je nastal iz arginina pod vplivom NO sintaze, ki ima diaphorozno aktivnost. V CNS se N0 sintetizira v endotelijskih celicah krvnih žil, mikroglije, astrocitov in v nevronih različnih delov možganov. Po travmatski poškodbi možganov, pa tudi hipoksiji in ishemiji, se poveča število nevronov, ki vsebujejo NO, kar je eden od regulatorjev možganskega pretoka krvi. Glede na sposobnost N0, da inducira sinapsogenezo, je poseben interes študija tvorbe celic, ki vsebujejo NO, v razmerah nevrotransplantacije na ozadju travmatskih poškodb prejemnega živčnega tkiva.

Prav tako je pomembno, da preuči vpliv na Neurotransplantation pogojeno refleksno vedenje stereotip. V poskusih, ki študirajo vpliv daleč in možganska (med CII in CIII) cepičev embrionalnih modrikaste lise (17-19 th dan v nosečnosti) in vsebino pomnilniške kateholaminov procesov pri podganah z uničeno frontotemporalne neocortex pokazale, da elektrolitsko škoda frontotemporalna korteks daje stereotip pogojena emocionalni odziv izogibanje refleks (spomin), zmanjša fiziološke aktivnosti, zmanjšuje količino noradrenalina v kortikalne območju sprijetih vendar povečuje tako da njena višina v hipotalamusu, pri čemer znižanje koncentracije adrenalina, vendar v krvi in adrenalne žleze njegove količine poveča.

Kot rezultat intracerebralnim transplantaciji embrionalnih tkiv modrikaste lise na 81,4% živali vrniti stereotip odziv pogojen izogibanje čustveno refleks, motnje elektrolitska poškodbe frontotemporalnih področji možganske skorje normalizirane adrenalina v srednjih možganov mrežastim tvorbe, hipotalamusa in neocortex in hipokampus celo dvigne nivo, v kombinaciji z zmanjšanjem koncentracije krvnih adrenalina.

Oddaljeni presaditev embrionalnih tkiv modrikaste lise ne le spodbuja obnovo naglušne stereotip pogojnega odziva izogibanja čustveno refleksno pri podganah z lezijami elektrolitsko frontotemporalne skorje, temveč tudi poveča vsebnost noradrenalina in adrenalina, predvsem v hipotalamusa, krvi, srca in nadledvičnih žlez. Predpostavlja se, da je to posledica cepiti vaskularizacijo, prodiranje nevrotransmiterjev v krvnem obtoku, njihov prehod skozi krvno-možgansko pregrado in aktivacijske mehanizme adrenalina ponovnega privzema in privzema noradrenalina ga tipov 1, 2, 3. Avtorji menijo, da je stabilizacija dolgih raven noradrenalina v prijetje presadka in funkcijo presadka se lahko obravnava kot pojav njenega postopnega sproščanja nevronov v minimalnih odmerkih modrikaste lise.

Pozitivni klinični učinki transplantaciji embrionalnega živčnem tkivu lahko zaradi zmožnosti in slednjo vpliva na procese nastajanja novih plovil v regulaciji neposredno sodelovanje rastnimi faktorji in citokini. Aktivirani vaskulogeneze angiogenski rastni faktorji - vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF), FGF, PDGF, in TGF, ki se sintetizirajo v ishemije služi točko porekla angiogeneze. Dokazano je, da pride do izčrpanja vaskularnega potencialom rasti pri postopku staranja telesa, ki ima pomembno vlogo v patogenezi bolezni, kot je koronarna srčna bolezen in ateroskleroza spodnjih okončin. Ishemija tkiv se razvije in z različnimi drugimi boleznimi. Uvedba angiogenskih faktorjev v ishemije coni (terapevtsko angiogenezo) stimulira rast krvnih žil v ishemičnih tkiv in izboljšuje mikrocirkulacijo zaradi razvoja zavarovanja obtoka, kar po drugi strani povečuje funkcionalno aktivnost prizadetega organa.

Najbolj obetavne za klinično uporabo so VEGF in FGF. Rezultati prvih randomiziranih preskušanj so se izkazali za spodbudne, še posebej ob pravilni izbiri optimalnih odmerkov in načinih uporabe angiogenih dejavnikov. V zvezi s tem je bila opravljena eksperimentalna ocena angiogenske aktivnosti ekstrakta, izoliranega iz človeškega tkiva možganskega tkiva. Uporabili smo abortny materiala, dobljenega po dvajsetem tednu nosečnosti in obdelamo po metodi I. Maciog et al (1979) pri modificiranju ANRF IC. Ta droga je analog "dodatek za rast endotelijskih celic" ("Sigma") in je naravna mešanica človeških angiogenih dejavnikov, ki vključujejo VEGF in FGF. Poskusi so bili izvedeni na podganah z modeli ishemije tkiva zadnjega okončina in miokarda. Na osnovi raziskave aktivnosti alkalne fosfataze v poskusnih živalih, zdravljenih z ekstraktom zarodka živčnem tkivu, so pokazali povečanje števila kapilar na enoto površine miokarda - tako na vzdolžno in prečno glede na rezine srca. Angiogensko aktivnost zdravila z neposrednim vnosom v ishemično območju in v primeru sistemskega (intramuskularno) dajanje kaže, kar je povzročilo zmanjšanje povprečne področju post-infarktne brazgotine.

V vsakem izvedbi je presajanje zarodkov živčnem tkivu, je zelo pomembno, da izberete pravi gestacijski obdobje presajeni zarodka materiala. Primerjalna analiza celičnih pripravkov iz embrionalnega ventralni mezencefalona 8-, 14- in 16-17 dni starih zarodkov podganah tri mesece po intrastriarnoy neurotransplantation spolno zrelih podgan z parkinsonizma v avtomatizirani preskus apomorfinindutsirovannoy motornega asimetrije pokazala pripravke celičnih znatno višje učinkovitosti CŽS 8 dni zarodki in najmanjše - iz 16-17-dnevnega zarodnega živčnega tkiva. Dobljeni podatki so bili korelirani z rezultati Histomorfološke analize, zlasti z dimenzijami cepljenke, glialne reakcijski resnost in število dopaminergičnih nevronov v njih.

