Virus hepatitisa B

Hepatitis B je nalezljiva bolezen osebe, za katero je značilno selektivno poškodovanje jeter z virusom. Ta oblika hepatitisa je najbolj nevarna za posledice med vsemi znanimi oblikami virusnega hepatitisa. Njegov povzročitelj je virus hepatitisa B (HBV).

Prva antigen virusa hepatitisa B je bila zaznana B. Blumberg leta 1964 v serumu avstralski avstralska domorodka in patogena bilo ugotovljeno leta 1970, D. Dane (et al.), In prejela ime Dane delcev, ker ni bilo gotovo, da , da je to res virus, ne njegove komponente. Kasneje so izginili vsi dvomi, saj so v delcih Dane odkrili genomsko DNA in DNA-polimerazo, ki je odvisna od virusne DNA. Virion vsebuje tri glavne antigene, za katere so bile leta 1974 uvedene naslednje oznake:

• HBsAg je površinski ali topen ali avstralski antigen.
• HBcAg je jedrni antigen (ko-antigen).
• HBeAg - e antigen, ki je lokalizirano v jedru viriona in v nasprotju HBcAg, prisoten v viriona ne samo, ampak kroži tudi v krvi v prosti obliki ali v kompleksu z anti-HBeAg. Izloča se v kri iz hepatocitov z aktivno replikacijo HBV.

Površinski antigen - HBsAg - obstaja v obliki treh morfološko različnih različic: 1) predstavlja supercapsid celotnega viriona; 2) v velikih količinah se pojavi v obliki delcev s premerom 20 nm, ki imajo kroglično obliko; 3) v obliki filamentov dolžine 230 nm. Kemično so enaki. Sestavek ima skupno antigen HBsAg in dva para dejavnikov izključujočih tip značilnimi: d / y in w / r, da obstajajo štirje glavni podtip HBsAg (in s tem HBV): ADW, ADR, ayw in aur. Antigen a zagotavlja nastanek skupne navzkrižne odpornosti na vse podvrste virusa.

Pravzaprav je virion, delec Dain, sferična oblika in premer 42 nm. Supercapsid viriona sestavljajo trije proteini: glavni (glavni), veliki in srednji. Genom je zaprt v kapsidu in je predstavljen z dvojno verižno obročasto DNA z maso 1,6 MD. DNA vsebuje približno 3200 nukleotidov, vendar je njegov "plus" 20-50% krajši od minusovega znaka. S 5 'koncem dolge žarilne nitke je protein specifično vezan kovalentno. 5 'koncev obeh pramenov sta komplementarni in tvorita "lepljive" sekvence dolžine 300 nukleotidov, tako da so filamenti zaprti v obroču. Vsebnost G + C v virionski DNA je 48-49 mol%. V jedru viriona je poleg genske DNA-virusne DNK odvisne DNA polimeraze. "Minus" -definirana DNA HBV vsebuje le štiri gene (S, C, P in X), vendar so organizirane zelo kompaktno. Geni S, C, P, X močno prekrivajo in nadzirajo sintezo naslednjih produktov. Gene S kodira sintezo proteina glavnega proteina in vsebuje vse informacije o površinskem antigenu HBsAg. Poleg tega kodira sintezo srednjih in velikih ovojnic. Proteini vsebujejo skupni COOH-terminus, vendar se njihov prevod začne s tremi različnimi kodonskimi iniciatorji. Gene C kode za sintezo kapsidnih proteinov (HBcAg in HBeAg); čeprav so ti proteini kodirani z enim samim genom, so načini njihovega prevajanja drugačni. Gene P je največje. Vključuje del vseh treh drugih genov in kodira encime, potrebne za replikacijo virusa. Zlasti kodira reverzno transkriptazo, domeno encima RNA-ase H, 5'-terminalni protein v "minus" verigi. Gene X kodira proteine, ki uravnavajo izražanje (ekspresijo) vseh virusnih genov, zlasti beljakovine z maso 17 kD, ki je transactivator transkripcije genov.

Beljakovine, ki tvorijo površinski antigen, obstajajo v glikozilirani (gp) in ne-glikozilirani obliki. Glikozilirani so gp27, gp33, gp36 in gp42 (številke so označene z MM v kD). Supercapsid HBV je sestavljen iz glavnega ali osnovnega S-proteina (92%); povprečni M protein (4%) in velik ali dolg, L-protein (1%).

