PCR za hepatitis C

HCV v materialu je običajno odsoten.

V nasprotju z serološki diagnostiki hepatitis C virusnih metodah, kjer odkrivanje protiteles proti HCV-ja, lahko PCR zazna prisotnost HCV RNA in se neposredno količinsko njegove koncentracije v materialu. Test ima posebno specifičnost in visoko občutljivost: deset testnih snovi molekul HCV RNA zadoščajo za njegovo detekcijo. Odkrivanje protiteles proti HCV samo potrjuje dejstvo okuženih pacientov, vendar ne dopušča, da presodijo aktivnost infekcij (replikacije virusa) in prognozo bolezni. Poleg tega, protitelesa proti HCV odkrili v krvi bolnikov z akutnim in kroničnim hepatitisom, kot tudi pri tistih bolnikih, ki so bolni in vrniti, vendar pogosto protitelesa pojavijo v krvi le nekaj mesecev po nastopu kliničnih znakov bolezni, zaradi česar je težko diagnosticirati. Odkrivanje HCV v krvi z uporabo PCR je bolj informativna diagnostična metoda. Detekcija HCV RNA v PCR dokazuje viremia, omogoča presojo replikacije virusa v telesu in služi kot eno od meril za učinkovitost protivirusne terapije. Odkrivanje HCV RNA s PCR v zgodnjih fazah razvoja virusne okužbe v ozadju popolne odsotnosti kakršnih koli seroloških označevalcev lahko služi kot prvi dokaz okužbe. Vendar izolirano odkrivanje HCV RNA v ozadju popolne odsotnosti drugih seroloških markerjev ne more popolnoma odpraviti lažno pozitivnega rezultata PCR. V takih primerih je potrebna celovita ocena kliničnih, biokemijskih in morfoloških študij z večkratnim ponavljajočim potrjevanjem prisotnosti okužbe s PCR.

Zelo pomembno je uporaba metode PCR pri bolnikih s kroničnim virusnim hepatitisom C, saj v večini med njimi ni povezave med prisotnostjo virusne replikacije in delovanjem jetrnih encimov. V takih primerih samo PCR omogoča presojo prisotnosti virusne replikacije, še posebej, če je končni rezultat izražen kvantitativno. V večini primerov izginotje HCV RNA iz seruma v krvi poteka kasneje kot normalizacija jetrnih encimov, zato njihova normalizacija ne more biti podlaga za zaustavitev protivirusnega zdravljenja.

Za odkrivanje HCV RNA je praktično pomembno, da z metodo PCR ne raziskuje samo seruma, temveč tudi limfocite, hepatobiobaptam. Viruse je mogoče odkriti 2-3 krat pogosteje v jetrnem tkivu kot v serumu. Pri vrednotenju rezultatov študije krvnega seruma za HCV RNA je treba zapomniti, da lahko viremija niha v naravi (kot je sprememba encimske aktivnosti). Zato lahko po pozitivnih rezultatih študije PCR dobimo negativen rezultat in obratno. V takšnih primerih je za rešitev dvomov, ki se pojavijo, bolje raziskati hepatobiobate.

Odkrivanje HCV RNA v materialu z uporabo PCR se uporablja za naslednje namene:

• reševanje vprašljivih rezultatov seroloških študij;
• diferenciacijo virusnega hepatitisa C iz drugih oblik hepatitisa;
• odkrivanje akutne faze bolezni v primerjavi z preneseno okužbo ali stikom; faza okužbe novorojenčkov s seropozitivnimi materami HCV;
• spremljanje učinkovitosti protivirusnega zdravljenja.

Bolniki s sumljivim virusnim hepatitisom C:

• donatorji;
• osebe z dejavniki tveganja;
• osebe s povečano aktivnostjo ALT;
• bolniki z akutnim hepatitisom

Vse zgoraj navedene značilnosti vrednotenja rezultatov in pristopov k diagnostiki HCV z uporabo PCR veljajo tudi za druge okužbe.

Metoda PCR omogoča ne le odkrivanje RNA HCV v testnem materialu, temveč tudi ugotavljanje njegovega genotipa. Določitev genotipa virusa je zelo pomembna za izbiro bolnikov s kroničnim virusnim hepatitisom C, ki se zdravijo z interferonom-alfa in ribavirinom. Laboratorijske indikacije za zdravljenje kroničnega virusnega hepatitisa C z interferonom alfa so naslednje:

• povečana aktivnost transaminaze;
• prisotnost HCV RNA v krvi;
• genotip 1 HCV;
• visoka viremija v krvi (več kot 8 × 10 ⁵ kopij / ml).

Trenutno je vsebnost HCV RNA v serumu v krvi mogoče količinsko določiti s PCR, kar je zelo pomembno za nadzor zdravljenja z interferonom alfa. Raven viremije se ocenjuje na naslednji način: za HCV RNA od 10 ² do 10 ⁴ kopij / ml - šibka; od 10 ⁵ do 10 ⁷ kopij / ml - srednja, nad 10 ⁸ kopij / ml - visoka. Z učinkovitim zdravljenjem se raven viremije zmanjša.

[1], [2], [3], [4]