Razlike terapevtski učinek živčnih celicah tkiva ploda je lahko povezana s stopnjo zavezanosti in nezrelosti celic samih, in njihov odziv na različnih rastnih faktorjev, ki so razporejeni v območju induciranih poškodb dopaminergičnih nevronov. Zlasti učinek ESPG in FGF2 pri razvoju živčnih matičnih celic in vivo telencephalon pojavlja na različnih stopnjah embriogenezo. Neuroepithelial celice 8,5-enodnevni zarodkov miško, ko kultiviramo in vitro razmnožujejo v mediju brez seruma v prisotnosti FGF2, vendar ne EGF, ki reagirajo samo populacije matičnih celic, izoliranih iz možganov zarodkov v kasnejših stopnjah razvoja. Istočasno, nevralne izvorne celice proliferirajo v odgovor na vsako od teh mitogeni in rast aditivno povečano pri dodajanju FGF2 in ESPG v kulturah sajenja nizko gostoto celic. Menijo, da so EGF reaktivni nevralne izvorne celice iz germinalnih cone 14,5 dni starih zarodkov mouse linearne potomci FGF-reaktivnega nevronskih izvornih celic, ki so najprej pojavijo po 8,5 dneh gestacije. Potencialni fenotip živčnih in stegnih celic je odvisen od kompleksnega učinka njihovega mikrosokusa. Ko immunophenotyping nevronskih celic in hipokampusa periventrikularne področjih 8-12- in 17-20 tednov starih človeških zarodkov, ki jih citofluorometrijo tokov je pokazala velika nihanja, povezane tako z gestacijsko starost in posamezne ustavne funkcije donatorjev biomateriala. Ko kultiviranje nevronskih prekurzorskih celic v mediju brez seruma s selektivnim ESPG, FGF2 in NGF neurospheres tvorjen s hitrostjo v bistvu neodvisen od gestacije. Celice različnih področjih možganov 5-13 tednov človeškega zarodka v kratkem gojenje FGF2 v enoslojne kulture na laminina substrat v prisotnosti sledeh rastnih faktorjev, ki podpirajo širjenju 6 tednov z visokim odstotkom nestinpozitivnyh celic glede na vse spontane tvorbe celic z oznakami vseh treh črt nevronska diferenciacija. Celice so izolirane iz človeškega mezencefalona pri brejosti zarodkov presega 13 tednov, da se razmnožijo pod vplivom ESPG in tako se tvori neurospheres. Zahvaljujoč kombinaciji EGF in FGF2 je bil dosežen sinergijski učinek. Najbolj intenzivna širjenje živčnih matičnih celic, so opazili s pojavom neurospheres ko kultiviramo tkivo možganska skorja od 6-8 tednov starih človeških zarodkov v prisotnosti EGF2, IGF1 in 5% konjskega seruma na substrat z fibronektina.

Opozoriti je treba, da se vprašanja v zvezi z gestacijsko starost in Oddelka za zarodka CNS tkiva bolje uporabiti za namen Neurotransplantation ostajajo odprta. Odgovore je mogoče najti v razvoju možganov Neurogeneza, ki se nadaljuje v celotnem prenatalno obdobje - v roku, ko epiteliju nevralne cevi tvori strukturo večplastno. Verjetno je, da je vir izvornih celic in nove nevrone radialni glialne celice sestavljajo podolgovatih celic z dolgimi postopki, radialno usmerjena glede na steno možganskih veziklov, in v stiku z notranjo površino prekatov in zunanjimi stenami cerebralne pia površine. Prej radialne glia obdarjen le funkcijo nevronov trakta, s katero je migracija neuroblasts iz trebušne površine v oddelkih, in mu daje okvirni vlogo pri oblikovanju pravilnega laminarnega organizaciji skorje. Danes je ugotovljeno, da se razvoj radialne glije preoblikujemo v astrocite. Veliko tega se zmanjša pri sesalcih po rojstvu, ampak tiste vrste živali, pri kateri radialni glia ponavlja skozi odrasli neyronogenez aktivnih tokov in v poporodnem obdobju.

V kulture celic od radialnih glialnih embrionalnih neocortical tvorjen glodavcev nevronov in glialnih celic, in pri embrio brejosti od 14 do 16 dni (v obdobju največje neyronogeneza intenzivnosti v možganski skorji miši in podgan), tvorjen pretežno nevroni. Na 18. Dan embrionalnega diferenciacija pomaknjen proti tvorbi astrocitov z znatnim zmanjšanjem števila novo oblikovanih nevronov. Označevanje v glialnih celic in situ radialnih uporabo GFP dovoljeno za odkrivanje mehurčkov v votlini možganskih 15-16 dni starih podganjih zarodkov asimetričnih delitev označenih celic s pojavom hčerinskih celicah, ki imajo imunološke in elektrofiziološke značilnosti neuroblasts. Omeniti je treba, da v skladu z rezultati dinamičnih stališč, ki izhajajo neuroblasts uporablja mati celico radialne glije celice migrirajo na površini Pia.

Endogeni označevalec radialne glia je vmesni žarilno proteina nestinski. S fluorescenčno sortiranjem celic s pretočnim označenega z retrovirusom, povezanega z GFP in izražen pod nadzorom nestinski, dokazali, da so matične celice dentate gyrus območju hipokampusa in tega cikla osebo (material smo dobili pri operaciji za zdravljenje epilepsije) izražajo nestinski. Zato, da spadajo v radialne glia, ki pri ljudeh kot pri drugih sesalcih, ohranjen le v dentate gyrus.

Vendar pa je uspešnost presaditve celic ni odvisna le visoko preživetja donorskih celic in njihov potencial in diferenciacije funkcijo zamenjala okvarjene celice, temveč v prvi vrsti usmerjeno migracijo. Iz migracijske sposobnosti je odvisna popolna funkcionalna integracija presajenih celic - brez motenj v citokarhaktoniki prejemnikovih možganov. Ker je radialna glialnih celic v poporodnem obdobju skoraj povsem izpostavljena znižanju, je treba ugotoviti, kako lahko odrasli prejemniki donatorskih celic premakniti iz območja presaditve v centru poškodbe možganov. Obstajata dve različici migracijo celic v centralnem živčnem sistemu, ne glede na radialne glia: pojav tangencialni migracije ali gibanja neuroblasts pri razvoju možganske skorje pravokotno na radialni glialne omrežja, kot tudi migracija "niz" ali "verige". Zlasti migracija nevronskih matičnih celic lezije rostralnog subventricular območju pojavlja v vohalnih žarnice kot zaporedje tesno sosednjih celic, obdanih z glialnih celic. Menijo, da te celice uporabljajo partnerskim celice kot migracije substrata, kot je glavni regulator interakcije celica-celica je PSA-NCAM (nevronska adhezijske molekule polisialirovannaya celice). Posledično migracija nevronov ne zahteva nujno sodelovanja radialne glije ali že obstoječih aksonalnih vezi. Vneradialnaya oblika gibanja celic "niz" v lezije rostralnog migracijskega toka se ohranja skozi vse življenje, kar kaže realne možnosti za ciljano dostavo presajenih živčnih matičnih celic v zrelem živčnega sistema.

Obstaja hipoteza o prisotnosti izvornih celičnih linij v zorenjem možganov, po katerem v zgodnjih fazah razvoja možganov izvornih celic so celice neuroepithelium, ki je v procesu zorenja v transdifferentiate radialne glia. V odrasli dobi vlogo matičnih celic opravljajo celice, ki imajo znake astrocitov. Kljub številnih spornih vprašanj (polemika glede matičnih celic v hipokampusu, kot tudi globokih delih možganov, ki nimajo plastovito strukturo skorje in razvoja v talamusa nasip, kjer je radialna glia odsoten), jasen in preprost koncept nasledstva fenotip matičnih celic v Ontogenija izgleda zelo privlačna.

