Protitelesa proti nuklearnim antigenom (antinuklearni faktor) v krvi

Pri zdravih ljudeh je titer protiteles proti jedrnim antigenom v krvnem serumu 1:40-1:80 (klinično pomemben titer je ≥1:160 pri uporabi metode indirektne imunofluorescence; pri uporabi presejalnih metod - pod 1:50).

Antinuklearni faktor - protitelesa proti celotnemu jedru. To je heterogena skupina avtoprotiteles, ki reagirajo z različnimi komponentami jedra. Določanje protiteles proti jedrnim antigenom v krvnem serumu je test za sistemske bolezni vezivnega tkiva. Presejalni test za prisotnost antinuklearnih protiteles v krvnem serumu se izvaja z radioimunološkim testom (RIA), reakcijo fiksacije komplementa (CFR) ali ELISA.

Pozitivne rezultate presejanja je treba potrditi z metodo indirektne imunofluorescence. Kot celični substrat se uporabljajo pripravki, pripravljeni iz suspenzije celic z velikimi jedri [iz človeških epitelijskih celic linije HEp-2 - celice raka grla ali rezine mišjih jeter]. Vrsta obarvanja (narava porazdelitve fluorescenčne oznake v celicah) je pri različnih boleznih različna in določa smer nadaljnjega določanja specifičnosti antinuklearnih protiteles.

• Difuzno obarvanje (enakomerna porazdelitev označevalca) je najmanj specifično, možno pri sistemskem eritematoznem lupusu, sindromu lupusa, povzročenega z zdravili, in drugih avtoimunskih boleznih, pa tudi pri starejših posameznikih. V primeru difuznega obarvanja celic je treba reakcijo ponoviti z večjo razredčitvijo testiranega krvnega seruma. Če vrsta obarvanja ostane enaka, je najverjetneje, da je antigen, proti kateremu so usmerjena antinuklearna protitelesa, deoksiribonukleoprotein.
• Homogeno ali periferno obarvanje opazimo, kadar v preiskovanem serumu prevladujejo protitelesa proti dvoverižni DNA. Ta vrsta obarvanja se najpogosteje pojavlja pri sistemskem eritematoznem lupusu.
• Pikasto ali lisasto obarvanje je posledica protiteles proti ekstrahiranim jedrnim antigenom in se običajno pojavi pri mešani bolezni vezivnega tkiva, Sjögrenovem sindromu in sindromu lupusa, povzročenega z zdravili.
• Nukleolarno obarvanje (porazdelitev označevalcev v nukleolih) povzročajo protitelesa proti ribonukleoproteinu (glejte spodaj). Ta vrsta obarvanja je značilna za sistemsko sklerodermo in je občasno možna tudi pri drugih avtoimunskih boleznih.
• Centromerno ali diskretno pikčasto obarvanje povzročajo protitelesa proti centromeri (specializirani domeni kromosomov) in je značilno za CREST sindrom in druge avtoimunske revmatične bolezni.

Glavni cilj študije za antinuklearna protitelesa je identifikacija sistemskega eritematoznega lupusa, saj se pri tej bolezni pojavijo v krvnem serumu 95 % bolnikov v 3 mesecih po njenem nastopu.

Določanje protiteles proti jedrnim antigenom je zelo pomembno za diagnostiko kolagenoz. Pri nodularnem poliarteritisu se titer (z uporabo presejalnih metod) lahko poveča na 1:100, pri dermatomiozitisu na 1:500, pri sistemskem eritematoznem lupusu na 1:1000 in več. Pri sistemskem eritematoznem lupusu ima test za odkrivanje antinuklearnega faktorja visoko stopnjo občutljivosti (89 %), vendar zmerno specifičnost (78 %) v primerjavi s testom za odkrivanje protiteles proti naravni DNA (občutljivost 38 %, specifičnost 98 %). Protitelesa proti jedrnim antigenom so zelo specifična za sistemski eritematozni lupus. Dolgotrajno ohranjanje visoke ravni protiteles je neugoden znak. Znižanje titra napoveduje remisijo ali (včasih) smrtni izid.

Pri sklerodermi je pogostost odkrivanja protiteles proti jedrnim antigenom 60–80 %, vendar je njihov titer nižji kot pri sistemskem eritematoznem lupusu. Med titrom antinuklearnega faktorja v krvi in resnostjo bolezni ni povezave. Pri revmatoidnem artritisu pogosto ločimo oblike bolezni, podobne SLE, zato protitelesa proti jedrnim antigenom odkrijemo precej pogosto. Pri dermatomiozitisu so protitelesa proti jedrnim antigenom v krvi odkrita v 20–60 % primerov (titer do 1:500), pri nodularnem poliarteritisu – v 17 % (1:100), pri Sjögrenovi bolezni – v 56 % v kombinaciji z artritisom in v 88 % primerov pri Gougerot-Sjögrenovem sindromu. Pri diskoidnem eritematoznem lupusu se antinuklearni faktor odkrije pri 50 % bolnikov.

Poleg revmatičnih bolezni se protitelesa proti jedrnim antigenom v krvi odkrijejo tudi pri kroničnem aktivnem hepatitisu (v 30–50 % primerov), njihov titer pa včasih doseže 1:1000. Avtoprotitelesa proti jedrnim antigenom se lahko v krvi pojavijo pri infekcijski mononukleozi, akutni in kronični levkemiji, pridobljeni hemolitični anemiji, Waldenströmovi bolezni, jetrni cirozi, biliarni cirozi, hepatitisu, malariji, gobavosti, kronični ledvični odpovedi, trombocitopeniji, limfoproliferativnih boleznih, miasteniji in timomih.

V skoraj 10 % primerov se pri zdravih ljudeh odkrije antinuklearni faktor, vendar v nizkih titrih (ne več kot 1:50).

V zadnjih letih je bila razvita encimsko-imunska metoda za določanje antinuklearnih protiteles različnih spektrov, ki je enostavna za izvedbo in postopoma nadomešča imunofluorescenčno metodo.

Številna zdravila lahko povzročijo lažno pozitivno povečanje titra antinuklearnih protiteles: aminosalicilati, karbamazepin, izoniazid, metildopa, prokainamid, jodidi, peroralni kontraceptivi, tetraciklini, tiazidni diuretiki, sulfonamidi, nifedipin, zaviralci adrenergičnih receptorjev β, hidralazin, penicilamin, nitrofurantoin itd., zaradi sposobnosti teh zdravil, da med študijo povzročijo motnje.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]