• Glavni protein, p24 / gp27 ali glavni protein (protein S), je glavna sestavina ovoja HBV. V odsotnosti drugih proteinskih lupin se polimerizira in tvori sferične delce s premerom 20 nm, ki jih sestavlja 100 polipeptidnih molekul.
• Veliki protein, p39 / gp42 ali dolg protein (L protein), je prisoten v vseh treh oblikah HBsAg. Ima pomembno vlogo pri morfogenezi virionov in pri izstopu iz celice. L-protein vsebuje zaporedje proteina M, ki je dopolnjen z N-end sekvenc 108 (ayw) ali 119 (ADW, ADR, Ayr) aminokislinskih ostankov kodiran NPE-Sl-S-gen regijo.
• Srednji protein - gp33 / gp36 ali protein M je prisoten tudi v vseh treh morfoloških oblikah HBsAg. Protein M vsebuje na N-terminusu območje 55 aminokislinskih ostankov, kodiranih s pre-52 regijo S-gena. Predpostavlja se, da ima to mesto pomembno vlogo pri prepoznavanju virusa hepatitisa B s celicami jeter z omejenim dometom (človeško, šimpansko opico). Beljakovinske sekvence, ki jih kodirajo regije S-gen npe-S, imajo visoko imunogenost in njihove determinante se nahajajo na površini viriona. Zato imajo protitelesa proti tem antigenom pomembno vlogo pri oblikovanju imunosti proti hepatitisu B.

Sinteza virusnih proteinov je močno nadzorovana na ravni prepisovanja in prevajanja. V transkripciji virusnega genoma se sintetizirata dve vrsti mRNA:

• manjši 2100 nukleotidov - kodira glavne in srednje proteine membrane;
• velike - 3.500 nukleotidov, t.j., daljše od same genomske DNK; vsebuje terminološke ponovitve 100 nukleotidov v dolžini.

Ta vrsta mRNA kodira kapsidni protein in izdelke genoma P. To je tudi predlog za replikacijo virusne DNA. Kot del genoma obstajajo ojačevalci (transkripcijski ojačevalci) - regulatorni elementi, ki aktivirajo izražanje vseh virusnih genov in delujejo predvsem v jetrnih celicah. Zlasti je gen S izražen na zelo visoki ravni samo v jetrnih celicah in pod vplivom steroidnih hormonov. Ta okoliščina pojasnjuje, zakaj se pri moških pogosteje pojavljajo kronični hepatitis B in jetrni rak (hepatomi) kot pri ženskah, ki imajo nižjo raven steroidnih hormonov.

Drugi regulativni elementi virusa hepatitisa B modulirajo (nadzirajo) ravni sinteze posameznih proteinov. Na primer, velik protein se sintetizira le v majhnih količinah. Večina je na površini nalezljivih virionov. In glavni protein in v manjšem obsegu se srednji protein sintetizira v velikih količinah in pusti celice v površinskih antigenskih delcih, ki v serumu vsebujejo veliko več kot zreli virioni. Število površinskih antigenskih delcev je lahko 1011-1013 na 1 ml krvi (več sto μg).

Virus hepatitisa B je izoliran v novi družini virusov - Hepadnaviridae, rodu Orthohepadnavirus. Podobni hepadnavirusi so našli pri različnih živalih (zemeljskih beljakovinah, marmotih, vevericah, pekinških racah).

Reprodukcija hepadnavirusa poteka na neobičajen način. Zlasti se replikacija genomske DNA pojavi prek vmesne povezave - RNA, to je z mehanizmom reverzne transkripcije.

Življenjski cikel virusa hepatitisa B.

• Adsorpcija v celici.
• Prodiranje v celico preko receptorsko posredovano mehanizmom endocitoze (obrobljen pit -> meji viali -> lizosomska -> izstopa nukleokapside in vpis virusnega genoma v hepatocitov jedra).
• Intracelična reprodukcija.