Učinek dejavnikov mikrookolja na določanje in kasnejšo diferenciacijo živčnih diferencialnih celic je jasno prikazan pri presaditvi matičnih celic zrelega hrbtenjače v različne dele zrelega živčnega sistema. Ko so matične celice presadile v dentatni girus ali v območje migracije nevronov vohalnih čebulic, je bila opazna aktivna presaditev celic na številne nevrone. Presaditev matičnih celic v hrbtenjači in območja hipokampusu povzročilo nastanek astrocitov in oligodendrocitov, ker so pri transplantaciji pri dentate gyrus tvorjen ne le glialnih celic, ampak tudi nevrone.

V spolno zreli podgani lahko število delilnih celic v zobozdravstvenem giru doseže več tisoč na dan - manj kot 1% celotnega števila žitnih celic. Neuroni predstavljajo 50-90% celic, astrocitov in drugih glialnih elementov - približno 15%. Preostale celice nimajo antigenih znakov nevronov in glije, vendar vsebujejo antigene endotelijskih celic, kar kaže na tesno povezavo med nevronogenezo in angiogenezo v dentatnem giru. Zagovorniki možnosti diferenciacije endotelijskih celic v nevronske progenitorne celice se nanašajo na sposobnost endotelijocitov in vitro za sintetiziranje BDNF.

Izjemna hitrost montaža nevronskih mrež: v procesu diferenciacije matičnih celic migrirajo zrnc celice v dentate gyrus in oblike ohrovt raste proti coni Saz hipokampalne sinaps in tvorijo z glutamatergične piramidni nevronov in zaviralnim interkalarne. Novoustanovljena zrn celice integrirane v obstoječe nevronskih vezij za 2 tedna, in prvi sinapse že pojavi 4-6 dni po nastanku novih celic. Z pogoste uporabe zrele živali BrdU ali 3H-timidina (v eno smer, da prepoznajo odraslih izvornih celic) zaznal veliko število označenih nevronov in astrocitov v hipokampusu, kar nakazuje na možnost nastajanja novih nevronov, ne samo v dentate gyrus, ampak tudi v drugih delih hipokampusu. Obresti v procesih delitve, diferenciacije in smrt celic v dentate gyrus v hipokampusu možganov zrelega zaradi dejstva, da so v vzponu tukaj nevroni lokalizirano v enem od ključnih krajev hipokampus, ki so odgovorni za učenje in spomin procesov.

Tako danes ugotovili, da iz celic subependimnoy območje od lateralne prekata zrelih glodalcih pride nevronskih predhodnika celice potujejo proti vzdolž lezije rostralnog migracijskega toka, ki se oblikuje vzdolžno usmerjeno astroglial celice v vohalnih žarnice, kjer so zasidrani v plasti zrn celic in se razlikujejo od nevronov, strukturo. Prehod iz matičnih nevronske celice najdemo v lezije rostralnog migracijski tok odraslih opicah, kar kaže na možnost nastajanja novih nevronov v vohalnih žarnice primatov. Nevronskih matičnih celic, izoliranih iz vohalnih žarnice odraslih in prevedena v vrsti, kloniramo celice, ki se diferencirajo v nevronih astrocitov in oligodendrocitov. Matične celice najdemo v zrelih možganskih hipokampusu podgan, miši, opice in ljudeh. Nevronskih matičnih celic subgranular coni dentate fascije so vir prekurzorskih celic selijo v medialni in stranskih krakov hipokampusu, kjer se diferencirajo v zrele zrn celic in glialnih elementov. Aksoni oblikovali de novo dentate gyrus nevrone izsledi nazaj v polje saz, kar kaže, da so na novo oblikovane nevroni vključeni v izvajanje hipokampusa funkcij. Na združevanja področja neocortex od odraslih opicah možganskih dalo prekurzorskih celic nevronov selijo iz subventricular cone. Nova plast VI možganske skorje piramidni nevroni novo miših je pokazala skozi 2-28 tednov po povzročenih poškodb in smrti nevronov avtohtonih ta sloj zaradi migracije dormantnyh prejšnjih matičnih celic v subventricular območju. Končno, realnost poporodne neyronogeneza v človeških možganih prikazuje dvakratno povečanje števila kortikalnih nevronov, nadaljevala v prvih 6 letih po rojstvu.

Prav tako je pomembno za presaditev praktično celic je vprašanje regulacije procesov razmnoževanja in diferenciacije nevronskih matičnih in predhodnih celic. Najvišjo vrednost med dejavnike, ki so pritiskale na širjenje živčnih matičnih celic imajo glukokortikoidov, ki drastično zmanjšuje število oddelkov, medtem ko je odstranitev nadledvične žleze, nasprotno, bistveno poveča število mitoze (Gould, 1996). Omeniti velja, da je morfogeneza dentate gyrus pri glodavcih so najbolj intenzivna v prvih dveh tednih poporodni razvoj v odsotnosti odziva na stres na ozadju velikega upada proizvodnje in izločanja steroidnih hormonov skorje nadledvične žleze. Kortikosteroidi zavirajo migracije zrnc celic - novi nevroni niso vdelane v granulirani plasti dentate gyrus in hilus ostajajo. Predpostavlja se, da hkrati kršijo procese nastanka sinaptičnih vezi. Zaščita celic iz takih "steroidov agresije", ki jih je opravil minimalno izražanja mineralnih in glukokortikoidnih receptorjev o delitvi celic fižol, ne samo v času razvoja dentate gyrus, ampak tudi pri odraslih živalih. Kljub temu, vseh nevronov v hipokampusa nevronov v možganih so značilne visoke vsebnosti glukokortikoidni receptor, ki povzroča stres na hipokampusu. Čustveni stres in stresne situacije zatirajo neyronogenez in kronični stres močno zmanjšuje sposobnost živalske za učenje novih spretnosti in usposabljanje. Bolj izrazito negativen učinek kroničnega stresa na neyronogenez je razumljivo, glede na pretežno mirujoče stanje nevronskih izvornih celic. Ko imobilizacijo brejih podgan (glodalcev - supramaksimalni stres faktor) je nastavljen kot pred rojstvom stres povzroča tudi zmanjšanje števila celic v dentate gyrus in bistveno zavira neyronogenez. Znano je, da so glukokortikoidi vpleteni v patogenezo depresivnih stanj, ki je morfološko enakovredno zavornega neyronogeneza, patološko nevronske prestrukturiranje in interneuronal povezave, kakor tudi smrt živčnih celic. Po drugi strani, proti depresiji kemoterapevtiki aktivira nastanek nevronov v de novo, ki potrjuje povezavo med procesom nastajanja novih nevronov v hipokampusu in razvoj depresije. Pomemben vpliv na neyronogenez so estrogen, katerega učinki so nasproti delovanja glukokortikoidov in so za podporo širjenja in preživetje živčnih matičnih celic. Treba je opozoriti, da estrogeni znatno povečajo sposobnost živali za učenje. Nekateri avtorji estrogeni veže s cikličnimi spremembami števila zrn celic in njihovo število je večje kot pri ženskah.

