Testi za človeški papiloma virus: kako jemati, dekodiranje

Humani papiloma virus je resna grožnja. Diagnostika je potrebna za določitev seva okužbe in tveganja za njeno onkogenost. Takšne informacije nam omogočajo, da ustvarimo najprimernejši in najučinkovitejši načrt zdravljenja.

Visokokakovostno diagnostiko izvaja več specialistov hkrati. Glavne indikacije za pregled telesa so:

• Aktivno spolno življenje in pogosta menjava spolnih partnerjev.
• Srbenje, pekoč občutek v genitalnem predelu, netipičen izcedek.
• Pojav novih izrastkov na koži in sluznicah v obliki papiloma, bradavic in kondilomov.

Diagnoza papilomavirusa je sestavljena iz kompleksa laboratorijskih in instrumentalnih metod:

• Vizualni pregled in zbiranje anamneze – zdravnik pregleda prizadeta območja in vpraša, kdaj se je prvič pojavil izpuščaj ali drugi znaki HPV. Oceni vrsto in obliko novotvorb. Če so prisotne anogenitalne izrastki, se opravi pregled materničnega vratu in uretroskopija.
• Citologija brisov in strganin – izvaja se za ugotavljanje morfoloških sprememb na celični ravni, povezanih s HPV. Natančnost te metode je odvisna od tehnike odvzema materiala in usposobljenosti laboratorijskih tehnikov.
• Kolposkopija je pregled sluznice za odkrivanje subkliničnih oblik okužbe. Diagnozo potrdi prisotnost naslednjih dejavnikov: levkoplakija, mozaik, punkcija, cona nenormalnih transformacij.
• Biopsija je odvzem majhne količine prizadetega tkiva za mikroskopski pregled. Običajno se izvede, kadar obstaja sum na prizadetost materničnega vratu.
• Histološki pregled – material, pridobljen kot rezultat biopsije, se pošlje v laboratorijsko študijo za ugotavljanje predrakavih stanj in drugih celičnih nepravilnosti.
• PCR – izvaja se za identifikacijo posameznih tipov HPV. Za diagnostiko se uporabljajo kri, urin, sluz in druge tkivne tekočine.
• Digene test je ena najbolj zanesljivih diagnostičnih metod. Ima visoko občutljivost na humani papiloma virus. Omogoča določitev genotipa in njegove pripadnosti skupini z visoko ali nizko onkogeno okužbo.

Danes obstaja veliko metod, ki omogočajo odkrivanje okužbe s HPV in določanje stopnje njene agresivnosti.

Presejalni testi za humani papiloma virus

Obvezen test za bolnike z nagnjenostjo k malignim procesom v telesu je presejalni test. Tudi humani papiloma virus je razlog za opravljanje tega laboratorijskega testa.

Prvi presejalni test je priporočljiv za ženske, stare 30 let. Analiza je potrebna ne le za odkrivanje papiloma virusa, temveč tudi za preprečevanje erozivnih lezij materničnega vratu, povezanih s HPV.

Najpogosteje so pacientom predpisane naslednje vrste presejalnih testov:

• Citološki PAP test – za študijo se uporablja strganje materničnega vratu, nameščeno v tekočem mediju. Pomaga pri odkrivanju onkoloških sevov HPV v zgodnji fazi razvoja.
• Razširjeno – identificira genotipe z visoko onkogenostjo in njihovo koncentracijo v telesu.
• Polimerazna verižna reakcija ima visoko diagnostično vrednost, saj omogoča identifikacijo vseh vrst humanega papiloma virusa.

Presejalni testi za HPV se izvajajo tako med diagnozo bolezni kot med terapijo in za oceno rezultatov zdravljenja.

Test za humani papiloma virus

Če obstaja sum na papilomavirus, se vsem pacientom predpiše niz diagnostičnih postopkov. Analiza HPV je določitev vrste virusa v laboratorijskih pogojih. Za študijo se uporabljajo različne biološke tekočine in tkiva.

Najpogosteje se za analizo odvzame bris iz genitalij. Odvzem materiala s tega področja je potreben tudi ob odsotnosti vizualnih simptomov papilomatoze. Nastali biopsijski vzorec se pod mikroskopom pregleda na prisotnost epitelijskih celic, ki jih je virus spremenil. Na podlagi diagnostičnih rezultatov se določi vrsta okužbe in tveganje za njeno onkogenost.

