Infekcijska mononukleoza: protitelesa proti virusu Epstein-Barr v krvi

Infekcijska mononukleoza je pogosta sistemska limfoproliferativna bolezen, ki jo najpogosteje povzroča virus Epstein-Barr. Toxoplasma gondii in drugi virusi (CMV, virus humane imunske pomanjkljivosti in človeški herpesvirus tipa 6, prepoznani kot vzrok nenadne eksanteme) lahko povzročijo klinično podobne bolezni. Te iste etiološke snovi verjetno lahko povzročijo razvoj sindroma kronične utrujenosti.

Epstein-Barr virus je virus iz skupine herpes, ima tropizem za B-limfocite, vztrajno ostaja v gostiteljskih celicah kot latentna okužba. Na splošno je razširjen po vsem svetu. Po strukturi in velikosti virus Epstein-Barr ne moremo razlikovati od drugih herpesvirusov, vendar se od njih bistveno razlikuje pri antigenskih lastnostih. Virus ima membranski antigen (MA-membranski antigen), jedrski antigen (nukleinski antigen EBNA-Epstein-Barris) in virusni kapsidni antigen (VCA).

Okužba se pojavi, ko se virus prenaša s slino. Epstein-Barr virus, ko zaužijemo okuži žrela epitelij, ki povzroča vnetje in vročino - tipične klinične znake začela infekcijsko mononukleozo. Strogo limfotropni virusa, ki povezuje S3α receptor celično membrano limfocitov da inducira proliferacijo poliklonskih limfocitov B z ustreznim povečanjem tonzile, sistemski limfadenopatijo in splenomegalijo. B-limfociti so transformirana (pridobi sposobnost neskončnega divizija), in v odsotnosti ustreznega celičnega imunskega odziva, lahko ta proces razvijal očitno maligna (npr X-vezano sindrom limfoproliferativna). Če celični faktorji imunosti nadzorujejo replikacijo virusa Epstein-Barr v telesu, potem klinični simptomi nalezljive mononukleoze postopoma izginejo.

Kot pri drugih herpes virusov, lahko virus Epstein-Barr vztrajajo v latentne infekcije (DNK vsebuje jedro majhno količino limfocitov B). Občasno asimptomatsko reaktivacijo okužbe - pogost pojav, približno 20% zdravih mladih izločajo virus virus Epstein-Barr s slino. Pri osebah z poškodovanim celične imunosti (npr aidsom, ataksija-teleangiektazija, pri presaditvi) lahko razvije jasno reaktivno okužbo s lasaste levkoplakije, intersticijski pnevmonitis, ali v obliki monoklonskega B-celičnega limfoma a. Z virusom Epstein-Barr je povezana etiologija karcinoma nazofaringeusa in Burkittovega limfoma.

Ena od manifestacij infekcijske mononukleoze je pojav periferne krvi atipičnih limfocitov (do 10% celotnega števila limfocitov). Atipične limfocite najdemo v krvi od začetka obdobja kliničnih manifestacij okužbe. Njihova vsebnost v krvi doseže vrh konec 2. Ali začetka 3. Tedna in lahko zadrži na tej ravni do 1.5-2 mesecev, popolno izginotje navadno pride do začetka 4. Meseca od nastanka bolezni. Prisotnost atipičnih limfocitov je relativno neobčutljiv znak okužbe, ki ga povzroča virus Epstein-Barr, vendar ima skupno specifičnost približno 95%.

Širjenje poliklonskih limfocitov B v okužbo z virusom Epstein-Barr povzroča, ustvarja veliko različnih avtoprotiteles pri pacientu, kot IgM anti-I (hladno aglutinin), revmatoidni faktor, protijedrna protitelesa. Večina nenavadnih Igov, ki se pojavljajo pri infekcijski mononukleozi, se imenujejo heterofilna protitelesa Paul-Bunnel. Ta protitelesa spadajo v razred IgM, imajo afiniteto za jagnjetine in konjske rdečih krvnih celic, ki niso usmerjena kateremkoli antigen Epstein-Barr virusa. Heterophilic protitelesa - Naključni izdelki B-limfnega orožja (virus Epstein-Barr povzroča), se pojavijo v prvem tednu infekcijske mononukleoze in med okrevanjem postopoma izginejo, jih običajno ne zazna v 3-6 mesecih.