Znano je, da je imela neyronogenez EGF, FGF in BDNF pa mehanizmi zunanjih signalov matičnih celic po mitogeni in rastnih faktorjev so premalo raziskana. To je bilo, da podpira PDGF vitro nevronskih rodu predhodnih celic in ciliarnega nevrotrofičnega faktorja (CNTF), kot trijodotironin stimulira nastajanje pretežno glialnih celic - astrocitov in oligodendrocitov. Hipofize adenilil ciklazo aktivirajočega proteina (PACAP) in vazoaktivni intestinalni peptid (VIP) aktivira proliferacijo nevronskih matičnih celic, vendar inhibira diferenciacijo obdeluje hčerinske celice. Opioidi, zlasti v primeru podaljšane izpostavljenosti, močno zavirajo nevronogenezo. Vendar izvornih celic in nevronskih matičnih celic prekurzorji za dentate gyrus ni razkrito opioidne receptorje (ki so prisotne pri razlikovanju nevronov v embrionalnih obdobju), ki ne dovoljujejo, da oceni neposrednih učinkov opioidov.

Potrebe praktične regenerativne in plastične medicine so prisiljene raziskovalce namenile posebno pozornost študiju pluri in multipotencij matičnih celic. Realizacija teh lastnosti na ravni regionalne izvorne celice odraslega organizma na dolgi rok bi lahko zagotovila razvoj potrebnega transplantacijskega materiala. Zgoraj je izkazalo, da epigenetsko stimulacija živčnih matičnih celic zagotavlja proliferirajoče celice, že predoblikovan živčni fenotipov, kar omejuje njihovo število. Pri totipotentne embrionalnih izvornih celic lastnosti proliferacijo dokler ne pride do zadostnega števila celic prejšnje nevronske diferenciacije, smo celice razmnožene in enostavno pretvorimo v nevronsko fenotip. Za živčnih matičnih celic PGCs izoliramo iz mase notranje celične blastocist kultiviranih z in obvezno prisotnost LIF, ki ohranja svojo totipotency in sposobnost za nedoločen čas razdeliti. Po tem se retinoinska kislina inducira z nevronsko diferenciacijo ESC. Presaditev Tako dobljeno nevralne izvorne celice v poškodovanem kinolina in C6-hidroksidopamin striatuma skupaj z njihovo diferenciacijo v dopaminergičnih in serotonergičnih nevronov. Po vnosu prekatov v možganih zarodka podganjih nevronskih matičnih celic, pridobljenih iz PGCs migrirajo na različnih področjih možganov prejemnika, vključno možganski skorji, striatumu, septum, talamusu, hipotalamusu in malih možganih. Celice, ki ostanejo v ventrikularno votlini, epitelija tvorijo strukture, ki je podobna nevralne cevi, kot tudi posamezni otoki neneyralnoy tkiva. V parenhima možganov prejemnega zarodka transplantirane celice proizvajajo tri glavne vrste celic v živčnem sistemu. Nekateri od njih imajo podolgovate apikalne dendrite, telesa piramidnih celic in bazalne aksone, ki štrlijo v korpusni kalozum. Astrociti donator izvor raztezajo svoje procese do bližnjih kapilar in oligodendrocite so tesno v stiku z mielinske rokavi, ki sodelujejo pri oblikovanju mielina. Tako, nevronske matičnih celic, pridobljenih iz PGCs in vitro, ki lahko usmerja ustrezno migracijo in raznolikostjo signalov regionalno mikrookolje zagotavlja številna področja v razvoju možganskih nevronov in glia.

Nekateri avtorji menijo, da možnost, da s preklicem in regionalni transdifferentiation odraslih izvornih celic. Posredno potrditev dedifferentiation celic v kulturi z razširitvijo njihovo močjo so podatki o prijetje presadka nevronskih matičnih celic pri miših kostnem mozgu z nadaljnji razvoj teh celičnih linij, pri čemer dobimo funkcionalno aktivne celice periferne krvi. Poleg tega presaditev genetsko označenih (lacZ) neurosphere celic, pridobljenih iz zrelega ali zarodka možganih, v možganih obsevanega miši z mielosupresijo, vodila do tvorbe izvornih celic ne samo nevronskih derivatov, ampak tudi povzroča nastajanje krvnih celic, kar kaže, da pluripotentne živčnih matične celice, spoznane izven možganov. Tako lahko nevralne izvorne celice diferencirajo v krvnih celic pod vplivom signalov iz kostnega mozga mikrookolje začasne preoblikovanja v hematopoetskih izvornih celic. Po drugi strani pa pri presaditvi kostnega mozga hematopoetskih izvornih celic v možganih določi njihovo diferenciacijo pod vplivom mikrookolja tkiva možganov v glialnih in živčnih celic. Zato so možne razlika rovochny nevralne in hemopoetičnih matičnih celic ni omejen tkivno specifičnost. Z drugimi besedami, razen značilnost tkiv na mozga možganov in kosti lokalne mikrookolje dejavniki spremenite usmerjenost diferenciacijo teh celic. Izkazalo se je, da nevralne izvorne celice vbrizga v venski sistem obsevanih miših, ustvarjene v vranici in kostnem mozgu populacijo mieloidnih, limfni in nezrele hematopoetičnih celicah. In vitro je določena Učinek kostnega mozga proteini za morfogenezo (BMP) na preživetje in diferenciacije nevronskih izvornih celic, kot je v zgodnjih fazah embriogenezo pri razvoju nevrološkega ali glialnih smereh. Kulture nevronskih izvornih celic 16 dni stare podganje zarodke BMP inducira astroglia in nevrone, ker v kulturah matičnih celic, ki izhajajo iz obporodnimi možganskih astrocitov oblikovanih samo. Nadalje, najboljše prakse upravljanja zavirajo nastajanje oligodendrocitov in vitro, ki se pojavijo le pri dodajanju noggin antagonist BMP.

Postopki neločljivo vidonespetsifichnost transdifferentiation: hematopoetske matične celice človeškega kostnega mozga presajeni v striatumu odraslih podgan, migrirajo v belo zadevo zunanjega kapsule, ipsi- in kontralateralni neocortex kjer tvorijo astrotsitopodobnye celičnih elementov (Azizi sod, 1998). V alopresaditev izvornih celic kostnega mozga v stranskem prekata neonatalne miši migracije hematopoetskih izvornih celic lahko zasledimo forebrain in cerebelarni struktur. Striatumu in molekularna plast hipokampusa preselili celic transformiranih v astrocitov in v vohalnih žarnice, notranja plast od cerebelarni zrnc celic in možgansko deblo postavitev mrežastim da se tvori nevronov celice pozitivne reakcije na rofilamenti. Ko so intravenska injekcija hematopoetičnih celic miši odraslih-GFP označeni mikro- in astrocitov odkrita v neocortex, talamusu, možganskega debla in malih možganih.

