Vzroki za tuberkulozo

Družina Mycobacteriaceae reda Actinomycetales vsebuje en sam rod Mycobacterium. Leta 1975 je ta rod štel približno 30 vrst, in do leta 2000 je bilo to število blizu 100. Večina vrst mikobakterij je razvrščena kot mikroorganizmi saprofitov, ki so v okolju zelo razširjeni.

Skupina obveznih parazitov je zanemarljiva, vendar je njen praktični pomen velik in ga določajo vrste, ki povzročajo tuberkulozo pri ljudeh in živalih. Obstaja mnenje, da so bili predniki človeških patogenih mikobakterij sorodne mikobakterije v tleh.

[1], [2], [3], [4],

Taksonomija mikobakterij

Vse mikobakterije so razdeljene na patogene za ljudi in pogojno patogene.

V klinični mikrobiologiji se uporabljajo številni pristopi za razvrstitev mikobakterij:

• s hitrostjo in optimalno temperaturo rasti, sposobnostjo oblikovanja pigmenta;
• na klinično pomembnih kompleksih.

Tuberkulozne vrste mikobakterij se združijo v kompleks M. Tuberculosis, vključno z M. Tuberculosis, M. Bovis. M. Bovis BCG, M. Africanum, M. Microti, M. Canettii. V zadnjem času so mu dodeljeni M. Pinnipedii, M. Sargae, filogenetski povezani z M. Microti in M. Bovis.

Preostale mikobakterije, ki povzročajo različno mikobakterije, so razvrščene kot netkotične mikobakterije. Iz te skupine so razločeni naslednji kompleksi: M. Avium, ki ga sestavljajo M. Avium, M. Intracellulare, M. Scrofulaceum; M.fortuitum, vključno podvrste M.fortuitum in M. Chelonae ter M. Terrae, vključno z M. Terrae, M. Triviale in M. Nonchromogenicum. Najpomembnejše skupine so vzročni dejavniki gripe M. Leprae, kot tudi povzročitelji razjed ulničarnih lezij Buruli M. Ulcerans.

Ta razvrstitev združuje vrste mikobakterij z enakim kliničnim pomenom, kadar je njihova diferenciacija manj pomembna. Biološke, biokemijske in molekularne metode se uporabljajo za identifikacijo vrst znotraj skupin in kompleksov.

Razvrstitev netuberkuloznih mikobakterij na podlagi kulturnih razlik je razvila Runion leta 1959. Po njenem mnenju. 4 skupine mikobakterij so izolirane.

Skupina I - fotohromogene mikobakterije

Ta skupina vključuje mikobakterije, ki niso pigmentirane, ko rastejo v temi, vendar po izpostavitvi svetlobi pridobijo svetlo rumeno ali rumeno-oranžno pigmentacijo. Potencialno patogeni sevi, ki spadajo v to skupino. - M. Asiaticum, M. Kansasii, M. Marinum, M. Simiae. Med mikobakterijami te skupine so tako hitro rastoče (M. Marinum) in počasi rastejo (M. Asiaticum, M. Kansasii). Optimalna temperatura rasti v območju od 25 ^do C M. Simiae, 32-33 ^o C za M. Marinum 37 do ^okoli ° C M. Asiaticum.

Največji klinični pomen v naši državi je oblika M. Kansasii, ki se nahaja v vodnih telesih. Sindrom M. Kansasii (M. Luciflavum) povzroča bolezen pri ljudeh. Jajčni medij raste kot grobo ali gladko kolonij 37 temperaturni optimum ^za S. Morfološko bakterij zmerne dolžine. Do sedaj so opisane dve različici M. Kansasii: oranžno in belo. Z uvedbo morskih prašičkov M. Kansasii povzročajo infiltrate in zgoščevanje regionalnih bezgavk.

Skupina II - skotohromogene mikobakterije (iz grške besede scotos - tema)

V to skupino spadajo mikobakterije, ki tvorijo pigment v temi. Stopnja rasti je 30-60 dni. Ta skupina vključuje M. Aquae (M. Gordonae) in M. Scrofulaceum.

M. Scrofulaceum se nanaša na potencialno patogene vrste. Na jajčnem mediju bakterije te vrste rastejo v obliki gladkih ali grobih oranžnih kolonij. Morfološko so mikobakterije paličaste, kratke ali dolge. Rastejo pri temperaturi 25-37 ^o C. Otroci so prizadeti zaradi bezgavk in pljuč.

M. Aquae (M. Gordonae) se imenuje saprofitična scotohromogena mikobakterija. Na jajčnem mediju rastejo kot oranžne kolonije pri temperaturi 25-37 ° C Morfološko je mikobakterija paličasto in zmerno dolga (> 5 μm). Najdeno je v rezervoarjih.

III. Skupina - nefotohromogene mikobakterije

V to skupino spadajo mikobakterije, ki ne tvorijo pigmenta ali imajo svetlo rumeno barvo, ki je ne izboljša svetloba. Rastejo 2-3 ali 5-6 tednov. Za njih nosijo. M. Avium, M. Intracellulare, M. Xenopi, M. Terrae, M. Gastri, M. Hattey, M. Bruiiense.

M. Avium (Mycobacterium ptičja vrsta) rastejo na Lowenstein-Jensen mediju kot pigmentiran ali slabopigmentirovannyh kolonij pri 37 ^do C 45 in ^od S. Morfološko - palico, ki ima povprečno dolžino. Lahko so patogeni za ljudi in številne laboratorijske živali ter domače živali (npr. Prašiče). Najdeno je v vodi in v tleh.

M. Xenopi je ločen od žabe. Mlade kulture rastejo v obliki nepigmentiranih kolonij. Kasneje se pojavi rumeni pigment. Morfološko, dolge navojne palice. Gojimo pri temperaturi 40-45 ^o C. Pogojno patogeni za ljudi.

M. Tera je bil najprej izoliran iz redkev. Rastejo na mediju Levenstein-Jensen in obliki kolonij brez pigmentov. Optimalna rast je 37 ^o C. Morfološko so predstavljena s srednje dolgimi palicami, saprofiti.