Pri načrtovanju nosečnosti je obvezen test za papilomatozno okužbo, da se ugotovijo vzroki neplodnosti in patologije nosečnosti. V tem primeru se test predpiše obema partnerjema hkrati. To je posledica dejstva, da se virus prenaša med intimnim stikom. Na podlagi rezultatov študije lahko zdravnik predpiše dodatne diagnostične metode in pripravi načrt zdravljenja.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Kvantitativna analiza za humani papiloma virus

Za odkrivanje papiloma virusa, določitev njegove vrste in stopnje aktivnosti se izvede kvantitativna analiza. Obstaja več metod za določanje HPV, poglejmo si jih:

1. Polimerazna verižna reakcija – PCR je standard za diagnostiko HPV. Analiza temelji na povečanju števila kopij virusne DNK v biopsiji. Ta metoda omogoča odkrivanje celo posameznih vrst virusa z visoko natančnostjo.
2. Digene test – posebnost te metode je zanesljivo odkrivanje genotipov s povečano onkogenostjo. Za analizo se uporabljajo različne biološke tekočine in materiali.
3. Določanje prisotnosti virusnih protiteles - analiza razkriva specifične beljakovine imunskega sistema. Vsak virusni povzročitelj, ki vstopi v telo, spodbuja proizvodnjo edinstvenih imunoglobulinov. Če se v krvnem serumu odkrijejo protitelesa proti humanemu papiloma virusu, to kaže na okužbo telesa.

Za kvantitativno analizo se uporabljajo kapilarna kri (iz prsta), strganje s kože in sluznic ter biopsija tkiva. 12 ur pred testi je treba prenehati jemati protiglivična, protivirusna, protimikrobna in druga zdravila, vključno s kontracepcijskimi sredstvi. Na dan diagnoze se je treba stuširati in temeljito umiti intimne predele, če so bili z njih odvzeti strganje. Prav tako se je treba 2-3 dni pred posegom vzdržati spolnih odnosov.

Lečeči zdravnik interpretira pridobljene rezultate. Zdravnik upošteva ne le podatke opravljene diagnostike, temveč tudi klinične manifestacije bolezni. V nasprotnem primeru se lahko rezultati napačno interpretirajo.

DNK humanega papiloma virusa, PCR

Ena najpogostejših in najzanesljivejših metod za odkrivanje DNK humanega papiloma virusa je PCR. Za izvedbo verižne reakcije s polimerazo se uporabljajo različni biološki materiali: kri, urin, razmazi sluznice, amnijska tekočina. Analiza omogoča ugotavljanje prisotnosti okužbe, tudi če je latentna v telesu.

Načelo te diagnostične metode temelji na izolaciji človeške in virusne DNK. Vsaka deoksiribonukleinska kislina je sestavljena iz štirih nukleotidov:

• A – adenin.
• T – timidin.
• G – gvanin.
• C – citozin.

Po pravilih genetike imajo določen vrstni red kombiniranja: A+T, G+C. Vsi živi organizmi imajo svojo DNK, ki jo je mogoče izolirati. PCR prepozna fragmente patogene DNK in s tem izolira patogena.

Prednosti PCR:

1. Univerzalnost – poleg humanega papiloma virusa je med študijo mogoče odkriti tudi številne druge povzročitelje nalezljivih bolezni.
2. Visoka občutljivost – poleg ugotavljanja prisotnosti virusa metoda določa tudi njegov tip in druge značilnosti.
3. Učinkovitost – zanesljivo identificira zahtevano okužbo.
4. Rezultate testa hitrosti lahko dobite v 24 urah po opravljenem testu.

Priprava na analizo:

• En teden pred načrtovanim testom morate prenehati jemati kontracepcijske tablete, saj lahko vplivajo na rezultate.
• Študija se ne izvaja med menstruacijo in 3 dni po njej.
• Dva dni pred testom se morate vzdržati spolnih odnosov.
• Diagnostika se izvaja na tešče, zadnji obrok naj bo 12 ur pred analizo. Lahko pa pijete vodo.
• Na dan odvzema PCR testa HPV ni priporočljivo izvajati higienskih postopkov ali iti na stranišče, da bi lulali dve uri pred odvzemom materiala.

Pridobljene rezultate mora interpretirati zdravnik. Kazalnik do 3 Lg je neznatna koncentracija patogena, 3-5 Lg je klinično pomembna koncentracija, več kot 5 Lg pa je visoka. Običajno bi morali biti vsi kvantitativni titri negativni. Vendar negativni rezultati ne kažejo vedno na odsotnost bolezni. To se pogosto opazi pri neznatnih koncentracijah virusa v telesu in kadar ga imunski sistem zavira.

Kljub vsem prednostim ima PCR številne pomanjkljivosti. Analizo je treba opraviti le v sodobnem laboratoriju, da se izognemo lažnim rezultatom. Posebno pozornost je treba nameniti odvzemu materiala. Rezultate naj dešifrira le zdravnik, saj se lahko pozitivni rezultati pojavijo po nedavnem zdravljenju okužbe.

