Medicinski strokovnjak članka
Nove publikacije
Polimerazna verižna reakcija (PCR) pri diagnostiki nalezljivih bolezni
Zadnji pregled: 23.04.2024
Vsa vsebina iLive je pregledana ali preverjena, da se zagotovi čim večja dejanska natančnost.
Imamo stroge smernice za pridobivanje virov in samo povezave do uglednih medijskih strani, akademskih raziskovalnih institucij in, kadar je to mogoče, medicinsko pregledanih študij. Upoštevajte, da so številke v oklepajih ([1], [2] itd.) Povezave, ki jih je mogoče klikniti na te študije.
Če menite, da je katera koli naša vsebina netočna, zastarela ali drugače vprašljiva, jo izberite in pritisnite Ctrl + Enter.
PCR - ena od metod za diagnostiko DNA, ki omogočajo povečanje števila kopij zaznavno odseka genoma (DNK) bakterij ali virusov uporablja encima DNA polimeraze milijonkrat. Test za to specifično genomski segment nukleinske kisline večkrat pomnožene (pomnožene), ki omogoča njegovo identifikacijo. Prvič, molekula DNK bakterij ali virusov s segrevanjem razdelimo v dve verigi, nato v prisotnosti sintetiziranih DNA primerjev (zaporedje nukleotidov, ki so značilna za opredeljeno genomske) se jih veže s komplementarnimi odsekov DNA, sintetizirane druga veriga nukleinske kisline po vsakem primerjem v prisotnosti termostabilne DNA polimeraze . Izkazalo se obe DNA molekule. Postopek se ponovi večkrat. Za diagnozo, le ena molekula DNA, tj ena bakterija ali virus delcev. Reagiranje dodaten korak - sintezo DNK molekule RNA z uporabo encima reverzne transkriptaze - je dovoljeno preizkusiti RNA virusov kot je virus HCV. PCR - tristopenjski postopek, ponavljajoče cikluse denaturaciji, prileganje začetnih oligonukleotidov, sinteza DNK (polimerizacija). Količina DNK sintetizirali smo identificirali z ELISA ali elektroforezo.
PCR se lahko uporablja v drugačnem biološkem materialu - seruma ali krvne plazme, strganje sečnice, biopsija, plevralni tekočini, cerebrospinalni tekočini, itd Prvi PCR smo uporabili za diagnosticiranje nalezljivih bolezni, kot so virusni hepatitis B, virusa hepatitisa C, virusnega hepatitisa D, okužba s CMV, infekciozni spolno prenosljive okužbe (gonoreja, smeti diynaya, mikoplazme, okužba Ureaplasma), tuberkuloza, HIV -infekcija itd.
Prednost PCR pri diagnostiki nalezljivih bolezni nad drugimi metodami raziskovanja je naslednja:
- povzročitelje okužbe lahko najdemo v kateremkoli biološkem okolju telesa, vključno z materialom, pridobljenim z biopsijo;
- Možno je diagnosticirati nalezljive bolezni v najzgodnejših stadijih bolezni;
- Kvantitativno ovrednotenje rezultatov raziskave je možno (koliko virusov ali bakterij vsebuje v preiskavi);
- visoka občutljivost metode; npr občutljivost PCR za detekcijo DNA virusa hepatitisa B v krvi je 0,001 pg / ml (okoli 4 x 10 2 kopij / ml), medtem ko je občutljivost metode DNK hibridizacije pomočjo razvejane sond - 2,1 pg / ml (približno 7 × 10 5 kopij / ml).
[