Skupina IV - hitro rastoče mikobakterije

Za mikobakterije, ki spadajo v to skupino, je značilna hitra rast (do 7-10 dni). Gojijo v obliki pigmentnih ali pigmentnih kolonij, pogosto v obliki R-oblike. Dobro rast dovoljena za 2-5 dni pri 25 ^o C. V tej skupini so potencialno patogene mikobakterije M.fortuitum in saprofitske mikobakterije, kot so M. Phlei, M. Smegmatis, in drugi. M. Fortuitum daje vidno rast na jajcu med 2. In 4. Dnem v obliki "rozete". Morfološko so mikobakterije predstavljene s kratkimi palicami. Na mediju Lowenstein-Jensen lahko absorbirajo zelene malate in so zelene barve. Razširjena v naravi.

Klasifikacija Runyon se je izkazala kot zelo primerna za identifikacijo najpogostejših vrst mikobakterij. Vendar pa ugotavljanje novih vrst in pojav naraščajočega števila vmesnih oblik mikobakterij povzroča težave pri njihovi registraciji v določeni skupini Runion.

M. Tuberculosis je mlada evolucijska tvorba. V zadnjem času je prišlo do nagnjenja k razdeli M. Tuberculosis v skupine ali družine. Najpomembnejši so sevi, ki pripadajo pekinškim družinam, za katere je značilno klonsko vedenje in sposobnost povzročanja mikrotubov tuberkuloze.

Morfologija mikobakterij

Mycobacteria - tanke paličaste celice z značilno lastnostjo kisline in alkoholne rezistence (v eni od stopenj rasti), aerobne. Barvanje grama je slabo gram-pozitivno. Mikobakterije so nepremične, ne tvorijo spor. Konidija ali kapsule so odsotne. Počasi ali zelo počasi rastejo na gostih hranilnih medijih: pri optimalni temperaturi se vidne kolonije pojavijo po 2-60 dneh. Kolonije roza, oranžna ali rumena, zlasti z rastjo svetlobe. Pigment se ne razprši. Površina kolonij je običajno mat (S-tip) ali groba (R-tipa). Pogosto mikobakterije rastejo v obliki sluznic ali gubanih kolonij. Na tekočih medijih mikobakterije rastejo na površini. Nežen suh film se sčasoma strdi, postane neraven in naguban in pridobi rumenkasto barvo. Juha ostane pregledna in je v prisotnosti detergentov mogoče doseči razpršeno rast. Mikrotubi M. Tuberculosis (t.j. V zgodnjih fazah) tvorijo strukture, ki so podobne snopom - značilnost, ki je povezana z vrvnim faktorjem.

Pri obarjanju s karboličnim fuchsinom se miokobakterijska tuberkuloza razkrije kot tanke, rahlo ukrivljene palice s temno rdečo barvo, ki vsebujejo različno število granul.

Dolžina mikobakterij je približno 1-10 μm. širina pa je 0,2-0,7 μm. Včasih je mogoče najti ukrivljene ali zmedene različice. Mikroorganizmi, ki se nahajajo posamezno, v paru ali v skupini, dobro ločijo od modrega ozadja drugih sestavin pripravka. Bakterijske celice so pogosto urejene v obliki rimske številke "V".

Pri pripravi je mogoče zaznati tudi spremenjene oblike, ki so odporne na kokošo, povzročitelja, okrogle sferične ali mikeljne strukture. V tem primeru je treba pozitivni odgovor potrditi z dodatnimi metodami.

Struktura celične stene mikobakterij

Celična stena mikobakterij je najbolj zapletena v primerjavi z ostalimi prokariotami.

Medtem ko imajo gramnegativne bakterije dve membrani, je celična stena mikobakterij sestavljena iz več plasti, od katerih nekateri vsebujejo sladkorje in so značilni relativno konstantni sestavi. Zunanje plasti imajo spremenljivo kemijsko sestavo in jih večinoma predstavljajo lipidi, večinoma mikokolonske kisline in njihovi derivati. Te plasti praviloma niso vidne pri elektronski mikroskopiji. Primarni okvir celične stene so prepleteni peptidoglikani - elektronsko gosti sloj. Plasti arabinogalaktanov ponovijo plast peptidoglikanov, ki tvorijo polisaharidno stromo celične stene. Ima točke za povezavo s peptidoglikanskim slojem in strukturami za določanje mikokolonskih kislin in njihovih derivatov.

Mikolne kisline so prisotne v obliki prostih sulfolipidov in kord-faktorja, katerih prisotnost na celični površini je povezana z značilnim nastankom M kolonij. Tuberkuloze v obliki pasov. Edinstvenost in ključna vloga mikokolonskih kislin v strukturni organizaciji in fiziologiji mikobakterij sta njihova odlična tarča za etiotropno terapijo.

Plastika glikolipidov se imenuje "miokozidi" in se včasih primerja z mikrokapsulo. Mikozidy strukturno in funkcionalno podobne zunanje membrane lipopolisaharidi Gram-negativne bakterije, vendar je njihova pomanjkanje agresivnosti, kljub temu da so toksični in (kabel podoben faktor in sulfolipids) povzročajo nastajanje granulomi.

Celične membrane in sloji celičnih sten prebite kanali ali por med katerimi pore s pasivno kratko življenjsko dobo, ki zagotavlja difuzijske nadzorovanih snovi in kanale z daljšo življenjsko dobo, ki zagotavlja transport hlapnih snovi.

Druga komponenta celične stene mikobakterij je lipoarabinomanan. Sidra je na plazemski membrani, prežema celično steno in se pojavlja na njegovi površini. V zvezi s tem je podoben lipotehojskim kislinam gram-pozitivnih bakterij ali lipopolisaharidnih O-antigenov gram-negativnih bakterij. Terminal fragmenti lipoarabinomannan, predvsem manoza ostanki nespecifično zaviranje aktivacije limfocitov T in levkocitov periferne krvi. To vodi do krvavitve imunskega odziva na mikobakterije.

Variabilnost in oblike mikobakterij

Obstoj bakterij ima poseben patogenetski pomen. Laboratorijski poskusi, izvedeni in vitro in in vivo, so pokazali, da bakterijski pripravki izoniazida in pirazinamida ubijajo mikobakterije le v fazi razmnoževanja. Če so mikobakterije v fazi z nizko metabolične aktivnosti (npr bakterijske rasti "mirujoča" lahko imenujemo skoraj popolnoma ustavila in bakterije), baktericidne droge deluje na njih. To stanje se ponavadi imenuje mirujoče, mikroorganizmi pa se imenujejo persisters. Vztrajniki niso občutljivi na kemoterapijo, npr. Obnašajo kot odporne mikroorganizme. Dejansko lahko ostanejo občutljivi na droge.