Strganje za humani papiloma virus

Za odkrivanje okužbe s HPV pri moških se opravi strganje, to je Digene test. Material se odvzame iz sečnice s posebno krtačko; v nekaterih primerih se tkivo odvzame z glavice penisa. Pred testom se morate stuširati in temeljito umiti. Kršitev osebne higiene negativno vpliva na rezultate testa.

Pri ženskah se strganje z materničnega vratu odvzame, če obstaja sum na displazijo, erozijo in druge patološke procese, ki jih povzroča HPV. Za odvzem materiala zdravnik odstrani vaginalni izcedek in v organ vstavi majhno krtačko, ki jo vrti okoli osi v cervikalnem kanalu. Po vseh manipulacijah se krtačka postavi v epruveto z medijem in pošlje v laboratorij.

Pridobljeni materiali se pošljejo na diferencialno diagnostiko z metodo PCR; citološki presejalni test se ne izvaja. Rezultati so pripravljeni 2-3 dni po analizi. Pridobljeni podatki predstavljajo popolne informacije o vrsti virusa, njegovi kancerogenosti in številnih drugih dejavnikih v poteku bolezni. Če so rezultati napačni, se študija ponovi. Ponovni presejalni testi so potrebni med zdravljenjem in po terapiji, da se ugotovi njena učinkovitost.

Bris za humani papiloma virus

Če se med ginekološkim pregledom na genitalnem področju odkrijejo bradavice ali kondilomi, zdravnik vzame bris za HPV. Zdravnik s posebnim čopičem prečesa prizadeta tkiva. Bris se pri ženskah odvzame iz cervikalnega kanala, pri moških pa iz sečnice. Odvzeti biopsijski vzorec se pošlje na preiskavo v laboratorij.

Pri sumu na humani papilomavirus se uporabljajo naslednje vrste razmazov:

• PCR – zazna DNK okužbe. Za izvedbo te analize se pri moških odvzame strganje iz sečnice, pri ženskah pa iz nožnice in cervikalnega kanala. Uporabi se lahko tudi seme ali urin.
• Digensko testiranje je študija zbranega materiala na molekularni ravni. Testiranje je hkrati diferenciacija dveh skupin papiloma okužb - z visoko in nizko onkogenostjo.

Zgornje študije rezultate razvrščajo v 5 vrst:

1. Odsotnost atipičnih celic.
2. Prisotnost spremenjenih celic zaradi vnetnega procesa.
3. Najmanjše število celic z atipično strukturo.
4. Maligne celice.
5. Veliko število onkogenih celic.

Obstaja tudi klasifikacija po sistemu Bethesda. Sestavljena je iz kazalnikov nizke in visoke stopnje sprememb. V tem primeru je dekodiranje razmaza predstavljeno z naslednjimi podatki:

• NILM – normalni epitelij.
• ASCUS – spremenjene celice zaradi displazije, vnetja, spolno prenosljive okužbe ali HPV.
• ASC-H – odkrite so bile nepravilnosti v strukturi ploščatega epitelija. Ta rezultat kaže na zgodnje faze onkologije ali hudo displazijo.
• LSIL – v razmazu je prisotnih majhno število spremenjenih celic. Kaže na displazijo ali papilomavirus.
• HSIL – pomembne spremembe v epiteliju. Huda displazija in izrazita onkologija. Če ta rezultat prezremo, potem 7 % bolnikov v 3-5 letih razvije maligno bolezen.
• AGC je atipični žlezni epitelij. Pojavi se pri raku maternice ali displaziji.
• AIS – zgodnje faze onkologije.
• Visokostopenjski SIL – ploščatocelični karcinom.

Hitrost pridobivanja rezultatov razmaza je odvisna od izbrane raziskovalne metode. Praviloma je dekodiranje pripravljeno v 2-3 dneh.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Protitelesa proti humanemu papiloma virusu

Za odkrivanje protiteles proti HPV je indiciran encimski imunološki test krvi. Načelo te študije je določiti prisotnost imunoglobulinov proti povzročitelju okužbe. Diagnostika z metodo ELISA kaže na imunski odziv telesa na virus. Glede na odkrita protitelesa ločimo naslednje stopnje bolezni:

• IgM – akutni.
• IgG – kronično ali obdobje okrevanja.
• IgA – ponovitev kronične okužbe.

Rezultati testa na protitelesa so pripravljeni 1-3 dni po odvzemu. Pri dešifriranju rezultatov je treba upoštevati, da je humani papiloma virus lahko posredna sled, zato se za pojasnitev prisotnosti okužbe izvajajo PCR in drugi testi. Poleg tega ELISA ne ugotavlja genotipa ali tveganja za rakotvornost virusa.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]