Povzročitelj tularmije

Tularemija je primarna bolezen živali (glodalcev), pri ljudeh pa se pojavlja kot akutna nalezljiva bolezen z raznoliko klinično sliko in počasnim okrevanjem. Povzročitelja tularemije - Francisella tularensis - sta leta 1912 odkrila G. McCoy in S. Chapin med epizootijo med zemeljskimi vevericami na območju jezera Tulare (Kalifornija), podrobno pa jo je preučil E. Francis, v čigar čast je rod poimenovan.

To so zelo majhne, 0,2–0,7 µm velike, kokoidne ali elipsoidne polimorfne paličice, ki zelo pogosto dajo bipolarno barvo pri uporabi posebnih metod barvanja; so negibne, gramnegativne, ne tvorijo spor; katalaza negativne, tvorijo H2S, strogi aerobi, temperaturni optimum za rast je 37 °C, pH 6,7–7,2. Virulentni sevi imajo kapsulo, med fermentacijo nekaterih ogljikovih hidratov (glukoza, maltoza, manoza, fruktoza, dekstrin) tvorijo kislino brez plina, stopnja fermentacije se med sevi razlikuje, vsebnost G + C v DNK je 33–36 mol %. F. tularensis ne raste na običajnih gojiščih. G. McCoy in Sh. Chapin sta uporabila koaguliran rumenjak. Na njem bacil tularemije raste v obliki nežnih majhnih kolonij, ki spominjajo na kapljice rose, nato kultura dobi značaj nežne šagrenske prevleke s šibko izraženo sluzasto konsistenco. E. Francis je za gojenje tularemičnega bacila predlagal hranilni agar, ki vsebuje 0,05–0,1 % cistina, 1 % glukoze in 5–10 % krvi. Na takšnem gojišču je rast bolj bujna in hrapava: kolonije so okrogle z gladko površino, mlečne barve, vlažne, sluzaste konsistence, obdane z značilnim zelenim halojem. Rast je počasna, kolonije dosežejo svojo največjo velikost 3.–5. dan (1–4 mm). Bakterije tularemije se dobro razmnožujejo v rumenjakovi vrečki piščančjega zarodka, kar povzroči njegovo smrt 3.–4. dan.

Za rast F. tularensis so potrebne naslednje aminokisline: arginin, levcin, izolevcin, lizin, metionin, prolin, treonin, histidin, valin, cistin, za nekatere podvrste - serin, tirozin, asparaginska kislina; poleg tega za rast potrebujejo tudi pantotensko kislino, tiamin in Mg2 ione. Ob upoštevanju teh značilnosti se lahko za gojenje F. tularensis uporabijo sintetični mediji.

Rod Francisella spada v razred Gammaproteobacteria, deblo Proteobacteria. V ta rod spada tudi F. novicida, katere patogenost za ljudi ni bila ugotovljena.

Povzročitelj tularemije je znotrajcelični parazit. Njegova virulenca je posledica kapsule, ki zavira fagocitozo; nevraminidaze, ki spodbuja adhezijo; endotoksina; alergenih lastnosti celične stene, pa tudi sposobnosti razmnoževanja v fagocitih in zatiranja njihovega ubijalnega učinka. Mehanizmi virulence še niso dešifrirani. Poleg tega so v bacilu tularemije našli receptorje, ki so sposobni interakcije s Fc fragmenti imunoglobulinov IgG. Zaradi takšne vezave je motena aktivnost komplementnih sistemov in makrofagov.

F. tularensis v S-obliki (virulentni) ima dva antigena - O in Vi (kapsularni antigen). O-antigen je soroden antigenom brucel. Disociacija S->SR->R vodi do izgube kapsule, virulence in imunogenosti. Vrsta F. tularensis je razdeljena na tri geografske rase (podvrste):

• Holarktični (nizko patogen za domače kunce, ne fermentira glicerola in nima encima citrulin ureidaze, ki ga najdemo v državah severne poloble);
• Srednjeazijska (nizko patogena za kunce, ima citrulin ureidazo in fermentira glicerol);
• Nearktični (ameriški), bolj patogen za kunce, fermentira glicerol, ima citrulin ureidazo.