Močna spodbuda za prehod mikobakterijskih celic v mirujoče stanje sta kemoterapevtski dejavniki in dejavniki imunskega sistema gostitelja. Persisters lahko preživijo v lezijah za mesece ali celo leta. Med vztrajnostjo se lahko mikobakterije preoblikujejo v L-oblike. V tej obliki mikobakterije kažejo izjemno nizko metabolno aktivnost, ki je namenjena predvsem povečanju debeline celične stene in zunajceličnega matriksa, kar preprečuje preprosto difuzijo snovi. Poleg tega se v mikobakterijah kopiči genski material, kar omogoča povečanje verjetnosti rekonstrukcije normalno delujoče celice pod ugodnimi pogoji. Detekcija L-oblik po standardnih mikrobioloških metodah je težka.

Če mirujoče mikobakterije znova pridobijo metabolizem in se začnejo razmnoževati med kemoterapijo, hitro umrejo. Če je kemoterapija končana, se takšne "oživljene" mikobakterije še naprej množijo in povzročijo ponovitev bolezni. To pojasnjuje veljavnost dolgih smeri kemoterapije in uporabo poznejšega kratkega profilaktičnega zdravljenja. Praviloma sezonskih, tečajev kemoprofilaksa.

Fiziologija mikobakterij

Na področju prokariontov so mikobakterije nedvomno vodilni v sintezi najbolj kompleksnih organskih spojin. Verjetno imajo najbolj fleksibilen metabolizem, ki zagotavlja potrebno variabilnost za preživetje v zunanjem okolju in v makroorganizmu. Do sedaj je bilo opisanih več kot 100 encimskih reakcij, ki kažejo razvejan in kompleksen značaj metabolizma mikobakterij. Za sintezo končnih spojin ali za zagotavljanje potrebne fiziološke funkcije v mikobakterije lahko izvedemo vzporedne poti glede na razpoložljivost substrata, kemično okolje, cikli varnost dihalnih potrebnimi komponentami (kovinskih ionov, parcialnim tlakom kisika, ogljikovega dioksida in drugih.).

Biokemijske lastnosti mikobakterij

[5], [6], [7], [8], [9], [10]

Presnova lipidov

Lipidi celične stene, ki predstavljajo do 60% suhe teže celice, določajo nestandardno naravo tinktarnih, fizioloških in ekoloških lastnosti mikobakterij.

Specifični lipidi mikobakterij so strukturno razdeljeni v 7 glavnih skupin:

1. derivati maščobnih kislin ogljikovih hidratov (večinoma trehaloza - kordni faktor):
2. Mannosidi fosfatidilmiozina:
3. derivati maščobnih kislin peptidov;
4. glikozidi N-acilpeptidov - mikozidi C;
5. estri maščobnih kislin fluorothirolov;
6. mikozidi A, B. G;
7. Mikoli glicerina.

Lipidi iz skupin 4-6 najdemo samo pri mikobakterijah.

Med edinstvenimi, je treba opozoriti tuberkulostearic in tuberculopalmitic kisline, ki so predhodniki miokolicnih kislin.

Mikolovska kislina - skupina visoko molekularnih maščobnih kislin z dolžino verige do 84 ogljikovih atomov, strukturo glavne verige določi sistematičen položaj mikroorganizma in pogoji njegove rasti. Njihova nizka reaktivnost zagotavlja visoko kemijsko stabilnost celične stene mikobakterije. Mikolata potisne encimsko cepitev celične stene in reakcije prostih radikalov.

Kordni faktor se pripisuje prvi skupini lipidov. Povezan je z visoko toksičnostjo mikobakterij in virulence.

Površinsko aktivni lipidi ali sulfolipidi imajo pomembno vlogo pri znotrajceličnem prilagajanju mikobakterij. Skupaj s kordnim faktorjem tvorijo citotoksične membrane -otropne komplekse.

Lipoarabinomannan je heterogena mešanica z visoko molekulsko lipopolisaharid: razvejanih polimerov, arabinozo in manoze derivatov diatsilglitserinovymi tuberkulostearinovoy in palmitinske kisline.

Mikozidi C so peptidoglikolipidi. Ki tvorijo zunanjo lupino mikobakterij, ki jo lahko opazujemo z elektronsko mikroskopijo v obliki prozorne cone na obodu celic. Mikozidi so spojine, specifične za vrsto. Antigenske lastnosti mikobakterij so odvisne od njihovega tipa.

Kvantitativna in kvalitativna sestava lipidnih spojin mikobakterij je dinamična in je odvisna od starosti celic, sestave hranilnih snovi in fizikalno-kemijskih lastnosti okolja. Mlade celice mikobakterij začnejo oblikovati celično steno iz sinteze lipopolisaharidov s relativno kratkimi alifatskimi verigami. Na tej stopnji so zelo ranljivi in dostopni imunskemu sistemu. Z rastjo celične stene in nastankom visokomolekularnih lipidov mikobakterije pridobijo stabilnost in indiferentnost v odnosu do imunskega sistema.

Presnova ogljikovih hidratov

Najbolj priljubljen vir ogljika za mikobakterije je glicerol.

Najpomembnejši ogljikovi hidrati so arabinoza. Manoze in maltoze - predstavljajo več kot polovico vseh saharidov. Poleg tega v življenju celic igrajo vlogo trehaloze, glukoze, fruktoze, galaktoze, ramnoze in nekaterih drugih saharidov. Obenem sinteza poteka po hidrolaznih in aldolaznih poteh. Piruvatalna pot se uporablja za sintezo glikogena. Arabinoza in manoza sta vključena v nastanek pomembnih strukturnih spojin. Za pridobivanje energije se uporablja pentozna fosfatna pot oksidacije glukoze. Zagotavljajo ga malat, izocitrat in sukcinat dehidrogenaze, kar daje prožnost dihalnemu sistemu.

Glioksilatna pot je edinstvena, katere mikobakterije se uporabljajo za vključitev prostih maščobnih kislin v ciklični ciklični kislini, ki se kopičijo med rastjo mikobakterije. Ta krog privlači pozornost raziskovalcev kot možen mehanizem za kemotaksijo mikobakterij med vztrajnostjo.

Presnova dušika in aminokislin

Stopnja uporabe mikrotobakterij nitratov, nitritov, hidroksilaminov lahko služi za identifikacijo vrst. Kot vir dušika mikobakterije raje uporabljajo asparagin. Sinteza aminokislin je hlapljiv proces in je zagotovljena s skupino encimov, ki omogočajo uporabo drugih aminokislinskih spojin, na primer glutamata.

