Analiza vaginalne mikroflore

Splošni klinični pregled vaginalnega materiala

Vaginalni izcedek se pregleda za oceno narave mikroflore in ugotavljanje vnetnega procesa, pa tudi za identifikacijo atipičnih celic in oceno proizvodnje spolnih hormonov ("hormonsko ogledalo"). Material za citološko diagnostiko se pridobiva na različne načine: z aspiracijo in strganjem vsebine zadnjega vaginalnega forniksa, cervikalnega kanala ali z odvzemom brisov odtisov.

Vaginalna mikroflora

Pri diagnostiki vnetnih procesov ženskega genitalnega trakta ima ključno vlogo preučevanje mikroflore izločka. Z sodobnega vidika se normalna mikroflora genitalnega trakta obravnava kot skupek mikrobiocenoz, ki zasedajo številne ekološke niše na koži in sluznicah. Mikroorganizmi, ki sestavljajo normalno mikrofloro nožnice, so med seboj v različnih odnosih (nevtralizem, tekmovanje, komenzalizem, sinergizem, parazitizem itd.). Sprememba števila določene vrste mikroorganizmov v ustreznem biotopu ali pojav bakterij, ki niso značilne za ta habitat, služi kot signal za reverzibilne ali ireverzibilne spremembe v ustrezni členu mikroekološkega sistema. Značilnost normalne mikroflore genitalnega trakta pri ženskah je njena raznolikost.

Fakultativni laktobacili prevladujejo v vaginalni vsebini žensk z rednim menstrualnim ciklom in nosečnic, vendar so praktično odsotni pri predpubertetnih deklicah in ženskah po menopavzi. Število laktobacilov v nožnici zdravih žensk je 10 ⁵ -10 ⁷ CFU/ml. Proizvodnja estrogena pri ženskah v rodni dobi poveča vsebnost glikogena v vaginalnem epiteliju. Glikogen se presnovi v glukozo in nato s pomočjo laktobacilov v mlečno kislino. Zagotavlja nizko raven pH (manj kot 4,5), spodbuja rast acidofilnih mikroorganizmov, zlasti laktobacilov. Poleg laktobacilov vaginalna biocenoza vključuje več kot 40 vrst drugih bakterij, vendar njihov delež ne presega 5 % celotnega števila mikroorganizmov. Pri zdravih nenosečih ženskah je vrstni red bakterij naslednji: laktobacili, bifidobakterije, peptokoki, bakteroidi, epidermalni stafilokoki, korinebakterije, gardnerela, mobilungus, mikoplazma. Razmerje med anaerobno in aerobno floro je 10:1.

Vrstna sestava normalne vaginalne mikroflore

Mikroorganizmi	Vsebina, pogostost zaznavanja
Skupno število mikroorganizmov	105–107 /ml
Fakultativni laktobacili	Več kot 90 %
Drugi mikroorganizmi:	10 %
Staphylococcus epidermidis	36,6 %
Bifidobakterije	50 %
Candida albicans	25 % (pri nosečnicah do 40 %)
Gardnerella vaginalis	40–50 %
Ureaplasma hominis	70 %
E. coli	V majhnih količinah
Stafilokoki in streptokoki	V majhnih količinah
Anaerobna mikroflora (bakteroidi, peptostreptokoki, klostridi)	V majhnih količinah

Normalna bakterijska flora ima antagonistično vlogo, saj preprečuje vdor patogenih mikroorganizmov, vsak vdor v zdrav epitelij pa skoraj vedno spremljajo spremembe v vaginalni mikroflori.

Za oceno stanja vaginalne mikroflore v klinični praksi se že dolgo uporablja bakteriološka klasifikacija 4 stopenj čistosti, pri čemer se upošteva število laktobacilov, prisotnost patogenih bakterij, levkocitov in epitelijskih celic.