Poleg tega imajo sevi ameriške in srednjeazijske podvrste fosfatazno aktivnost, ki je pri sevih holarktične podvrste ni.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Odpornost povzročitelja tularemije

F. tularensis je v zunanjem okolju precej stabilen, zlasti če se nahaja v patološkem materialu. V krmi, žitu, onesnaženem z iztrebki bolnih glodalcev, preživi do 4 mesece; v vodi - do 3 mesece; v ledu - več kot 1 mesec. Občutljiv je na neposredno sončno svetlobo (pogine v 30 minutah), visoko temperaturo (pri 60 °C pogine v 10 minutah), pod vplivom 3 % raztopine lizola, 50 % alkohola, formalina in drugih antiseptikov pogine v 5–10 minutah.

Epidemiologija tularemije

Glavni rezervoar tularemije v naravi so glodalci, med katerimi se epizootiki pojavljajo tudi v naravnih pogojih. Ljudje se okužijo le od živali; povzročitelj se ne prenaša z osebe na osebo. Povzročitelj je bil ugotovljen pri 82 vrstah glodalcev in lagomorfov, najpogosteje pa ga najdemo pri predstavnikih 4 družin: mišjem podobni glodalci (Muridae), zajci (Leporidae), veverice (Sciuridae) in skakači (Dipodidae). V Rusiji so glavni prenašalci mišjem podobni glodalci: vodne podgane, navadne voluharice, hišne miši in pižmovke.

Glede na občutljivost na tularemijo lahko živali razdelimo v štiri skupine:

• Skupina 1 - najbolj dovzetni (voluharji, vodne podgane, hišne miši, bele miši, morski prašički in nekatere druge). Najmanjši smrtonosni odmerek je ena mikrobna celica;
• 2. skupina - manj občutljive (sive podgane, goferji itd.). Najmanjši smrtonosni odmerek je 1 milijarda mikrobnih celic, vendar je ena mikrobna celica dovolj, da okuži nekatere od njih;
• 3. skupina (plenilci - mačke, lisice, dihurji). Odporni na visoke kužne odmerke, bolezen poteka brez vidnih manifestacij;
• Skupina 4 - imuni na tularemijo (kopitarji, hladnokrvne živali, ptice).

Za ljudi je minimalni kužni odmerek ena mikrobna celica. Ljudje se lahko okužijo na vse možne načine: z neposrednim in posrednim stikom z bolnimi glodavci, njihovimi trupli ali predmeti, okuženimi z glodavci; prehransko (z uživanjem hrane in vode, okužene z glodavci), s prahom v zraku in s prenosom. Okužba z bakterijo tularemije je bila ugotovljena pri 77 vrstah krvosesnih členonožcev. Posebej pomembni so iksodidni klopi, pri katerih povzročitelj vztraja vse življenje in se celo transovarijalno prenaša na potomce. Te okoliščine prispevajo k vzpostavitvi bolezni v naravi. Ljudje se s klopi ne okužijo z ugrizi, temveč zaradi tega, ker povzročitelj pride na kožo skupaj z iztrebki klopa.

V Rusiji obstaja 7 glavnih krajinskih tipov naravnih žarišč tularemije: močvirje, travniško-poljsko, stepsko, gozdno, predgorsko-potočno, tundrsko in tugajsko (puščavsko).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Simptomi tularemije

Povzročitelj tularemije prodre v telo skozi zunanje ovojnice (poškodovano in nepoškodovano kožo in sluznice). Na mestu prodiranja se pogosto tvorijo razjede. Skozi limfne žile bakterije vstopijo v regionalno bezgavko in se v njej prosto razmnožujejo; vnetni proces vodi do nastanka bubona. Od tu patogen prodre v kri, bakteriemija povzroči generalizacijo procesa, vanj so vključeni različni organi in tkiva, proliferacija bakterij v katerih vodi do nastanka granulomov in nekrotičnih razjed. Alergijsko prestrukturiranje telesa je povezano z bakteriemijo in generalizacijo. Inkubacijska doba tularemije se giblje od 2 do 8 dni. Bolezen se začne akutno: pojavijo se vročina, glavobol, bolečine v mišicah, hiperemija obraza. Nadaljnji potek je odvisen od mesta vstopnih vrat, glede na to pa ločimo naslednje klinične oblike tularemije: ulcerozno-glandularno (bubonsko), okularno-glandularno, angino-glandularno, abdominalno in pljučno. Smrtnost pri tularemiji ne presega 1-2 %.

