Rabdovirusi so povzročitelji stekline in vezikularnega stomatitisa

Steklina je akutna nalezljiva bolezen, ki jo povzroča rabdovirus in se pojavi, ko človeka ugrizne bolna žival ali ko slina bolne živali pride v stik s poškodovano kožo ali sluznico. Ta okužba osrednjega živčnega sistema je skoraj vedno smrtna.

Prve omembe bolezni, ki se prenaša s pasjim ugrizom in je po opisu zelo podobna steklini, najdemo v klinastih glinenih tablicah iz starodavne Mezopotamije, ki segajo v 3. tisočletje pred našim štetjem. Virus je leta 1882 izoliral in oslabil I. Pasteur s pasažami na možganih zajca.

Vezikularni stomatitis – bolezen konj, goveda in prašičev, včasih tudi ljudi, ki poteka benigno – prav tako povzroča rabdovirus. Ta virus je za ljudi šibko patogen. Raziskan je bil bolje kot vsi rabdovirusi.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Življenjski cikel

Rabdovirusi so družina, ki vključuje tri rodove: Vesikulovirus (10 sesalskih virusov, tipičen je virus vezikularnega stomatitisa ali VSV); yssavirus (6 serološko sorodnih virusov, tipičen je virus stekline); Sigmavirus (edini predstavnik je virus sigma-Drosophila). Šest virusov, ki povzročajo bolezni rib, in 13 virusov, ki prizadenejo rastline, ostaja nerazvrščenih. Za rabdoviruse je značilen virion v obliki palice ali krogle: dolg 60–400 nm in širok 60–85 nm. Delce obdaja dvoslojna lipidna membrana, podobna membrani, s štrlečimi konicami, dolgimi 10 nm in širokimi 3 nm. Pod membrano je ribonukleokapsida s spiralno simetrijo, na kateri so pod elektronskim mikroskopom vidne proge. Genom rabdovirusov predstavlja negativna enoverižna linearna nefragmentirana molekula RNA z molekulsko maso 3,8 MDa; Najdenih je bilo pet genov, ki kodirajo sintezo strukturnih beljakovin, in določen je bil vrstni red njihove razporeditve. Na 3'-koncu je gen nukleokapsidnega proteina N (50 kDa). Sledi mu gen proteina NSV (30 kDa), ene od komponent virusne transkriptaze, ki je del nukleokapside. Naslednji gen kodira matrični protein M (30 kDa), ki od znotraj obdaja dvoslojno lipidno membrano. Sledi gen proteina G (65 kDa), zunanjega glikoproteina virusne superkapside. Na 5'-koncu je gen visokomolekularne komponente virusne transkriptaze, proteina L (160 kDa).

Interakcija rabdovirusov s celicami in njihovo razmnoževanje potekata po naslednji shemi: adsorpcija virusa na celico (glikoprotein G) - prodiranje v celico z endocitozo - fuzija z lizosomsko membrano - deproteinizacija virusa. Pod delovanjem virionske transkriptaze (RNA polimeraze) nastane cRNA, ki služi kot matrica za sintezo vRNA in opravlja funkcijo mRNA. Nato se na ribosomih gostiteljske celice sintetizirajo virusno specifični proteini. Proteini M in G sta vgrajeni v plazemsko membrano. Nukleokapsida, ki nastane med interakcijo vRNA z proteini N, L in NS, ki prehaja skozi membrano, je obdana s superkapsido. Zreli virion se od celice loči z brstenjem.

Virus stekline je po svoji strukturi in značilnostih znotrajcelične reprodukcije zelo podoben virusu vezikularnega stomatitisa. Pomembna značilnost teh virusov je izrazito zaviranje procesov biosinteze beljakovin v gostiteljski celici z blokiranjem začetka prevajanja. Obstaja več serovariant virusov vezikularnega stomatitisa, ki se razlikujejo po G-proteinu, ki je tudi zaščitni antigen.

Virusi se dobro razmnožujejo v piščančjih zarodkih, celicah ledvic novorojenih hrčkov in v človeških diploidnih celičnih kulturah. V celičnih kulturah virus vezikularnega stomatitisa običajno povzroča citopatogenezo in celično smrt, včasih pa tudi simplastogenezo.

