Medicinski strokovnjak članka
Nove publikacije
Južno blotanje
Zadnji pregled: 05.07.2025
Vsa vsebina iLive je pregledana ali preverjena, da se zagotovi čim večja dejanska natančnost.
Imamo stroge smernice za pridobivanje virov in samo povezave do uglednih medijskih strani, akademskih raziskovalnih institucij in, kadar je to mogoče, medicinsko pregledanih študij. Upoštevajte, da so številke v oklepajih ([1], [2] itd.) Povezave, ki jih je mogoče klikniti na te študije.
Če menite, da je katera koli naša vsebina netočna, zastarela ali drugače vprašljiva, jo izberite in pritisnite Ctrl + Enter.
Southern blotting (ki sta ga leta 1975 razvila E. Southern in R. Davis) je glavna metoda, ki se trenutno uporablja za identifikacijo genov za določeno bolezen. Za to se iz bolnikovih celic ekstrahira DNK in obdela z eno ali več restrikcijskimi endonukleazami. Nastali fragmenti se podvržejo elektroforezi, ki omogoča njihovo ločevanje po velikosti (manjši fragmenti se hitreje premikajo skozi pore gela). Fragmenti se nato prenesejo (ponovno natisnejo) na nitrocelulozni filter, na katerega se nanese radioaktivno označena sonda. Sonda se veže le na komplementarno zaporedje. Nato se z avtoradiografijo določi položaj želenega fragmenta genomske DNK na elektroferogramu.
Hibridizacija z označeno DNK sondo pripravkov DNK ali RNK, ki se po kapljicah nanese na trdno matrico brez predhodne omejitve in elektroforeze, se imenuje pikčasta ali špranjska hibridizacija, odvisno od konfiguracije DNK pike na filtru (okrogla oziroma podolgovata).
[