Postinfekcijska imunost je močna, vztrajna, v večini primerov vseživljenjska, celične narave, povzročajo jo predvsem T-limfociti in makrofagi, v manjši meri - protitelesa. Fagocitoza pri posameznikih z imunostjo je popolna.

Laboratorijska diagnostika tularemije

Za diagnosticiranje tularemije se uporabljajo vse mikrobiološke metode. Študija se izvaja v varovanih laboratorijih. Material za študijo - kri, bubopunkcija, strganje razjed, konjunktivalni izcedek, faringealne obloge, sputum itd. - je določen s klinično obliko bolezni. Poleg tega se za študijo lahko odvzame voda in živila. V naravnih žariščih tularemije se izvajajo načrtovane sistematične študije za izolacijo povzročitelja tularemije pri glodavcih.

Bakteriološka metoda diagnosticiranja tularemije pri ljudeh redko daje pozitivne rezultate. Čisto kulturo običajno izoliramo po kopičenju na dovzetnih laboratorijskih živalih. Za biološke teste se uporabljajo bele miši in morski prašički. Miši se okužijo subkutano, morski prašički - intraperitonealno; živali poginejo 3. do 6. dan, včasih po zmrzali. Okužene živali se hranijo v posebnih pogojih (kot pri diagnosticiranju kuge) in opazujejo 6-14 dni. Poskusne živali ne poginejo 7-15 dni, zakoljejo jih 15. do 20. dan in trupla obducirajo. V prisotnosti tularemije se odkrijejo patološke in anatomske spremembe v obliki produktivnega procesa z nekrozo. Čisto kulturo izoliramo iz notranjih organov na rumenjaknem mediju, glukozno-cisteinskem krvnem fokusu itd. Identifikacija temelji na morfologiji in tinktorialnih lastnostih patogena, odsotnosti rasti na MPA in aglutinaciji s homolognim serumom. patogenost za bele miši in morske prašičke. Čisto kulturo lahko izoliramo z okužbo 12-dnevnih kokošjih zarodkov in rumenjakove vrečke. Za izolacijo čiste kulture patogena iz vode jo centrifugiramo ali filtriramo skozi bakterijske filtre, usedlino pa uporabimo za okužbo laboratorijskih živali. Pri preučevanju živil se ti sperejo z MP B, centrifugirajo, usedlino pa uporabimo za okužbo laboratorijskih živali.

Hkrati z bakteriološkim pregledom se iz preučevanega materiala pripravijo razmazi-odtisi, ki se obarvajo po Romanovsky-Giemsi. V razmazih iz organov je mogoče odkriti majhne kokoidne in paličaste bakterije, ki se nahajajo znotrajcelično in v obliki grozdov, ki tvorijo nežno kapsulo.

Za diagnostiko se uporabljajo podrobna aglutinacijska reakcija, RPGA in RIF.

Za zgodnjo diagnostiko tularemije (od 5. dne po začetku bolezni) se uporabljajo alergijski testi. Uporabljata se dve vrsti tularina in temu primerno dva načina njihovega dajanja: kožni in intradermalni. Ker je koncentracija alergena v obeh vrstah tularina različna, je uporaba kožnega tularina za intradermalni test in obratno nesprejemljiva. Rezultati alergijske reakcije se upoštevajo dinamično po 24, 36, 48 urah. Infiltrat s premerom vsaj 5 mm velja za pozitiven rezultat. Pri cepljenih osebah ali tistih, ki so preboleli tularemijo, alergijski testi ostanejo pozitivni več let (anamnestično reakcijo).

Specifično preprečevanje tularemije

Za specifično preprečevanje se uporablja cepivo proti tularemiji, ki sta ga leta 1930 pridobila ruska vojaška zdravnika B. Ya. Elbert in N.A. Gaisky iz seva Me 15. Cepivo zagotavlja močno imunost 5-6 let ob okužbi z evropsko in holarktično podvrsto ter je učinkovito proti ameriški različici patogena. Cepljenje se izvaja po epidemioloških indikacijah, pa tudi za ljudi, ki spadajo v rizične skupine. Dovoljeno je sočasno cepljenje proti tularemiji in brucelozi; tularemiji in kugi ter proti tularemiji in nekaterim drugim okužbam.

Nespecifično preprečevanje tularemije je enako kot pri drugih zoonozah in je namenjeno predvsem zatiranju glodalcev.