Med penetracijo v celico se kratek ("plus") DNA DNA razteza (konča). V jedru celična DNK odvisna RNA polimeraza sintetizira RNK 3500 nukleotidov (pregenov) in manjše mRNA za sintezo virusnih proteinov. Nato se pregenska in virusna DNA polimeraza pakirajo v novo sintetiziran kapsid, ki se prenese v citoplazem. Tu se pojavi reverzna transkripcija pregoma. Sintetizira novo "minus" -definirano DNK. Po zaključku sinteze minus DNA je pregenomna RNA uničena. VIRIONNA DNK polimeraza v "minus" verigi sintetizira "plus" -chain. Virusna DNA, ki je sedaj dvojno verižna, lahko že dolgo obstaja v celici in se vrne v jedro za naslednji cikel replikacije. Če novega virusnega delca ni podvržena nadaljnji replikacije, nukleokapside tvorjen s prehodom skozi celično membrano, pokrita superkapsidom, bud iz celice, in se takoj ustavi kratko podaljšanje "plus" verižnim DNA. Zato se dolžina te nitke razlikuje. V tipični akutno obliko označevalcev hepatitisa B serološke naslednje zaporedno vsebovane v krvi: HBsAg, HBeAg in protiteles (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg in anti-HBsAg.

Sestavek virusa hepatitisa B imajo onkogena, vendar je bilo ugotovljeno, da prodira v celični kromosom (v različnih odsekih), virusne DNK lahko v njih povzroča različno genetsko prilagoditev - delecijo translokacijo, pomnoževanje, ki lahko povzroči razvoj raka na jetrih - eno najhujših posledic virusnega hepatitisa B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Odpornost virusa hepatitisa B

Virus hepatitisa B je zelo odporen. Pri sobni temperaturi ostane živahna 3 mesece, v zamrznjenem stanju - že več let. Virus je popolnoma inaktiviramo z avtoklaviranjem (120 ° C) pri refluksu 30 minut, s suhim toplote pri temperaturi 180 "C 60 minut, pri 60 ° C. - 10 ur, odpornih na kislem mediju, ki pa se uničijo v alkalnem. Virus umre, če se zdravi s H202, kloraminom, formalinom, fenolom in UV-obsevanjem.

Patogeneza in simptomi hepatitisa B

Virus se hematogeno injicira neposredno v jetra. V patogenezi hepatitisa igrajo pomembno vlogo avtoimunski humoralni in celični odzivi. Predpostavlja se, da je izguba hepatocitov zaradi ne toliko z neposrednim delovanjem samega virusa, vendar z gostiteljem imunološke reakcije, ki se pojavljajo v zvezi s spremembo celično membrano virusnih proteinov, ki inducirajo nastanek avtoprotiteles do jetrnih celic. Zato se lahko kot avtoimunska bolezen razvije kronični hepatitis in ciroza jeter.

Celične avtoimunske reakcije na virusne beljakovine, ki jih vsebuje hepatocitna membrana, posredujejo T-citotoksični limfociti in druge celice jetrnega morilca. Zato je akutna distrofija jeter mogoče obravnavati kot reakcijo zavrnitve posebnega heterografta.

Inkubacijsko obdobje traja od 45 do 180 dni, v povprečju 60 do 90 dni. Za klinični potek hepatitisa B je značilna velika raznolikost; lahko pride do bolezni: v latentni obliki, ki se odkrije samo z laboratorijskimi metodami, v tipični ikterični obliki in v maligni obliki, ki se konča smrtonosno. Trajanje predzamrtne faze se giblje od enega do nekaj tednov. Ikteričnih čas je običajno dolg in je označena z dobro opredeljenimi simptomov (zlatenica, hiperbilirubinemija, temen urin, zlatenica beločnice). Dolgotrajno obliko opazili pri 15-20% bolnikov in 90% od njih razvije kroničnim hepatitisom B. Bolniki s kronično obliko pogosto opazili avtoimunskih procesov spremlja visoko vsebnostjo protivopechenochnyh protiteles, ki so ugotovljene z encimsko-vezan imunski testom (min). Pri otrocih je hepatitis B blagi in pogosto brez zlatenice, pri majhnih otrocih - večinoma asimptomatski.

Postinfektivna imunost (humoralna in celična) je dolga, vseživljenjska, zaradi virusu nevtralizirajočih protiteles (anti-HBsAg), v odsotnosti površinskega antigena v krvi. Pogosto opazujemo latentno imunizacijo zaradi ponavljajočih se stikov s HBV, kar je vzrok za razširjeno odpornost na virus med populacijo. Običajno se bolniki z akutno obliko hepatitisa B popolnoma izterjajo, ko se protitelesa kopičijo. Vendar pa v nekaterih primerih kljub visoki ravni virusnega antigena v krvi (okoliščina, ki pojasnjuje, zakaj se parenteralna okužba najpogosteje pojavlja), protitelesa proti njej ne proizvajajo. Virus ostane v jetrih, človek pa dolgo časa, včasih za življenje, postane kronični nosilec. Ta okoliščina je očitno povezana s šibkim imunskim odzivom. Eden najpogostejših rezultatov kroničnega hepatitisa B je ciroza in jetrni rak, ki se razvije po latentnem obdobju do 30-50 let.