Virus stekline ima širok spekter gostiteljev. Vse toplokrvne živali so nanj občutljive. Stopnja patogenosti različnih sevov virusov stekline za različne živali ni enaka. Pri nekaterih vrstah netopirjev se je virus prilagodil le na žleze slinavke, ne da bi povzročil znake bolezni; okužba drugih živali vedno povzroči smrt.

Sevi virusov stekline, ki krožijo v naravi med živalmi, se imenujejo ulični sevi. Povzročajo bolezni s precej dolgo inkubacijsko dobo in običajno tvorijo specifična inkluzijska telesca v citoplazmi celic. Okužene živali lahko doživijo dolgo obdobje vznemirjenosti in agresivnosti. Virus lahko prodre v žleze slinavke in osrednji živčni sistem. Zaporedni prehodi v možganih kuncev vodijo do nastanka fiksnega virusa, ki se ne more naprej razmnoževati v nobeni celici razen v živčnih celicah. Fiksirani virus se hitro razmnožuje, inkubacijska doba je kratka, inkluzije v celicah se redko najdejo. Ta virus je patogen samo za kunce.

Virus stekline v zunanjem okolju ni zelo stabilen, hitro se inaktivira, če je izpostavljen ultravijoličnim žarkom ali sončni svetlobi. Pri kuhanju umre po 2 minutah, pri 60 °C pa po 5 minutah. Hitro ga inaktivirajo raztopine lizola, kloramina, fenola, maščobnih topil in tripsina. V živalskih truplih, zlasti pri nizkih temperaturah, preživi do 4 mesece.

Imunost

Ker je steklina smrtna, imunost po okužbi ni bila preučena. Ugotovljeno je bilo, da se protitelesa lahko tvorijo med boleznijo in po cepljenju. Imunost po cepljenju traja do 1 leta.

Epidemiologija stekline

Steklina je tipična zoonoza. Glavni vir in rezervoar virusa so divje in domače mesojede živali: psi, mačke, volkovi, šakali, lisice, skunki, mungosi, netopirji. Bolezen se običajno prenaša z ugrizom ali s slinjenjem na poškodovani koži ali sluznicah, saj se virus razmnožuje v slinastih žlezah živali. Bolna žival je kužna ne le med boleznijo, temveč tudi v inkubacijski dobi 2-3 dni, včasih več, preden se pojavijo prvi znaki bolezni.

[ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Simptomi stekline

Primarno razmnoževanje virusa stekline se pojavi v mišičnem tkivu blizu vstopnih vrat, nato pa patogen prodre v receptorje perifernih senzoričnih živcev in preko endoneurija Schwannovih celic ali perinevralnih prostorov vstopi v centralni živčni sistem. Tam se virus razmnožuje v nevronih hipokampusa, podolgovate hrbtenjače, možganskih živcev in simpatičnih ganglijev, kar povzroča vnetne, distrofične in nekrotične spremembe v živčnem sistemu. V tem obdobju se virus razmnožuje tudi v celicah žlez slinavk.

Najkrajša inkubacijska doba je pri ugrizih v glavo in roke, daljša - pri ugrizih v spodnje okončine; na splošno se giblje od 8 do 90 dni. V razvoju bolezni ločimo tri faze: predhodniki (depresija), vznemirjenost, paraliza. Sprva se pojavijo tesnoba, strah, tesnoba, neprijetni občutki na območju ugriza. Po 1-3 dneh se pojavijo izrazito vznemirjenje, krči dihalnih in požirajočih mišic, pojavi se izrazita hidrofobija (hidrofobija je drugo ime za to bolezen). Za to obdobje so značilne agresija, slušne in vidne halucinacije. Nato se razvije paraliza, po 5-7 dneh od začetka bolezni pa nastopi smrt zaradi paralize srčnega ali dihalnega centra.