Poleg tega mezenhimske matične celice kostnega mozga, ki sprožijo vse vrste vezivnega tkiva celic, pod določenimi pogoji, lahko prav tako predmet nevronske transdifferentiation (opozarjajo, da je vir embrionalnih mesenchyme nevralne grebena celice). Izkazalo se je, da so celice stromalne človeške kostnega mozga in miška gojili in vitro v prisotnosti ESPG ali BDNF, izražajo označevalec nevronskih matičnih celic nestinski in dodajanje različnih kombinacij rastnih faktorjev vodi do tvorbe celic z oznakami glije (SOSM) in nevronu (jedrni protein NeuN). Označene matične celice singenski mezenhimske so presajeni v stranskem prekata možganov pri novorojenih miših migrirajo in se nahajajo v forebrain in male možgane, ne rešuje Cyto-arhitekturo možganov prejemnika. Kostnega mozga mezenhimske matične celice diferencirajo v zrele astrocitov v striatumu in molekularni plasti hipokampusu, kot tudi zapolnijo dišavne žarnice, malih možganov in zrnc plasti retikularnim formacije, ki se pretvori v nevronih. Mezenhimskih matičnih celic iz človeškega kostnega mozga so sposobni razlikovati vitro v macroglia po presaditvi vključiti v strukturo možganov podgan. Neposredno presaditev kostnega mozga mezenhimskih matičnih celic pri odraslih podganah hipokampusu na spremljajo tudi njihovo migracijo v parenhima možganov in neuroglial diferenciacije.

Predpostavlja se, da presaditev izvornih celic kostnega mozga lahko razširi možnosti celične terapije za bolezni CNS, za katere je značilna prekomerna patološka smrt nevronov. Opozoriti je treba, pa je, da niso vsi znanstveniki priznavajo dejstvo vzajemnega transformacije nevronskih in hematopoetske matične celice, še posebej v pogojih in vivo, ki je spet zaradi pomanjkanja zanesljivih označevalcev za oceno njihove transdifferentiation in nadaljnji razvoj.

Presaditev matičnih celic nove vidike za celično genske terapije dednih nevroloških motenj. Genetska modifikacija nevronskih izvornih celic vključuje vstavljanje regulatornih genetskih konstruktov, katerih izdelkov interakcijo z beljakovinami celičnega ciklusa v načinu za avtomatsko vodenje. Pretvorniškim teh genov v embrionalnih matičnih celic, ki se uporabljajo za razmnoževanje živčnih matičnih celic. Večina gensko spremenjenih celičnih klonov obnaša kot stabilne celične linije, ne kaže znakov transformacijo in vivo ali in vitro, vendar ima izraženega lahko obrnejo zaviranje proliferacije. Ko se pomnoži presaditev celic transfekciji mimo vgrajeni v tkivu prejemnika, ne da bi poškodovali cytoarchitectonics in brez opravljenega maligni preobrazbo. Donatorke nevralne matične celice ne deformira območje integracije in prav tekmujejo za prostor z gostitelja matičnih celic. Vendar 2-3 th dan intenzitete deljenjem transfektanti celice drastično zmanjša, kar ustreza inhibicijo razmnoževanje in vitro stikov. V prejemnika zarodka so nevronske matične transfektanti nobenih nepravilnosti centralnega živčnega sistema, vsa področja možganov, ki je v stiku s presadka, razvijajo normalno. Po presaditvi, kloni nevronskih izvornih celic hitro selijo iz območja uprave in pogosto presegajo ustreznih semenskih območij lezije rostralnog trakt ustrezno povezujejo z drugimi področji v možganih. Embedding gensko spremenjenih kloni in transficiranih celičnih linij živčnih matičnih celic v možganih organizem gostitelja, je značilna ne samo za embrionalnega obdobja: te celice so vsadili v več con CNS plod, novorojenčka, za odrasle in tudi staranje organizma prejemnika in razstava hkrati sposobnost za ustrezno vključevanje in diferenciacija. Zlasti po presaditvi v votlino možganskih prekatov transficirane celice migrirajo brez poškodovanja krvno-možgansko pregrado, in sta sestavni del celičnega funkcionalne možganskega tkiva. Donor nevroni tvorijo ustrezne sinapse in izražajo specifične ionske kanale. Ob ohranjanju integritete krvno-možgansko pregrado astroglia izvedenimi nevronskih transfektanti izvornih celic, podaljšuje postopke na cerebralnih krvnih žil in oligodendrocite donator izvor izrecna mielinski bazični protein in myelinating nevronalne podaljške.

Poleg tega so neravna matične celice transfektirane za uporabo kot celični vektorji. Taka vektorska-genski konstrukti zagotovi stabilna in vivo ekspresijo tujih genov, vključenih v razvoj živčnega sistema ali se uporabljajo za korekcijo genetskega defekta, ker so produkti teh genov lahko nadomestilo za različne biokemijske abnormalnosti centralnega živčnega sistema. Visoka selitvena aktivnost transfektiranih matičnih celic in ustrezna implantacija v zarodnih območjih različnih regij možganov v razvoju nam omogočajo, da upamo na popolno obnovo dednega primanjkljaja celičnih encimov. Pri modeliranju sindroma ataksije-telangiektazije (mutantne linije pg in pcd miši) celice Purkinje izginjajo iz možganov eksperimentalnih živali v prvih tednih postnatalnega razvoja. Pokazalo se je, da uvedbo nevronskih izvornih celic v možgane takih živali spremlja njihova diferenciacija v celice Purkinje in granulne nevrone. V mutacijam PCD je koordinacija gibanj delno popravljena in intenzivnost tresenja se zmanjša. Podobni rezultati so bili pridobljeni pri presaditvi kloniranih človeških nevralnih matičnih celic na primate, pri katerih je bila perkurzija celic Purkinje inducirana s onkanazo. Po presaditvi so bile donorske nevronske izvorne celice najdene v zrnatem in molekularnem sloju ter v celični plasti Purkinje cerebelarnega parenhima. Zato je genetska modifikacija živčnih progenitornih celic sposobna zagotavljati stabilno in zavezano spremembo fenotipa, ki je odporen na zunanje vplive. To je še posebej pomembno pri patoloških procesih, povezanih z razvojem prejemnikov dejavnikov, ki ovirajo preživetje in diferenciacijo donorskih celic (na primer z imunsko agresijo).

Mukopolisaharidoza tipa VII pri ljudeh značilna postopno nevrodegeneracije, in zamudo intelektualni razvoj, da pri poskusih na miših vzoru brisanje mutacijo gena beta-glukuronidaza. Po presaditev v možganskih prekatih neonatalne pomanjkljivo prejemnika miši transfektirane nevralne izvorne celice, ki izločajo beta glukoronidaznih so donorske celice, najdenih v prvem terminalnem območju in nato porazdeljeni možganski parenhim stabilno korrigiruya integriteto lizosomalnih v možganih mutantnih miših. V modelu Tay-Sachs bolezni transducirani z retrovirusa nevronskih izvornih celic in utero dajanje v miš zarodka in novorojenčka miši presajanju zagotavlja učinkovito izražanje beta podenoto beta-hexosaminidase pri prejemnikih z mutacijo, ki vodi do nenormalnega akumulacijo beta 2-gangliozida.

Drugo področje regenerativne medicine je spodbuditi proliferativni in diferenciacija potencialne pacientove lastne izvorne celice živčevja. Zlasti živčnih matičnih celic izločajo NT-3 na hemisection hrbtenjače in možganskega asfiksije podgane izražanje NGF in BDNF v septuma in bazalnih ganglijih, tirozin hidroksilazo - v striatumu in reelin - male možgane in mielinskega bazičnega proteina - v možganih .