Aktivnost nitrita in nitratne reduktaze

Mycobacterium tuberculosis lahko tvorita adenozin trifosfata (ATP) pri prenosu prenos verige elektronov zaključku NO ₃ -, vendar ne O ₂ V tej reakciji se pojavi rekonstitucijo NO ₃ do NH ₃ v količinah, ki so potrebne za sintezo aminokislin, purina in pirimidinskih baz. To poteka z zaporednim delovanjem nitratnih in nitritnih reduktaz.

Katalaza in peroksidazna aktivnost

Katalaza preprečuje kopičenje vodikovega peroksida, ki se tvori med aerobno oksidacijo rekonstituiranih flavoproteinov. Aktivnost encimov je odvisna od pH medija in temperature. Katalaza pri temperaturi 56 ° C ni aktivna. Obstajajo testi za pripadnost patogenomu kompleksu mikobakterij, ki temelji na toplotni stabilnosti katalaze.

Znano je, da 70% sevov miokobakterije tuberkuloze, odpornih proti izoniazidu, izgubijo aktivnost katalaze in peroksidaze.

Aktivnost peroksidaze in katalaze izvaja isti encimski kompleks.

[11], [12], [13], [14], [15]

Vitamini in koencimi

Struktura M. Tuberculosis vključujejo vitamine B (riboflavin, piridoksin. Cianokobalamin, tiamin), vitamin C in K. P-aminobenzojske kisline in pantotensko nikotinsko kislino, biotin in folno kislino.

Presnova, prehrana in dihanje mikobakterij

V običajnih, ugodnih pogojih, mikobakterijski tuberkulozi - strogi aerobi in mezofili, npr. Rastejo v prisotnosti kisika in pri temperaturi v območju od 30-42 ^o C, prednostno pri 37 ° C ^za S. Pod okoljsko neugodnih pogojih, in (ali) kisik pomanjkljivost Mycobacterium tuberculosis se kaže kot microaerophiles in celo anaerobov. Obenem se njihova metabolizem znatno spremeni.

Pri porabi kisika in razvoju oksidaznih sistemov so mikobakterije podobne resničnim glivam. Kot povezavo med NADH-dehidrogenaze in citokrom b v sistemu za prenos iz rodu Mycobacterium je vitamin K ₉. Ta sistem citokromov je podoben mitohondrijskemu sistemu. Je občutljiv na dinitrofenol, pa tudi v višjih organizmih.

Tip dihanja, ki je opisan, ni edini vir nastanka ATP. Poleg O ₂ -terminal. Mycobacteria lahko uporablja dihalne verige, ki nosijo elektrone in končajo v nitratih (NO ₃ ^- ). Rezerva dihalnega sistema mikobakterij je glioksilatni cikel.

Anoksično (endogeno) dihanje, ki se kaže v atmosferi s koncentracijo kisika manj kot 1%, spodbuja azidne spojine, ki zmanjšujejo oksidacijo piruvata ali trehaloze.

Rast in razmnoževanje mikobakterij

Mycobacterium tuberculosis se zelo počasi vzreja: obdobje podvojitve je 18-24 ur (pogoste bakterije se razdelijo vsakih 15 minut). Zato je za doseganje vidne rasti značilnih kolonij traja najmanj 4-6 tednov. Eden od razlogov za počasno razmnoževanje mikobakterij je njihova izrazita hidrofobnost, zaradi česar je otežena difuzija hranil. Večja je verjetnost, da je to genetsko določena in je povezana z bolj zapleteno napravo mikobakterij. Znano je, na primer, da ima večina bakterij več kopij operon ribonuklealne ribonukleinske kisline (rRNA). Počasi rastoče mikobakterije (M. Tuberculosis, M. Leprae) imajo eno kopijo operona, hitro rastoče (M. Smegmatis) pa imajo le dva izvoda.

Pri gojenju na tekočih medijih mikobakterije rastejo na površini. Nežen suh film se končno zgosti, postane nervozen in dobi rumenkasto vezavo, pogosto v primerjavi z barvo slonovine. Soda ostane pregledna in je mogoče doseči razpršeno rast le v prisotnosti detergentov, na primer Tween-80. V mikrokolonijah (tj. V zgodnjih fazah) nastanejo strukture, ki so podobne snopom, znak, ki je povezan s kondicionirnim faktorjem M. Tuberculosis.

Genetika mikobakterij

Rod mikobakterij je zelo raznolik od genetskega vidika. Za razliko od mnogih saprofitov in netuberkuloznih mikobakterij, miokobakterija tuberkuloza ne vsebuje ekstrahromosomskih vključkov (na primer plazmidov). Celoten razpon lastnosti mikobakterijske tuberkuloze določa njen kromosom.

Genom kompleksa M. Tuberculosis je izredno konservativen. Njegovi predstavniki imajo homologijo DNA 85-100%. Medtem ko je DNA drugih mikobakterijskih vrst homologna M. Tuberculosis za samo 4-26%.

Predstavniki rodu Mycobacterium imajo velike genome v primerjavi z drugimi prokariotami - 3.1-4.5x10 ⁹ Da. Vendar so genomi patogenih vrst manj kot pri drugih mikobakterij (pri M. Tuberculosis - 2,5x10 ⁹ Da). Klasični povzročitelj človeške tuberkuloze, M. Tuberculosis, ima več genov kot M. Africanum in M. Bovis, ki sta med razvojem izgubili nekaj genetskega materiala.

Leta 1998 je bila objavljena nukleotidna sekvenca kromosoma seva H37Rv M. Tuberculosis. Njegova dolžina je 4 411529 baznih parov. Kromosomska Mycobacterium tuberculosis je obročasta struktura. Vsebuje približno 4000 genov, ki kodirajo proteine, in 60. Kodirne funkcionalne komponente RNK: edinstveni ribozomski RNA operon, 10Sa RNA. Vključeni v degradacijo beljakovin z atipično matrično RNA. 45 transportna RNA (tRNA), več kot 90 lipoproteinov.