Epidemiologija hepatitisa B

Vir okužbe z virusom hepatitisa B je le oseba. V nasprotju s prejšnjimi predstavništvih, da okužba z virusom hepatitisa B se pojavlja izključno v parenteralni poti, je sedaj dokazano, da je na voljo v različnih izločkov in izločki :. Sline, nazofarinksa izločki, blatom, solzni tekočini, semena, menstrualne krvi, itd Tako, okužba ne nastane le parenteralni poti, temveč tudi spolno in navpični (iz matere v zarodek), t. E. Praktično okužba z virusom hepatitisa B lahko na več načinov.

Hepatitis B na svetu je ubil toliko ljudi kot v vseh letih druge svetovne vojne. Po podatkih WHO je število nosilcev HBV od 0,1 do 20% populacije različnih držav ali regij.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnoza hepatitisa B

Trenutno je glavna metoda diagnoze hepatitisa B uporaba reverzne pasivne hemaglutinacijske reakcije (ROSGA) za odkrivanje virusa ali njegovega površinskega antigena HBsAg. Kot že rečeno, kri površinskega antigena vsebuje veliko več kot virus sam (100-1000-krat). Za reakcijo ROPGA so eritrociti občutljivi na protitelesa proti virusu hepatitisa B. Če je v krvi antigen, pride do reakcije hemaglutinacije. ROPGA je preprosta, priročna, zelo specifična. Za odkrivanje protiteles proti antigenu virusa HBsAg se uporabljajo različne imunološke metode (DSC, RPGA, IFM, RIM itd.). Poleg tega se za odkrivanje HBV in njegovih antigenov uporabljajo variante PCR.

Različne imunološke metode se lahko uporabijo za odkrivanje protiteles proti virusnemu antigenu (HBsAg) v serumu bolnika (DSC, RPGA, reakcija padavin, IFM, RIM itd.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Posebno preprečevanje hepatitisa B

Ob upoštevanju visoke incidence hepatitisa B in tudi, da je na svetu veliko nosilcev HBV, so cepljenja WHO proti hepatitisu B obvezna in jih je treba izvesti v prvem letu življenja. Za cepljenje so predlagane dve vrsti cepiv. Za pripravo enega od njih se uporablja plazma nosilcev virusov kot surovina, saj je virusni antigen v njem v količini, ki je zadostna za pripravo cepiva. Glavni pogoj za pripravo te vrste cepiva je njihova popolna varnost, tj. Popolna inaktivacija virusa, ki jo zagotavlja tehnologija priprave cepiva. Za izdelavo cepiva druge vrste se uporabljajo metode genskega inženiringa, za pripravo antigenskega materiala pa se uporablja zlasti rekombinantni klon kvasovk, ki proizvaja površinski antigen virusa hepatitisa B.

Obe cepivi so zelo učinkoviti (zaščitite 95% cepljenih). Trajanje postvaccinalne imunosti ni krajše od 5-6 let. Cepiva so bila ustvarjena tako za odrasle kot za dojenčke in majhne otroke - najpomembnejša sestavina globalnega boja proti hepatitisu B. Celotno cepljenje je sestavljeno iz treh injekcij:

I odmerek - takoj po rojstvu; II odmerek - po 1-2 mesecih; III odmerek - do konca prvega leta življenja.

Ta cepiva vključeni v razširjenem programu cepljenja, WHO in je usklajen s koledarjem njenega izvajanja (v skladu s priporočili Svetovne zdravstvene organizacije v 1. Letu življenja se izvaja cepljenje proti tuberkulozi, otroški paralizi, hepatitisu B, ošpicam, tetanusu, davici, oslovskemu kašlju).

Gammaglobulin, ki vsebuje protitelesa proti HBV, se uporablja za nujno pasivno imunoprofilakacijo osebam, ki so imele stik z bolnikom s hepatitisom B.

Za zdravljenje hepatitisa B (akutne in kronične oblike) uporabljamo interferon in amiksin (za indukcijo svoje endogene sinteze). Pri zdravljenju kroničnega hepatitisa B je nov učinek lamivudin (sintetični nukleozid) učinkovit.