• I. stopnja. Razmazi vsebujejo epitelijske celice in čisto kulturo fakultativnih laktobacilov. Reakcija vaginalne vsebine je kisla (pH 4-4,5).
• II stopnja. Majhno število levkocitov, manj fakultativnih laktobacilov, prisotni so tudi drugi saprofiti, predvsem grampozitivni diplokoki, reakcija vsebine ostaja kisla (pH 5-5,5).
• III. stopnja. Veliko število epitelijskih celic, levkocitov. Fakultativni laktobacili v majhnih količinah, raznolika kokna flora; reakcija vsebine je rahlo kisla ali bazična (pH 6-7,2).
• IV. stopnja. Epitelijske celice, veliko levkocitov, raznolika piogena flora s popolno odsotnostjo vaginalnih bacilov, bazična reakcija (pH nad 7,2).

Trenutno sta konvencionalnost te klasifikacije in njena nezadostna informativnost očitni. Ne upošteva raznolikosti vrst normalne mikroflore, njihovih odnosov, pa tudi morebitne prisotnosti patogenih povzročiteljev, kot so gonokoki, trihomonade, glive, klamidije itd.

Kršitev razmerja med vsebnostjo različnih vrst mikroorganizmov ali vrstne sestave njihovih združb vodi do pojava vnetnih procesov v nožnici. Mehanizmi, ki spreminjajo normalen ekosistem nožnice, vključujejo: hormonske dejavnike, ki določajo vsebnost glikogena v epitelijskih celicah; mikrobni antagonizem; motnje imunskega sistema; spolno vedenje.

Za pravilno interpretacijo patoloških sprememb vnetnih procesov v ženskem genitalnem traktu je pomembno poznavanje citomorfoloških značilnosti normalne vaginalne sluznice.

Vaginalni epitelij (stratificiran ploščatocelični) se med menstrualnim ciklom pod vplivom spolnih hormonov ciklično spreminja. V stratificiranem ploščatoceličnem epiteliju vagine lahko ločimo naslednje plasti: površinsko, vmesno, zunanjo bazalno in notranjo bazalno. V prvih dneh po menstruaciji ostane približno tretjina vaginalnega epitelija, nato pa se med menstrualnim ciklom ponovno obnovi.

V vaginalnih brisih ločimo štiri vrste epitelijskih celic.

• Celice površinske plasti so velike (35–30 µm) poligonalne oblike, jedro je majhno (6 µm), piknotično. Celice so pogosto nameščene ločeno. Te celice so prisotne v velikih količinah od 9. do 14. dne menstrualnega cikla.
• Celice vmesne plasti so manjše (25–30 µm), nepravilne oblike, jedro je večje, okroglo ali ovalno. Celice so pogosto razporejene v plasteh. Prisotne so v vseh fazah menstrualnega cikla.
• Celice parabazalne plasti so majhne, okrogle oblike, z velikim okroglim osrednjim jedrom. Prisotne so v majhnem številu le med menstruacijo in se pojavijo v razmazih med menopavzo ali amenorejo.
• Bazalne (ali atrofične) celice so manjše od parabazalnih celic, okrogle oblike, z velikim jedrom in razmerjem med jedrom in citoplazmo 1:3. Pojavijo se med menopavzo in poporodno amenorejo.

Poleg epitelijskih celic lahko vaginalni brisi vsebujejo eritrocite (prisotne pri manjših poškodbah tkiva), levkocite v količini 6-8, po ovulaciji pa do 15 v vidnem polju, ki vstopijo v izloček bodisi z migracijo skozi vaginalno steno bodisi kot sestavina vnetnega eksudata.

Sluznica cervikalnega kanala je prekrita z visokim prizmatičnim epitelijem z bazalno razporeditvijo jeder, citoplazma celic pa vsebuje sluz. Pod prizmatičnim epitelijem se pogosto nahajajo rezervni (kombinirani) celični elementi. V predelu zunanjega cervikalnega odprtine se stikata dve vrsti epitelija - večplastni ploščati in prizmatični. V razmazih običajno najdemo prizmatične epitelijske celice, posamezne metaplastične celice in sluz (v sluzničnem čepu je lahko veliko levkocitov - do 60-70 v vidnem polju).

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]