Več kot 20% genoma je zasedeno genov metabolizem celične stene in maščobne kisline, vključno mycolic kislin, bogatih z glicinom kislem polipeptid (družine PE in PPE), kodiranega polimorfnih rastnih regulatorjev genomskih odsekov (Polimorfna GC bogate dobesedno sekvence) in MPTR (major polimorfna tandem ponovitev) (peti in četrti obroči genomske kromosomske karte). Variabilnost teh delov genom zagotavlja razlike v antigenih in sposobnost zaviranja imunskega odziva. Geni, ki nadzorujejo virulentne faktorje, so široko zastopani v genomu mikobakterijske tuberkuloze.

Mycobacterium tuberculosis sintetizira vse sestavine, potrebne za presnovo: esencialne aminokisline, vitamine, encime in kofaktorje. V primerjavi z drugimi vrstami bakterije se je povečala aktivnost encimov lipogeneze pri M. Tuberculosis. Dva gena kodiraju hemoglobin podobne beljakovine, ki igrajo vlogo antioksidativnih ščitnikov ali pasti odvečnega celičnega kisika. Te značilnosti prispevajo k hitri prilagoditvi mikobakterijske tuberkuloze na nenadne spremembe v okoljskih pogojih.

Posebnost genoma kompleksa M. Tuberculosis je veliko število ponavljajočih sekvenc DNA. Torej. V kromosomu M. Tuberculosis H37Rv je do 56 kopij IS-elementov (vstavitvenih zaporedij), ki zagotavljajo polimorfizem DNA mikobakterijske tuberkuloze. Večina jih. Razen za element IS6110. So nespremenjene. Praviloma je od 5 do 20 izvodov IS6110 prisotnih v kromosomu različnih sevov mikobakterijske tuberkuloze, vendar najdemo sevov, ki nimajo tega elementa. Skupaj s-elementov gen vsebuje več vrst kratkih nukleotidnih ponovitev (rastnih regulatorjev in MPTR), kot tudi direktne ponovitve DR (direktni ponovitvi), ki se nahajajo na terenu DR in ločenih zaporedij variabilnih - distančniki (šesti obročnih na kromosomu zemljevidu). Razlike v številu kopij in lokalizacija na kromosomu teh genetskih elementov se uporabljajo za razlikovanje sevov mycobacterium tuberculosis v molekularni epidemiologiji. Najbolj popoln genotipizacijski programi za mikobakterije temeljijo na odkrivanju genomskega polimorfizma, ki ga povzroča element IS6110, kot tudi DR in njihovih distančnikov. Značilno je, da se razhajanje M. Tuberculosis pojavi praviloma zaradi rekombinacij med kopijami elementa IS6110. Ki obkrožajo različne gene.

V genomu H37Rv najdemo dve prophages - phiRv1 in phiRv2. Tako kot polimorfno Dralovo mesto so. Verjetno povezana s patogenostjo dejavniki, kot so ti odseki genom razlikuje od analognih mest Nevirulentne sevov M. Tuberculosis H37Ra in M. BOM BCG, določenih predelih genoma (mutt, OGT gene), ki je odgovoren za povečanje pogostosti mutacije in prilagajanje Mycobacterium tuberculosis v pressovyh pogoji. Odkrivanje sprožilec gen Mycobacterium tuberculosis dormantnosti spremenila zamisel latentne infekcije TB.

Študija polimorfizma genov, ki kodirajo katalazo, peroksidazo in A-podenoto DNA-giraze. V kompleksu M. Tuberculosis so izolirali tri genotipske skupine. Najstarejša (z vidika evolucije) skupina I: M. Africanum, M. Bovis. M. Tuberculosis in M. Microti. Skupini II in III vključujeta različne vrste M. Tuberculosis, ki so se razširili v nekaterih geografskih regijah. Klonsko vedenje je značilno za skupine I in II, sevi skupine III pa zelo redko povzročajo množične bolezni. Genetske družine M. Tuberculosis, znane kot Haarlem, so pogoste v različnih regijah sveta. Afrika, Filipino.

Poseben kraj pripada družini Peking, ki je bila najprej ugotovljena pri histoloških pripravah pljučnega tkiva v letih 1956-1990. Od bolnih v predmestju Pekinga. Za danes so sevi te družine v Aziji. Južna Afrika, Karibi, Združene države Amerike. Porazdelitev tega genotipa na različnih ozemljih določajo etnične značilnosti avtohtonega prebivalstva in migrantov. Pred kratkim so pridobljeni podatki o porazdelitvi sevov genotipa SI / Peking v severozahodnem evropskem delu Rusije (Sankt Peterburg) in v regijah Sibirija.

Stabilnost mikobakterij

Med razvojem mikobakterijske tuberkuloze so se razvili različni mehanizmi za premagovanje ali inaktiviranje neželenih okoljskih dejavnikov. Na prvem mestu. To je močna celična stena. Drugič, obstajajo obsežne možnosti presnove. So sposobni inaktivirati številne celične toksine in snovi (različne perokside, aldehide in druge), ki uničujejo celično membrano. Tretjič, to je morfološka plastičnost, ki jo sestavlja preoblikovanje mikobakterij (nastanek L-oblik v mirujočih celicah). S svojo stabilnostjo po bakterijah, ki tvorijo spore, zavzemajo vodilno mesto na področju prokariontov.

Preživetje zadrži sposobnost preživetja v suhem stanju do 3 leta. Ko se Mycobacterium tuberculosis segreje, lahko vzdrži temperature nad 80 ° C. Do danes se domneva, da miokobakterije tuberkuloze, ki so v sputumu, ostanejo sposobne preživeti, ko slednje zavrejo v 5 minutah.

Mycobacterium tuberculosis odporen na organskimi in anorganskimi kislinami, alkalij, veliko oksidativnimi sredstvi, kot tudi na območju antiseptično in dehidracijskih snovi, ki imajo škodljiv učinek na drugih patogenih mikroorganizmov. Mikobakterije so odporne proti alkoholom in acetonu.

Treba je opozoriti, da sestavki, ki temeljijo na kvartarne amonijeve TB ne kažejo aktivnost v določenih pogojih, koncentracija kisikovih radikalov in klora in 0,5% je tudi še katastrofalne učinek na Mycobacterium tuberculosis. To pomeni, da takega sredstva ni mogoče uporabiti za sterilizacijo izpljunka in drugih okuženih bioloških materialov.

Mycobacterium tuberculosis je neobčutljiv na razpršeno sončno svetlobo in obstaja več kot eno leto v zunanjem okolju brez izgube sposobnosti preživetja. Kratkotalasna ultravijolična študija ima univerzalni baktericidni učinek na vse mikroorganizme. Vendar pa se v realnih pogojih, ko se miokobakterija tuberkuloza suspendira v obliki celičnih aglomeratov s prašnimi delci, se povečuje njihova odpornost na ultravijolično sevanje.