Vendar pa so vprašanja stimulacije neyronogeneza plača ni dovolj pozornosti. Nekaj dela kažejo, da je funkcionalna obremenitev centrih živcev, ki so odgovorni za razlikovanja vonjav, ki se kaže v oblikovanju novih nevronov. Transgenih miših s pomanjkanjem nevronskih adhezijske molekule neyronogeneza zmanjšanje intenzivnosti in zmanjšanje števila selijo nevronov v vohalnih žarnice je bila povezana z motnjami sposobnosti, da razlikuje vonjav, čeprav je prag vonja in kratkoročno vohalna pomnilnik ne krši. Pri ureditvi igra pomembno vlogo neyronogeneza funkcionalno stanje celic dentate gyrus: oslabitev učinek izpostavljenosti glutamatnih zrn po uničenju celicah entorhinal skorje prispeva k proliferacijo in diferenciacijo nevronov in vlaken stimulacija perforant pot (primarni dovodni vhod za hipokampus) povzroča zaviranja neyronogeneza. Antagonisti-NMDA aktivira receptorje obdeluje neoplazma nevroni, ker agonisti, nasprotno, zmanjšuje intenzivnost neyronogeneza ta učinek podoben delovanja glukokortikoidov. V literaturi obstajajo nasprotujoče si rezultate raziskave: podatki o eksperimentalno dokazanih zaviralne učinke ekscitatornih nevrotransmiterjev glutamata na neyronogenez niso skladni s podatki o spodbujanju vzrejnih matičnih celic in pojav novih nevronov s povečanjem napade, v hipokampusu živali v poskusne in kainski modelov pilocarpic epilepsije. Hkrati je tradicionalni model epilepsije pri ponavljajočem stimulacijo pod pragom nekaterih predelih možganov (trske) inducirane in označen z manj hudo izgubo nevronov neyronogeneza intenzivnosti poveča šele v pozni fazi Potpala gledano v škodo hipokampusu in smrt nevronov. Izkazalo se je, da pri epilepsiji aktivnost epileptičnih napadov stimulirajoči neyronogenez z nenormalnim lokalizacijo novih granul nevronov, od katerih se pojavljajo samo v dentate gyrus, temveč tudi na tega cikla. Ti nevroni so pomembni pri razvoju brstenja Mossy vlaken, aksoni saj so odsotni iz običajnih zavarovanja inverzni tvorijo sinapse s številnimi sosednji zrni celic.

Uporaba regionalnih nevronskih izvornih celic odpira nove možnosti za uporabo celične transplantacije pri zdravljenju metabolnih in genetskih nevrodegenerativnih bolezni, demielinizirajočih bolezni in posttraumatskih motenj funkcij CNS. Pred izvedbo transplantacije nadomestne celice ena od metod izbere in razširi potrebno vrsto nevralnih progenitornih celic ex vivo z namenom njihovega naknadnega vnosa neposredno v poškodovano območje možganov. Terapevtski učinek v tem primeru je posledica zamenjave poškodovanih celic ali lokalnega sproščanja rastnih faktorjev in citokinov. Ta metoda regenerativno-plastične terapije zahteva presaditev dovolj velikega števila celic z vnaprej določenimi funkcionalnimi značilnostmi.

Primerno je treba priznati in nadaljnje študije molekularnih značilnosti in regenerativne in plastičnih potencialov izvornih celic zrelega možganih, kot tudi s tem sposobnostjo transdifferentiation regionalnih izvornih celic različnega tkivnega izvora. Danes zaslonski antigeni hematopoetski kosti zarodne celice kostnega mozga pri določanju kombinacije označevalca celic, ki lahko transdifferentiate v nevronskih izvornih matičnih celic (CD 133+, 5E12 +, CD34-, CD45-, CD24). Pripravljena celice tvorijo neurospheres vitro in oblikovanje nevronov presaditev v možganih novorojence imunsko pomanjkljivostjo miši. Obresti za celico ksenotransplantologii predstavljajo rezultate raziskav o možnosti navzkrižne presaditvi matičnih celic pri osebah evolucijsko oddaljeni taksonov. To je še vedno brez ustrezne razlage rezultatov vsaditvijo živčnih matičnih celic v področju možganskih tumorjev: presajene celice aktivno migrirajo skozi celoten obseg tumorja, ne da bi presegli to, in uvedba celic v neokrnjeni del možganov ugotovili njihovo aktivno migracije proti tumorjem. Vprašanje biološkega pomena take migracije ostaja odprto.

Opozoriti je treba, da je mogoče uspešno presaditev nevronskih matičnih celic, kot tudi drugih nevronskih matičnih celic, pridobljenih iz hESCs le pod pogoji uporabe visoko nevronskih matičnih celic, kot nediferencirani zarodka presaditev izvornih celic odraslih imunokompetentni prejemnik neizogibno pretvorjeni v teratom in teratokarcinom. Tudi pod minimalnim slabo diferenciranih celic v donorskih celični suspenziji pretirano naraste in tumorigenosti presadek nesprejemljivo poveča tveganje za nastanek tumorja ali neneyralnoy tkiva. Priprava homogenih populacij nevronskih matičnih celic je mogoče, kadar se uporablja kot alternativni vir darovalec tkivnih celic, ki nastanejo ob določenih stopnjah običajno teče embriogenezo. Drug pristop je, da temeljito odstraniti nezaželene celične populacije po rodu posebne izbire. Nevarnost zagotavlja tudi uporabo za neurotransplantation namen hESCs After premajhnega vitro z rastnimi faktorji. V tem primeru okvare ni mogoče izključiti nevronske diferenciacije programa za oblikovanje strukture, ki nevralne cevi.

Danes je jasno, da nevronska izvorne celice kažejo tropizem za CŽS bolezenskih sprememb in imajo izrazit učinek regenerativno-plastike. Mikrookolje smrt izvorne celice živčnega tkiva simulira diferenciacijo usmerjenost cepljenih celic, tako rekuperiranje primanjkljaj specifičnih nevronskih elementov v območju osrednjega živčevja. V nekaterih nevrodegenerativnih procesi pojavljajo nevrogeni signale ponovitvijo neyronogeneza in zrelih živčnih matičnih celic v možganih so sposobni, da se odzove na o navodilih informacij. Jasna ilustracija terapevtskega potenciala nevronskih izvornih celic so številni podatki iz eksperimentalnih študij. Intracisternatno Administracija klone nevronskih izvornih celic živalim z ligacijo srednjega cerebralne arterije (ishemična modela kap) prispeva k zmanjšanju površino in prostornino škodljivih sprememb v območju možganov, zlasti v primeru transplantacije nevronskih izvornih celic z FGF2. Upoštevati imunocitokemija z migracijo donatorskimi celic v ishemično območju z nadaljnjo integracijo z intaktnih celic v možganih prejemnika. Presaditve nezrelih neuroepithelial celične linije MHP36 miš v možganih podgan v eksperimentalni gib izboljša delovanje sensorimotor in uvedbo teh celic v možganskih prekatov izboljšuje kognitivne funkcije. Kot posledica presaditve, podgane predoblikovan hematopoetske celice kostnega mozga nevronske človeka odstranimo disfunkcija možganske skorje z ishemične poškodbe, povzročene. V tem primeru se ksenogenske nevronske progenitorne celice selijo iz mesta injiciranja v območje destruktivnih sprememb v možganskem tkivu. Intrakranialni presaditev celic kostnega mozga s homologno travmatsko poškodbo možganov skorje pri podganah povzroči delno obnovljeno motorike. Prizhivlyayutsya donorske celice proliferirajo opraviti nevronske diferenciacijo v nevronov in astrocitov in migrirajo proti lezijo. Pri dajanju striatumu odraslih podgan z eksperimentalno kapjo klonirane nevralne izvorne celice človeških nadomestitev poškodovanih celic centralnega živčnega sistema in delno obnoviti moteno delovanje možganov.

