^

Zdravje

A
A
A

PCR kot metoda diagnosticiranja genetskih bolezni

 
, Medicinski urednik
Zadnji pregled: 23.04.2024
 
Fact-checked
х

Vsa vsebina iLive je pregledana ali preverjena, da se zagotovi čim večja dejanska natančnost.

Imamo stroge smernice za pridobivanje virov in samo povezave do uglednih medijskih strani, akademskih raziskovalnih institucij in, kadar je to mogoče, medicinsko pregledanih študij. Upoštevajte, da so številke v oklepajih ([1], [2] itd.) Povezave, ki jih je mogoče klikniti na te študije.

Če menite, da je katera koli naša vsebina netočna, zastarela ali drugače vprašljiva, jo izberite in pritisnite Ctrl + Enter.

PCR je nov dosežek v molekularni genetiki, ki se uporablja za ojačitev DNK in omogoča, da se poseben del DNA (to je kateri koli gen zanimanja) hitro inicializira in vitro več kot 200.000 krat. Za izvedbo reakcije zadošča, da ima material DNA iz ene celice; količina DNA, pomnožena s PCR, je tako velika, da je lahko ta DNA preprosto obarvan (z uporabo radioaktivnih sond po elektroforezi ni potrebna). Predpogoj za vodenje PCR je poznavanje nukleotidne sekvence ojačane DNA regije za pravilno izbiro umetno sintetiziranih primerjev.

Trenutno PCR je proces, ki se pojavi v enem cevi in sestoji iz ponavljajočih se ciklov pomnoževanja (reprodukcija, kopija) specifičnih sekvenc DNA, da dobimo dovolj veliko število kopij, ki jih je mogoče odkriti z elektroforezo. Ena Ključna komponenta reakcije - "primerji" - sintetični oligonukleotidi, sestavljeni iz 20-30 baz komplementarnih «mesta« (področja) žarjenje (povezava) s prepoznavnim del matrične DNA.

PCR se samodejno nadaljuje v programabilnem termostatu - termocikler (termocikler). Tristopenjski cikel, ki povzroči replike določljivega dela vzorčne DNA, se ponovi 30 do 50-krat v skladu s prednastavljenim programom termičnega cikla. V prvem ciklu oligoprami hibridizirajo s prvotno vzorčno DNA, nato pa (v naslednjih ciklusih) in z novo sintezo molekul DNA, ko se kopičijo v reakcijski mešanici. V slednjem primeru se sinteza DNA ne konča zaradi spremembe v temperaturnem režimu, ampak ob dosegu meje DNA polimeraze ojačane regije, ki določi velikost novo sintetizirane DNA regije v enem nukleotidu.

Kot metodo detekcije dobljenih molekul DNA se uporablja elektroforeza, s pomočjo katere se ojačan material razdeli glede na velikost amplikonov (ojačevalni produkti).

S pomočjo PCR je mogoče neposredno raziskati kraje lokalizacije domnevnih mutacij ali polimorfnih mest, pa tudi preučiti prisotnost katerekoli druge specifične lastnosti DNK.

trusted-source[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

You are reporting a typo in the following text:
Simply click the "Send typo report" button to complete the report. You can also include a comment.