Laboratorijska diagnostika stekline

Steklino diagnosticiramo z virusoskopskimi, biološkimi in serološkimi metodami. Možgansko tkivo (možganska skorja in mali možgani, Ammonov rog, podolgovata hrbtenjača) in tkivo slinavk se pregledajo v histoloških rezinah ali razmazih poginulih živali in ljudi. V piramidnih celicah možganskega tkiva najdemo specifične eozinofilne vključke (Babesh-Negrijeva telesca). Nahajajo se v citoplazmi blizu jedra in so skupki virusnih nukleokapsid. Njihov pojav je posledica težkega zorenja virionov v živčnih celicah. Babesh-Negrijeva telesca se odkrijejo s posebnimi metodami barvanja (Romanovsky-Giemsa, Mann, Turevich, Muromtsev itd.). Imajo značilno zrnato strukturo z bazofilnimi granulami na acidofilnem ozadju, njihova velikost je 4-10 μm. Pomanjkljivost te metode je, da jo je mogoče uporabiti šele po smrti osebe ali živali.

Virusni antigen je mogoče v istih pripravkih odkriti z uporabo direktne ali indirektne imunofluorescenčne reakcije.

Virus stekline lahko izoliramo iz sline bolnih ljudi ali živali, pa tudi iz svežega obdukcijskega materiala (možgansko tkivo, tkivo submandibularnih slinčnih žlez) z intracerebralno okužbo belih miši in kuncev ali hrčkov - intramuskularno. Živali razvijejo paralizo, ki ji sledi smrt. Možgane poginule živali je treba pregledati, da se z imunofluorescenčno reakcijo odkrijejo Babes-Negrijeva telesca ali virusni antigen.

Protitelesa je mogoče pri cepljenih posameznikih odkriti z nevtralizacijo, fiksacijo komplementa, imunofluorescenco in imunosorbentnimi reakcijami (RIM in IFM).

Specifično preprečevanje in zdravljenje stekline

Preprečevanje stekline obsega boj proti steklini pri živalih in preprečevanje razvoja bolezni pri ljudeh, ki jih je ugriznila ali polizala bolna žival. Program za izkoreninjenje stekline pri kopenskih živalih je treba obravnavati z dveh vidikov:

1. izkoreninjenje stekline pri urbanih psih in
2. izboljšanje naravnih žarišč okužbe s steklino.

Izkušnje mnogih držav prepričljivo dokazujejo možnost nadzora nad urbanimi epizootijami z registracijo in imunizacijo psov. Vendar pa je za popolno odpravo okužbe s steklino potrebno izboljšati njena naravna žarišča, iztrebljanje divjih mesojedcev pa daje le začasen in lokalni rezultat ter ogroža razvoj neželenih okoljskih posledic. V tujini že obstajajo velike pozitivne izkušnje s preprečevanjem stekline med divjimi živalmi (lisice, rakuni) s hranjenjem z vabami, ki vsebujejo cepivo. Peroralna cepiva proti steklini veljajo v tem pogledu za zelo obetavna: živo modificirano cepivo s celimi virioni iz oslabljenih sevov cepiva (SAD-Bern, Vnukovo-32) in rekombinantno gensko spremenjeno peroralno cepivo, ki uporablja virus vakcinije kot vektor in izraža gen G-proteina virusa stekline.

V primeru ugrizov ali slinjenja je treba rano ali kožo na mestu stika sline temeljito umiti z milnico, rano kavterizirati z alkoholno raztopino joda in začeti specifično profilakso s cepivom proti steklini in gama globulinom proti steklini. Namesto prej uporabljenega visoko reaktogenega Fermijevega cepiva (iz možganskega tkiva ovac, okuženih s fiksnim virusom) se za preprečevanje bolezni zdaj priporoča inaktivirano kulturno cepivo proti steklini, ki se izdela na celični kulturi, okuženi z oslabljenim virusom stekline (sev Vnukovo-32). Nujno terapevtsko in profilaktično cepljenje se izvaja s cepivom ali cepivom v kombinaciji z gama globulinom proti steklini po shemah, navedenih v navodilih za njihovo uporabo. Shema cepljenja je določena glede na resnost ugriza, njegovo lokalizacijo, čas, ki je pretekel od ugriza, podatke o živali, ki je ugriznila, in druge okoliščine.