Nevronskih matičnih celic, izoliranih iz zarodkov prednostno telencephalon ki razvija precej pozneje od več kavdalno locirano odseki živčnega debla. Možnost izolacije živčnih matičnih celic iz hrbtenjače 43-137 dni človeškega zarodka, v katerem se nahajajo ESPG in FGF2 Te celice tvorijo neurospheres in zgodnjih prehodi razstavnega multipotentiality razlikovanje v nevronov in astrocitov. Vendar dolgoročno gojenje živčnih matičnih celic (več kot 1 leto), da jim odvzame multipotentnost - te celice se lahko razlikujejo le v astrocitov, kar pomeni, da so unipotentnost. Regionalni nevralne izvorne celice lahko dobimo z delnim bulbektomii po razmnoževanju v kulturi v prisotnosti LIF presajenih koži pacienta z nevrodegenerativnimi spremembe v drugih delih centralnega živčnega sistema. Nadomestno kliniki celična terapija uporablja nevralne izvorne celice smo najprej izvedli za zdravljenje bolnikov s kapjo, skupaj z lezijami bazalnih ganglijih možganov. Zaradi presaditve donorskih celic se je izboljšalo klinično stanje večine bolnikov.

Nekateri avtorji menijo, da je sposobnost nevronske matičnih prizhivlyatsya celice selijo in integrira v različna področja živčnega tkiva je poškodovan centralni živčni sistem odpira neomejene možnosti za celično zdravljenje ni samo lokalno, temveč tudi obsežno (možganska kap ali zadušitve), multiochagovyh (multipla skleroza), in celo globalni ( najbolj podedoval presnovne motnje ali nevrodegenerativne demence), patoloških procesov. Dejansko, ko presajanje kloniran živčnih matičnih miške in živali humana celica prejemnika (miši in primate, zaporedju) z degeneracijo dopaminergičnih nevronov v mezostrialnoy sistema z uvedbo metil-fenil-tetrapiridina (model Parkinsonove bolezni) inducirane 8 mesecev pred transplantacijo, dajalcu živčnih matičnih celic so vključeni v CNS prejemnika. Mesec dni kasneje, so presajene celice nahaja dvostransko vzdolž srednjih možganov. Del, ki je posledica nevronske izvora izraža tirozingidrolazu darovalca v odsotnosti imunskega odziva na presaditev. Pri podganah obdelamo s 6-hidroksidopamina (drugi poskusni model Parkinsonove bolezni), prilagoditev na mikro okolju transplantiranih celic v gostiteljski možganov smo določili z gojenjem pogojih nevronskih izvornih celic pred transplantacijo. Nevronskih matičnih celic, se hitro bolj razširjeni in vitro pod vplivom ESPG, sestavljena za primanjkljaja dopaminergičnih nevronov v striatumu od učinkoviteje od celic 28 dni starih kultur poškodovana. Avtorji menijo, da je to posledica izgube sposobnost zaznati signale ustrezne diferenciacije med delitvijo celic in vitro, nevronske matičnih celic.

V nekaterih študijah so poskušali izboljšati vpliv poškodovanih striatnih procesov reinnervation ga presajanje na tem področju embrionalnih striatum celic kot vira nevrotrofhih dejavnikov za hkratno presaditev dopaminergičnih nevronov v ventralni mezencefalona. Kot se je izkazalo, učinkovitosti neurotransplantation v veliki meri odvisna od načina dajanja, zarodka živčnem tkivu. Kot rezultat raziskave o pripravah transplantacijskih fetalne nevralne tkiva v prekata sistemu možganov (za preprečevanje poškodb striatnih parenhima) pridobljeni podatki o njihovi pozitivnim učinkom na motorične napake.

Vendar pa v drugih študijah, ki so eksperimentalne ugotovitve so pokazale, da presaditev v možgane prekata pripravki embrionalnega trebušne mezencefalona živčnem tkivu, ki vsebuje dopaminergičnih nevronov kot presajanje GABAergic živčnih elementov zarodkov podganjega striatuma gemiparkinsonizmom ne prispeva k obnovitvi oslabljenih funkcij sistema dopaminergične. Nasprotno, imunocitokemija potrdil dokaz nizke preživetja dopaminergičnih nevronov v ventralni mezencefalona, presaditi v striatumu podgan. Terapevtski učinek intraventrikularno presajanje zarodka trebušne mezencefalona živčnem tkivu spoznal šele, ko hkratno implantacija v denervirati striatuma formulacijo striatnih embrionalnih celic. Avtorji menijo, da je mehanizem tega učinka povezana s pozitivnim trofičnega učinka GABAergic celic v embrionalne striatum posebnih dopaminergične aktivnosti intraventrikularnega presaditev trebušne mezencefalona. Izraženo glialnih reakcija pri presaditvah je spremljala s preskusom apomorfinske rahlo kazalnikov regresijski. Slednji, po drugi strani povezana z vsebnostjo seruma GFAP, kar kaže neposredno krši prepustnosti pregrade krvno-možganske. Na podlagi teh podatkov, so avtorji zaključili, da se GFAP serumski lahko uporabi kot ustrezen ukrep funkcionalnega stanja presaditve in povečana prepustnost krvno-možgansko pregrado za neurospecific GFAP tipa antigen patogeni člen v razvoju okvare presadka zaradi avtoimunske poškodbe živčnega tkiva prejemnika .

Z vidika drugih raziskovalcev, prijetje presadka in vključevanje živčnih matičnih celic po presaditvi stabilna in življenje, saj so donatorke celice najdemo v prejemniku najmanj dve leti po presaditvi, in brez znatnega zmanjšanja njihovega števila. Poskusi, da bi to razložil z dejstvom, da na nediferencirani stanje nevronske matične celice ne izražajo MHC razreda I in II na ravni, ki zadostuje, da povzroči imunski zavrnitve reakcijo, se lahko šteje za veljavno le v zvezi s slabo diferenciranimi živčnih matičnih celic. Vendar pa vse nevronske matične celice v možganih prejemnika ne vztrajajo v stanju nezrele kože. Večina jih je podvržena diferenciaciji, med katerimi so molekule MHC izražene v celoti.

Zlasti pomanjkanje učinkovitosti uporabe za zdravljenje eksperimentalnih parkinsonizem drog intrastriarnoy transplantaciji zarodnih ventralni mezencefalona, ki vsebuje dopaminergičnih nevronov, povezano s slabo preživetja presajenih dofaminer- cal nevronov (le 5-20%), kar je posledica reaktivne glioze spremljajoče lokalne travme možganov parenhima pri presaditev. Znano je, da lokalno poškodba možganov parenhim in Povezano glioze vodi do motenj celovitosti pregrade krvno-možgansko z dostopom do periferni antigen krvi živčnega tkiva, predvsem nevronu in Okara antigena. Prisotnost v krvi teh antigenov lahko izzove posebnih citotoksičnih protiteles zanje in razvoj avtoimunske agresije.