Ker se začetna akutna stopnja okužb zapira, se genomi Epstein-Barr virusa (edinstveni antigeni) pojavljajo v velikem številu v vseh celicah in jedrski antigen sprosti v okolje. V odgovor na antigen se sintetizirajo specifična protitelesa - dragoceni označevalci stopnje bolezni. Kmalu po okužbi limfocitov B se odkrije zgodnji antigen (EA), protein, potreben za replikacijo virusa Epstein-Barr (in ne strukturne virusne komponente). Za zgodnji antigen v pacientovem telesu se sintetizirajo protitelesa razredov IgM in IgG. Skupaj s polnim virusnim virusom Epstein-Barr se pojavijo antigeni virusnega kapsida (VCA) in membranskega antigena (MA). Ker se okužba nadaljuje, se majhen odstotek B-limfocitov, okuženih z virusom Epstein-Barr, izogne imunskemu uničenju in ohranja virusni genom v latentni obliki. Jedrski antigen (EBNA) virusa Epstein-Barr je odgovoren za njegovo podvajanje in preživetje.

Laboratorijski testi lahko odkrijejo protitelesa proti različnim antigenom.

Od seroloških metod diagnosticiranja infekcijske mononukleoze je najbolj pogosta reakcija Paul-Bunnel (aglutinacija), katere cilj je odkrivanje heterofilnih protiteles v serumu. Titer heterofilnih protiteles 1: 224 in višje v serumu bolnika je prepoznan kot diagnostično pomemben, kar potrjuje diagnozo infekcijske mononukleoze. Heterofilna aglutinacija je pozitivna pri 60% mladih po dveh tednih in 90% po 4 tednih po pojavu kliničnih manifestacij bolezni. Zato je za diagnosticiranje infekcijske mononukleoze potrebno več študij: v prvem tednu bolezni (reakcija je lahko negativna) in 1-2 tedna kasneje (reakcija lahko postane pozitivna). Vsebnost heterofilnih protiteles se po koncu akutnega obdobja infekcijskega postopka zmanjša, vendar se njihov titer lahko določi v 9 mesecih po pojavu kliničnih simptomov. Reakcija Paul-Bunnel se lahko spremeni iz pozitivnega v negativno, tudi v ozadju preostalih hematoloških in kliničnih simptomov pri bolniku. Občutljivost metode pri odraslih je 98%, specifičnost je 99%. Pri otrocih z infekciozno mononukleozo pred starostjo dveh let je mogoče odkriti heterofilna protitelesa le pri 30% bolnikov, pri starosti od 2 do 4 let - v 75%, nad 4 leti - v več kot 90%. Občutljivost metode pri otrocih je manjša od 70%, specifičnost je 20%. Zmanjšanje in nato ponovno povečanje titra heterofilnih protiteles se lahko pojavijo kot odziv na drugo okužbo (najpogosteje pri virusnih okužbah zgornjih dihalnih poti). Odziv Paul-Bunnel ni specifičen za virus Epstein-Barr. Titer heterofilnih protiteles ne daje navzkrižne reakcije in ni v korelaciji s specifičnimi protitelesi proti virusu Epstein-Barr, niti ni v korelaciji z resnostjo tečaja bolezni. Test je neuporaben za diagnosticiranje kronične oblike infektivne mononukleoze (pozitiven v povprečju le pri 10% bolnikov).

Titri 1:56 ali manj so na voljo pri zdravih ljudeh in pri bolnikih z drugimi boleznimi (revmatoidni artritis, rdečkoba). Lažno pozitivni rezultati testa so zelo redko izpolnjeni.

Trenutno za detekcijo protiteles proti ovčjih eritrocitov z uporabo metode "eno mesto" (slide aglutinacije), da se najprej uporablja kot presejalni test. Po občutljivosti je primerljiva s Paul-Bunnelovo reakcijo. Drsni lažno pozitivni reakciji je lahko približno 2% študijah (levkemija, maligni limfom, malarijo, rdečkam, virusni hepatitis, karcinom trebušne slinavke) in lažno-negativnih odraslih - 5-7% primerov.

Treba je opozoriti, da je spekter sistemov diagnostičnih testov, ki jih proizvajajo podjetja, ki temeljijo na določanju titra protiteles, zelo širok, zato se je treba osredotočiti na diagnostični titer protiteles, ki so določeni v navodilih za preskusne sisteme.