Visoka stopnja preživetja mycobacterium tuberculosis prispeva k izjemno širokemu širjenju te okužbe med prebivalstvom, ne glede na podnebne razmere. Vendar to ne prispeva samo k globalizaciji problema - miokobakterija tuberkuloza lahko dolgo časa traja v človeškem telesu in jo je mogoče ponovno aktivirati v neomejenih intervalih.

Lokalizacija Mycobacterium tuberculosis znotraj makrofagov zagotovi zadostno stabilnost substrata, glede na "dolgoživosti" mononuklearnih fagocitov in replikacijo trajanje mikobakterij, kot tudi izolacijo efektorjev za humoralno imunost. Hkrati pa patogen izbere biotop, ki je zaradi potencialne nevarnosti za večino mikroorganizmov nesprejemljiv. To simbiozo zagotavljajo številni prilagoditveni mehanizmi mikobakterij.

Proces okvare makrofaga in parazitizma v njej je videti tako: prodiranje mikobakterij v makrofag brez njenega aktiviranja; zatiranje nastajanja ali preoblikovanja fagolizozoma v območje, ki je prijetno za bakterije; preboj iz fagozomov v citoplazem z inaktivacijo antimikrobnih dejavnikov; motnje v življenju celice; oslabitev občutljivosti makrofagov na aktivacijske signale T-limfocitov; zmanjšanje antigen-predstavitvene funkcije makrofagov in posledično oslabitev reakcij citotoksičnih T-limfocitov, nastavljenih na uničenje okuženih celic.

Nedvomno pri zagotavljanju te pomembne vloge igrajo značilnosti celične stene. Pa tudi metabolne in funkcionalne sposobnosti. Če najprej kontaktiramo z mikroorganizmov Mycobacterium imunski sistem ne more povezati humoralno imunost hitro nevtralizirati in odpravljanje celico iz telesa, saj je premični alifatska veriga mikobakterijske stene ne omogočajo oceniti površinske strukture patogena in posreduje ustrezne informacije, potrebne za sintezo niza protiteles.

Visoka hidrofobnost mikobakterij zagotavlja nespecifično, t.j. Neodvisno od receptorjev, stiki z makrofagi. Oblikuje se okoli fagozoma mikobakterije, makrofag jo postavlja v sebi. Surface mikozidnye in lipoarabinomannanovye kompleksi se lahko priznajo receptorje, vendar teče skozi njih, so signali ne aktivira ali šibko aktivira makrofage. Posledično fagocitozo ne spremlja sproščanje prostih radikalov kisika in dušika. Domneva se, da je v večji meri ta značilnost virulentnih sevov M. Tuberculosis, ki je zaradi strukturnih značilnosti lipoarabinomannan sprožijo "nenasilno" fagocitozo. Pri prepoznavanju M. Tuberculosis sodelujejo tudi drugi makrofagni receptorji, zlasti CD 14 in receptorji komplementa C3 komponente (CR1-CR3).

Ko znotraj makrofaga, Mycobacterium obsega številni mehanizmi, ki preprečujejo fagolizosoma Sestav: proizvodnja amoniaka, ki naalkalimo okolja v phagosome, sulfolipids sintezo, ki vodi do tvorbe negativnim nabojem na površini phagosome. Ki preprečuje fuzijo fagozoma in lizosoma.

Če pa se oblikuje fagolizosoma zaradi močne mikobakterije voščeno lupino mogoče pogasiti prostih radikalov reakcije povzročila fagocitni baktericidno snovi. Amonijev naalkalimo okolja, blokiranjem aktivnosti lizosomalnih encimov in sulfolipids membranotropic nevtraliziramo kationske beljakovine. Poleg tega, Mycobacterium tuberculosis izdelavo visoko aktivnih encimov katalaze in aktivnosti peroksidaze, ki tekmujejo z peroksidazni sistemi makrofagov in hkrati inaktivirajo hidroperoksidi lizosomih Vse to povečuje odpornost mikobakterije za oksidanta stres.

Nadaljnja prilagoditev mikobakterij se nanaša na uporabo makrofagov, ki vsebujejo železo, za njihove encimske sisteme in blokiranje imunospecifičnih funkcij makrofagov. Makrofagi so eden glavnih rezervoarjev železa, katerega presežek se kopiči v obliki feritina. Vsebnost železa v alveolarnih makrofagih je 100-krat večja kot v krvnih monocitih, kar zagotovo prispeva k njihovi kolonizaciji z mikobakterijskimi tuberkulozami.

Toksični učinek na makrofage mikobakterije poteka s pomočjo endotoksinov in nespecifičnih dejavnikov. Tako tisti kot tudi drugi vplivajo predvsem na dihalni sistem makrofagov - mitohondrije. Endotoksini vključujejo mikrofluidne arabinolipide, ki zavirajo dihanje mitohondrije. Za nespecifične toksine spadajo produkti sinteze lipidnega dela celice mikobakterije - ftienske in fitinske kisline, ki povzročajo disociacijo oksidativne fosforilacije. Za intenziviranje metabolnih procesov v teh pogojih ne spremlja ustrezna sinteza ATP. Celice gostiteljice začnejo doživljati energijsko lakoto, kar vodi k zaviranju njihove vitalne aktivnosti in v prihodnosti na citolizo in apoptozo.

Možno je, da se nekateri dejavniki patogenosti tvorijo samo znotraj okuženih celic, kot se pojavljajo pri drugih bakterijah, ki raje intracelularni način življenja. Na primer, salmonela, ki parazitira znotraj makrofagov, dodatno izrazi več kot 30 genov. Kljub popolnemu opisu genoma mikobakterijske tuberkuloze. 30% kodonov je povezanih z beljakovinami z neznanimi lastnostmi.

Odpornost zdravila na mikobakterije

S kliničnega vidika občutljivost mikroorganizma na zdravilo določa možnost uporabe standardne kemoterapije z označenim zdravilom za zdravljenje bolezni, ki jo povzroča izolirani sev. Stabilnost "napoveduje neuspešno zdravljenje s testiranim kemoterapevtskim sredstvom." Z drugimi besedami, uporaba standardne kemoterapije, ki ima za posledico doseganje sistemske koncentracije zdravila, običajno učinkovite v normalnih pogojih, ne preprečuje reprodukcije "odpornih mikroorganizmov".