Cymbalyuk V. Et al (2001) poročajo, da je še vedno v veljavi ostaja tradicionalen vidika, po kateri CNS imunološko območje posebne pozornosti, izolirano iz imunskega sistema krvno-možgansko pregrado. V svojem pregledu literature, avtorji sklicujejo na vrsto del, ki kažejo, da je to stališče ni povsem v skladu z bistvom imunskih procesov v možganih sesalcev. To je bilo ugotovljeno, da se lahko označi snov uvedemo v možganskem parenhimu doseže globino vratnih bezgavk, ter po intracerebralno injekcijo antigena v telesu tvorijo specifičnih protiteles. Celice cervikalnih limfnih vozlov ustrezajo proliferaciji takim antigenom, od petega dne po injiciranju. Tvorba specifičnih protiteles je bila odkrita tudi pri presaditvi kože v parenhim možganov. Avtorji pregleda dajejo več možnih načinov prenosa antigena iz možganov v limfni sistem. Eden od njih je prehod antigenov iz perivaskularnih prostorov v subarahnoidni prostor. Predpostavlja se, da so perivaskularni prostori, locirani vzdolž velikih možganskih posod, ekvivalentni limfnemu sistemu v možganih. Druga pot leži ob belih vlaken - skozi etmoidni v limfnih žil v nosni sluznici. Poleg tega obstaja velika mreža limfnih posod v dura materi. Omejitev krvnih celic za limfocite je prav tako relativna. Dokazano je, da so aktivirani limfociti omogoča izdelavo encimov, ki vplivajo na prepustnost strukture "imunskega filter" možganov. Na ravni post-kapilarnih venules aktiviranih T-pomočnikov prodre skozi in skozi nepoškodovano krvno-možgansko pregrado. Teza o odsotnosti celic, ki predstavljajo antigen v možganih, ne podpira kritike. Trenutno prepričljivo izkazala možnost predstavitve antigenov v CNS vsaj tri vrste celic. Prvič, dendritične celice izvora kostnega mozga, ki so lokalizirane v možganih vzdolž velikih krvnih žil v beli snovi. Drugič, antigeni so sposobni predstavitev endotelijske celice krvnih žil v možganih, in v povezavi z MHC antigenov, ki podpira klonske rast poseben teh antigenov T celic. Tretjič, mikro- in astroglične celice delujejo kot antigen-predstavitveni dejavniki. S sodelovanjem v imunskem odzivu na centralni živčni sistem, astrociti pridobi lastnosti immunnoeffektornoy celic in izražajo številne antigene, citokini in imunomodulatorji. Ko inkubiramo z y-interferonom (y-INF) in vitro astroglial celice izražajo Razred I MHC antigeni in II ter stimulirano astrocitov so sposobni reprezentacije antigenov in vodenje klonske proliferacije limfocitov.

Brain tkivo travme, postoperativnega vnetja, edem in odlaganje fibrina spremlja transplantacijo plodu živčnem tkivu, ustvariti pogoje za povečanje prepustnosti krvno-možgansko pregrado z moteno samo-toleranco, občutljivosti in aktivacijo SDZ + CD4 + limfocitov. Auto- in predstavitev aloantigene izvedemo astrocitov in mikroglialnih celic, ki se odzivajo na y-INF izražanje molekule MHC, ICAM-1, LFA-I, LFA-3, kostimulatorne molekule B7-1 (CD80) in B7-2 (CD86), kot tudi izločanje IL-1, IL-ip in y-INF.

Zato dejstvo, da lahko daljše preživetje zarodka živčnem tkivu na intracerebralnim presaditvi, ne pa pri svojem obrobnem dajanje težko pripisati pomanjkanju o začetku presaditve imunosti. Še posebej, ker monocite, aktivirani limfociti (citotoksičnih celic CD3 + CD8 + in pomagalk T) in citokini, ki jih pripravljajo, kot tudi protiteles proti antigenom periferna presaditvi plodu živčnim tkivom igrajo pomembno vlogo pri zavrnitev. Vsaka pomen pri ustvarjanju pogojev za bolj trajno odpornost proti neyrotransplantatov T-celične imunske procese ima nizko stopnjo ekspresije molekule MHC iz embrionalnega živčnem tkivu. Zato je v preizkusnem imunskega vnetja po presaditvi zarodka živčnega tkiva v možganih je počasneje kot po cepljenju s kožo razvoju. Kljub temu pa po 6 mesecih opazimo popolno uničenje posameznih presadkov živčnega tkiva. Na področju presaditve nahajajo predvsem T antigen-limfocitov omejen na MHC razreda II (Blaža in sod., 1988). Ugotovljeno je bilo eksperimentalno, da za izčrpanje neurotransplantation ksenologicheskoy T-helper (L3T4 +), vendar ni citotoksičnih limfocitov T (Lyt-2), podaljšuje preživetje podgana živčnega tkiva v možganih miši prejemnikov. Neyrotransplantata Zavrnitev spremlja infiltracija makrofagov in limfocitov T gostitelja. Zato, makrofagi in aktivirane mikroglialnih celic v akta gostiteljici situ kot Imunostimulatorna antigen predstavljajočih celic, in povečanje antigene dajalca, ki ga MHC izražanja razred I poveča citotoksičnih T limfocitov aktivnost Killer prejemnika.

Nima smisla, da analizira številne poskuse, da pojasnijo špekulativne neyrotransplantata zavrnitvi odziv imunskega sistema organizma prejemnice na endotelijskih celicah ali glialnih donatorskih elementov, kot so čiste linije in živčnih matičnih celic opravijo imunski napad. Omembe sporočilo, ki ima mehanizmi daljše preživetje presadkov v centralnem živčnem sistemu pomemben izraz vloga mozga vezavo Fas ligand apoptozo receptorja (Fas-molekuli) na limfocite T infiltrirajočih možgane in povzroči apoptozo, ki je značilna za zaščitni mehanizem pregradnih avtoimunogenih tkiv.

Kot je prikladno opozoriti Cymbalyuk V. Et al (2001) transplantaciji zarodnih živčnem tkivu je označen z razvojem vnetja obsegali občutljivi na antigene možganskih in aktiviranih celic, protitelesa, pa tudi zaradi lokalne proizvodnje citokinov. Pomembno vlogo pri tem igra predznanje preobčutljivosti organizma proti možganskim antigenom, ki se pojavi med razvojem bolezni CNS in se lahko usmeri proti transplantacijskim antigenom. Zato je dejanska dolgotrajno preživetje histokompatibilnostjo neyrotransplantatov doseči le s supresijo imunskega sistema preko dajanje ciklosporina A ali monoklonskih protiteles na CD4 + limfocitov prejemnika.

Tako ostajajo številne težave nevrotransplantacije nerešene, vključno s tistimi, povezanimi z imunološko združljivostjo tkiv, ki jih je mogoče rešiti šele po namenskih temeljnih in kliničnih študijah.