Če se heterophile protitelesa niso opredeljene, in klinična slika ustreza infekcijske mononukleoze, je treba preučiti, serum za specifičnih protiteles IgM in IgG. Za odkrivanje specifičnih protiteles proti Epstein-Barr virusa z uporabo posredne metode imunofluorescenčnih (pustimo odkrivanje protiteles proti VCA in EA antigenov) antialexin-imunofluorescence (odkrivanje protiteles EA, VCA in EBNA antigenom) in IFA.

Protitelesa proti komponenti D antigena EA (anti-EA-D) se pojavita tudi v latentnem obdobju primarne okužbe in hitro izginejo z okrevanjem.

Protitelesa proti komponenti R antigena EA (anti-EA-R) se lahko odkrijejo 3-4 tedne po kliničnih manifestacijah bolezni. V krvnem serumu trajajo približno eno leto, pogosto pa se odkrijejo z atipičnimi ali dolgotrajnimi tokovi infekcijske mononukleoze. Ponavadi se ta protitelesa nahajajo pri Burkittovem limfomu.

Protitelesa proti VCA razred IgM (anti-VCA IgM) se pojavijo zelo zgodaj, običajno s kliničnimi simptomi, odkrivajo jih ob začetku bolezni v 100% primerih. Visoki titri se pojavijo na 1-6 teden od nastanka infekcije, začnejo se zmanjševati od tretjega tedna in običajno izginejo po 1-6 mesecih. Anti-VCA IgM je skoraj vedno prisoten v serumu z aktivno okužbo, zato je način njihovega odkrivanja zelo občutljiv in specifičen za akutno epizodo infekcijske mononukleoze.

Protitelesa proti VCA razred IgG (anti-VCA IgG) se lahko pojavijo zgodaj (v 1-4. Tednu), njihova količina doseže vrh do 2. Meseca bolezni. Na začetku bolezni se nahajajo v 100% primerov. Le 20% bolnikov je v študiji parnih serumov pokazalo 4-kratno povečanje titra. Titer se zmanjša pri okrevanju, vendar se nahaja v nekaj letih po prenosu okužbe, zato je za diagnozo infekcijske mononukleoze neuporabna. Prisotnost anti-VCA IgG kaže stanje po okužbi in imunosti.

Protitelesa proti EBNI (anti-EBNA) se pojavijo pozneje kot vsi, so redko prisotni v akutni fazi bolezni. Njihova vsebnost se poveča v obdobju okrevanja (v roku 3-12 mesecev), lahko pa se v krvi vztrajajo več let po bolezni. Pomanjkanje anti-EBNA v prisotnosti anti-VCA IgM in anti-EA IgM kaže trenutno okužbo. Detekcija anti-EBNA po predhodni negativni reakciji kaže na obstoječo okužbo. Pri uporabi metode ELISA lahko hkrati zazna prisotnost anti-EBNA IgM razreda in IgG. Če je količina anti-EBNA IgM večja od anti-EBNA IgG, je treba razmisliti o akutni okužbi, pri čemer je povratni odnos predhoden.

V prid akutne primarne okužbe eden ali več od naslednjih simptomov kaže na prisotnost:

• anti-VCA IgG (odkritje zgodaj, kasneje pa tudi zmanjšanje vsebine);
• Visok titer (več kot 1: 320) ali 4-kratno povečanje titra anti-VCA IgG med potekom bolezni;
• prehodno zvišanje titra anti-EA-D (1:10 ali več);
• zgodnji anti-VCA IgG brez anti-EBNA, in kasneje - pojav anti-EBNA.

Akutna ali primarna okužba z virusom Epstein-Barr povzročil, izključena, če titri anti-VCA IgG in anti-EBNA v serumu ne spreminjajo v času študija (v akutni fazi in predelave).

Konstantna prisotnost zgodnjega antigena in anti-VCA IgG v visokih titrih kaže na kronično fazo okužbe.

Detekcija protiteles proti virusu Epstein-Barr se uporablja za diagnosticiranje infekcijske mononukleoze in kroničnih okužb, ki jih povzroča virus Epstein-Barr.

Protitelesa proti virusom Epstein-Barr se lahko odkrije v naslednjih bolezni: sekundarne imunske pomanjkljivosti, vključno infekcije s HIV, nazofaringealnega karcinoma, Burkittovega limfoma, okužba s CMV, sifilis, lymska bolezen, bruceloza, in drugi.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]