V mikrobiologiji populacijski pristop temelji na opredelitvi občutljivosti na zdravila ali odpornosti na zdravila, kar pomeni drugačno stopnjo stabilnosti bazena (heterogene populacije) mikrobnih celic. Odpornost zdravila se ocenjuje v kvantitativnih značilnostih, kot je "minimalna inhibitorna koncentracija" (MIC). Na primer z MIK-90 umre 90% mikroorganizmov (bakteriostatična koncentracija). Zato je treba odpornost razumeti kot stopnjo v delu mikrobne populacije, ki v večini primerov predeterminira neuspešnost zdravljenja. Na splošno velja, da ima lahko 10% odpornih sevov med celotno mikrobno populacijo bolnika patogeni učinek. Pri fti-tiobakteriologiji za zdravila prve izbrane antituberkuloze je 1%. Ali 20 enot za oblikovanje kolonije - CFU). Ta del populacije mikroorganizmov v enem mesecu lahko premakne izvirnik in tvori lezijo. Pri sredstvih za preprečevanje tuberkuloze v drugi seriji je merilo stabilnosti 10-odstotno povečanje mikrobne populacije.

Razvoj odpornosti proti zdravilom iz mikroorganizmov, povezanih z izbiro (izbor) v prisotnosti antibiotika in primarni deli preživetje populacije mikroorganizmov, ki imajo obrambni mehanizmi proti protibakterijsko sredstvo. V vsaki populaciji je nepomembno število mutiranih celic (običajno 10 ⁶ -10 ⁹ ), odpornih na to ali drugo zdravilo. Med kemoterapijo umrejo občutljive mikrobne celice, odporne pa se pomnožijo. Posledično se senzorične celice nadomestijo s stabilnimi celicami.

Mikobakterije na začetku imajo visoko naravno odpornost proti številnim antibakterijskim zdravilom širokega spektra delovanja, vendar imajo različne vrste različen spekter in stopnjo te občutljivosti.

Na podlagi prave konstante fizična stabilnost razumeti posebnosti mikroorganizmov, povezanih s pomanjkanjem antibiotika delovanja ciljno ali zaradi nedostopnosti primarni ciljni prepustnost minimalnem celične stene, encimsko inaktivacijo snovi ali drugih mehanizmov.

Pridobljena odpornost je lastnost posameznih sevov, da ostanejo sposobni preživeti pri tistih koncentracijah antibiotikov, ki zavirajo rast glavnega dela mikrobne populacije. Pridobitev odpornosti v vseh primerih je genetsko povzročena: pojav novih genetskih informacij ali sprememba ravni izražanja lastnih genov.

V tem času so odkrili različne molekularne mehanizme odpornosti mikobakterij tuberkuloze:

• inaktivacija antibiotikov (inaktivacija fermentacije), na primer β-laktamazam;
• sprememba cilja delovanja (sprememba prostorske konfiguracije proteina zaradi mutacije ustrezne regije genomov):
• hiperprodukcija tarče, kar vodi do spremembe razmerja ciljnega sredstva do sproščanja dela življenjskih proteinov bakterije;
• aktivno odstranjevanje zdravila iz mikrobne celice (iztok) zaradi vključitve mehanizmov za zaščito pred stresom:
• spremeni parametre prepustnosti zunanjih mikrobnih celičnih struktur, ki blokirajo sposobnost antibiotika, da prodre v notranjost celice;
• Vključitev "presnovnega shunta" (poti za izmenjavo bypass).

Poleg neposrednih učinkov na presnovo mikrobnih celic, veliko antibiotikov (benzilpenicilin. Streptomicin, rifampin) in drugih škodljivih dejavnikov (biocidi imunskega sistema) privede do nastanka spremenjenih oblik mikobakterije (protoplastov, L-oblike). In prenesemo v celice mirujočem stanju: intenzivnost celic zmanjša in izmenjava bakterija postane odporna na antibiotičnega delovanja.

Vsi mehanizmi tvorijo drugačno stopnjo odpornosti in zagotavljajo odpornost na različne koncentracije kemoterapevtskih zdravil, zato pojav bakterije v odpornosti ne spremlja vedno manjša klinična učinkovitost antibiotika. Za oceno učinkovitosti in prognoze zdravljenja je pomembno vedeti stopnjo odpornosti.

Trenutno je za vsak antibiotski zdravnik prve serije določen vsaj en gen in za večino rezervnih pripravkov. Specifične mutacije, ki vodijo k razvoju odpornih variant mikobakterij. Pri širokem razponu odpornosti na zdravila pri mikobakterijah je visoka incidenca mutacij in vivo pomembnejša kot in vitro.

[16], [17], [18], [19], [20], [21], [22], [23], [24], [25],

Vrste odpornosti zdravila na mikobakterije

Razlikovati med primarno in pridobljeno odpornostjo na zdravila. Mikroorganizmi s primarno odpornostjo vključujejo sevove, izolirane od bolnikov, ki niso prejeli specifičnega zdravljenja ali ki so prejeli droge za mesec ali manj. Če je nemogoče razjasniti dejstvo uporabe zdravil proti tuberkulozi, se uporablja izraz "začetni odpor".

Primarna odpornost na zdravilo je zelo klinične in epidemiološke pomena, zato je za njegovo pravilno oceni ne bi smela izvajati nove primere tuberkuloze kemoterapije za mikrobiološke študije diagnostičnega materiala. Pogostost primarnega odpornosti na zdravila je izračunan kot razmerje med številom novo diagnosticiranih bolnikih s tuberkulozo s primarno odpornostjo na število vseh na novo diagnosticiranih bolnikih, ki so prejemali študijsko dovzetnosti drog za zadetek Če odporen sev izoliran od pacienta v ozadju proti TB zdravljenja, opravljena za mesec ali več, je stabilnost glede na pridobljeno. Pogostost primarnega odpornosti na zdravila je značilna za epidemiološko stanje populacije patogenov.

Pridobljena odpornost droga med primerih - rezultat neuspešnega zdravljenja (napačne izbire zdravil, neuspeh način recepcije, znižanih farmacevtskih pripravkov nestabilne oskrbe in slabe kakovosti izdelkov). Ti dejavniki povzročajo zmanjšanje sistemske koncentracije zdravil v krvi in njihovo učinkovitost, hkrati pa "sprožijo" zaščitne celice v mikobakterijskih celicah.

Za epidemiološke namene se izračuna frekvenca predhodno zdravljenih primerov. V ta namen se upoštevajo bolniki, ki so bili zaposleni za ponavljajoče zdravljenje po neuspešnem poteku kemoterapije ali recidiva. Razmerje med številom odpornih kultur mycobacterium tuberculosis se izračuna na število vseh sevov, ki se med letom pregledujejo zaradi prisotnosti odpornosti na zdravila med pacienti te skupine ob registraciji.

V strukturi odpornosti na zdravila se razlikuje mikobakterijska tuberkuloza:

Monosistance - odpornost na eno od protibakterijskih zdravil, občutljivost na druga zdravila je ohranjena. Pri uporabi kompleksne terapije se mono odpornost redko odkrije in. Praviloma streptomicin (v 10-15% primerov pri novorojenčkih).

Odpornost na več vrst zdravila - odpornost na dve ali več zdravil.

Večkratna odpornost na zdravila - odpornost na izoniazid in rifampicin hkrati (ne glede na razpoložljivost odpornosti na druga zdravila). To spremlja praviloma odpornost na streptomicin itd. MDR tuberkuloznih patogenov je danes postal epidemiološko nevaren pojav. Izračuni kažejo, da je odkrivanje patogenov z MDR v več kot 6,6% primerov (pri novih diagnosticiranih bolnikih) potrebna sprememba strategije Nacionalnega programa tuberkuloze. Glede na spremljanje odpornosti na zdravila je pogostost MDR pri novorojenčkih 4 do 15%, med relapsi - 45-55% in med neuspešnimi zdravljenji - do 80%.

Superstabilnost - odpornost na več zdravil v kombinaciji z odpornostjo na fluorokinolone in eno od zdravil za injiciranje (kanamicin, amikacin, capreomycin). Tuberkuloza, ki jo povzročajo sevi z nadnaravnostjo, predstavlja neposredno grožnjo življenju bolnikov, saj druga zdravila proti tuberkulozi iz druge vrstice nimajo izrazitega antibakterijskega učinka. Od leta 2006 je v nekaterih državah nadzorovana porazdelitev sevov mikobakterij s super-stabilnostjo. V tujini je običajno označiti to različico MDR kot XDR.

Navzkrižna odpornost - če pojav odpornosti na posamezno zdravilo pomeni odpornost na druga zdravila. Pri M. Tuberculosis praviloma mutacije, povezane z odpornostjo, niso medsebojno povezane. Razvoj navzkrižne rezistence je posledica podobnosti kemijske strukture nekaterih zdravil proti tuberkulozi. Zlasti pogosto se pojavijo navzkrižni odpornosti znotraj ene skupine zdravil, na primer aminoglikozidov. Za napoved navzkrižne rezistence so potrebne študije o kulturi mikobakterij na genetski ravni v kombinaciji z mikrobiološko študijo odpornosti.

Netuberkusilne mikobakterije

Nenuberkulozne mikobakterije se zelo redko prenašajo od osebe do osebe. Pogostost dodelitve nekaterih njihovih vrst iz materiala pri bolnikih je primerljiva s pogostnostjo teh vrst iz predmetov zunanjega okolja. Viri okužbe so lahko domače živali in ptice, nepredelana živila. Mycobacteria se nahaja v postmortalnem materialu in v mleku goveda.

Po podatkih bakterioloških laboratorijev je bila prevalenca mikobakterij, ki niso bile tuberkuloze, v obdobju 2004-2005 je bila med vsemi mikobakterijami 0,5-6,2% pri novo odkritih bolnikih. Verjetno je lahko frekvenca nekoliko višja, ker metoda, ki se uporablja za obdelavo diagnostičnega materiala, ni optimalna za ne tuberkulozne mikobakterije. Saprofitske mikobakterije so lahko prisotni v diagnostičnega materiala za zbiranje neskladnosti predpisov ali zaradi narave materiala (npr. M. Smegmatis lahko izolirali iz urina bolnikov moškega spola).

V zvezi s tem je pomembno, da večkrat potrdite odkrite vrste mikobakterij iz materiala od pacienta.

Mikobakterije vplivajo na kožo, mehko tkivo in lahko povzročijo tudi miokobakterioze pljuč, kar je pogosto pogosto pri imunsko neoporečnih pogojih. Pri pljučni lokalizaciji se pogosteje odkriva pri starejših moških, katerih zgodovina vključuje kronične bolezni pljuč, vključno s tistimi z glivicnimi lezijami.

Od vseh mikobakterij je kompleks M. Avium-intracellularae najpogostejši povzročitelj pljučne mikobakterijeze pri človeku. Povzroča bolezni pljuč, perifernih bezgavk in razširjenih procesov. Na severu evropske regije je približno 60% mikobakterijeze pljuč. Vlakno-kavernozni in infiltracijski procesi prevladujejo zaradi kroničnega sevanja zaradi visoke odpornosti na zdravila proti tuberkulozi.

M. Kansasii so povzročitelji kronične pljučne bolezni, podobne tuberkulozi. Kemoterapija je bolj učinkovita zaradi večje občutljivosti M. Kansasii na antibakterijska zdravila. M. Xenopi in M. Malmoense povzročajo predvsem kronične pljučne bolezni. Lahko onesnažujejo vodni sistem vroče in hladne vode. Habitat M. Malmoens ni v celoti ugotovljen. M. Xenopi kažejo precej dobro občutljivost na zdravljenje proti tuberkulozi. M. Malmoense kaže dovolj visoko občutljivost na antibiotike in vitro, vendar je konzervativno zdravljenje pogosto neučinkovito do smrti. M. Fortuitum in M. Chelonae sta zaradi neposredne okužbe rane s travmo, kirurškim posegom in penetracijo poškodovani kot povzročitelji bolezni kosti in mehkih tkiv. Povzročajo do 10% mikobakterijeze pljuč. Teče kot kronični, destruktivni, dvostranski poraz, pogosto smrtonosni. Antituberkulozna zdravila in antibiotiki širokega spektra niso aktivni ali niso zelo aktivni proti tem vrstam mikobakterij.

V južnih regijah je bila mikobakterijska koža in mehka tkiva, ki so jih povzročili M. Leprae, M. Ulceranse. Odkrivanje netuberkuloznih mikobakterij poteka v laboratorijih vodilnih anti-tuberkuloznih institucij v državi. To zahteva visoko kvalifikacijo in dobro opremo laboratorijev.