Imunohistokemični markerji pri diagnostiki predrakavih lezij ustne sluznice in rdeče obrobe ustnic

Pravočasna in učinkovita diagnosticiranje neoplastičnih lezij ustne sluznice (CRS) in rdečih ustnic (CCG) ostaja resen problem onkostomatologije. Squamous cell carcinoma ustne votline zavzema šesto mesto na svetu v pogostnosti med malignimi tumorji vseh lokacij. V Ruski federaciji je incidenca malignih novotvorb ustne votline 2-4% skupnega števila malignih tumorjev človeka.

V zadnjih letih je bila struktura bolezni ustne sluznice precej spremenjena, zlasti povečanje deleža predrakavih bolezni. V zvezi s tem je učinkovito neinvazivno odkrivanje znakov malignega ostaja nujna naloga zobozdravstva.

Kljub navidezni preprostosti klinične slikanja napovedovalec sprememb na ustni sluznici in svetovalnega odbora v povezavi z zunanjim lokalizacije, določitev nozokomialne precancer, ki temelji samo na vtis, ki ga je pregled in palpacija, pogosto privede do diagnostičnih napak so bile različne stopnje keratinizacije ali razjede celo markornyh elementi poraz jim oteži razlikovanje. Še posebej težko zgodnje diagnosticiranje malignih obolenj, saj se pojavijo njeni klinični simptomi, malo kasneje pa je dejansko prišlo do maligne transformacije.

Tako je raziskava V.P. Kharchenko et al. Dokazano je, da je več kot 2/3 bolnikov v času zdravljenja v zdravstveni ustanovi in ugotavljanje diagnoze imelo III-IV stadij bolezni. Eden od razlogov za pozno zdravljenje je "zameglitev" klinične slike na začetnih stopnjah bolezni. Poleg tega je bila dokazana potrebo po izvedbi organizacijskega in metodološkega dela ter povečanju znanja zobozdravnikov o zgodnjih kliničnih manifestacijah predrakavih bolezni ustne sluznice. Izvedeno testiranje je pokazalo, da le 42,8% zobozdravnikov razlikuje zgodnje manifestacije oralnega raka, 4,2% anketirancev lahko pravilno izvaja primarne diagnostične ukrepe za odkrivanje raka te lokalizacije.

Odstotek neozdravljivih oblik raka ustne sluznice zaradi diagnostičnih napak, glede na različne avtorje, doseže 58,4-70%. Razmere so zapletene z nerešenimi vprašanji klinične diagnoze predrak, še posebej s težavami diferenciacije nastopa malignosti, pa tudi s problemom izbire metode za zdravljenje pred tumorske bolezni. Absolutnih in relativnih indikacij za biopsijo ni, zlasti na stopnjah konzervativnega zdravljenja. Do danes ni nobenega primera v literaturi o diagnostičnem merilu klinične ravni, na katero bi se lahko zobozdravnik skliceval pri izbiri primerne metode za zdravljenje določene pred tumorske bolezni.

Rešitev diagnostičnih težav večina avtorjev vidi v pomožnih diagnostičnih metodah (citologija, kemilostomatoskopija, biomikroskopija, optična koherentna tomografija). Vendar so te metode precej subjektivne, saj imajo le opisno naravo kvalitativnih sprememb v prizadetih tkivih. Eden od načinov za količinsko opredelitev morfoloških sprememb je določitev imunohistokemičnih markerjev.

Uvajanje v sodobno prakso sodobnih morfoloških metod tumorskih preverjanj je znatno izboljšalo kakovost diagnoze in zdravljenja malignih tumorjev. Metodološke možnosti moderne molekularne onkologije povečal Trenutno uporabljate imunohistokemijske študij lahko ugotovimo, ne le histološko diagnozo tumorja, ampak tudi, da ga morphofunctional značilnosti v smislu agresivnosti in napovedi v zvezi z predrakavih sprememb in raka je že razvila.

Glede na sodobne ideje je osnova maligne transformacije celic aktivacija enojnih ali večceličnih onkogenov ali supresorskih genov. Opazujejo ga pri 30% raka na človeški raki in v mnogih primerih se lahko odkrije imunohistokemično. Raziskali so oncogenes ras p21, HER2 / neu, bcl-2 in supresorski geni p53 in Rb v različnih tumorjih. Nekateri našteti onkogeni (in supresorski geni) so neodvisni prognostični in napovedni znaki.

Epitel v ustni sluznici je lokus praedifectionis nastanka rakavih tumorjev. Zunanji dejavniki (travmatske okluzija mesta, ostri robovi restavracij insolventna ortopedski oblikovanje, neracionalno individualno ustno higieno, vnetnih in destruktivne parodontalne lezije) lahko skupaj z genetskimi (dedno) faktorji igrajo pomembno vlogo pri povzročitvi raka tega lokalizacije. Pri razvoju skvamoznega karcinoma ustne sluznice poškodbe so lahko vključeni v mehanizmih kontrole procesov epitelijska hiperplazija in ploščatocelični metaplazija.

Morfološke značilnosti ustne sluznice epitelija med malignosti, povezane s spremembo niz diferenciacije (fenotipa citokeratina predvsem epitelijske plasti) markerji CEA ekspresijo kot tudi označevalne proliferacijo Ki - 67.

P53 je tumorski supresorski gen, katerega beljakovinski produkt je jedrski transkripcijski faktor s številnimi funkcijami, vključno z blokiranjem prehoda celic skozi celični ciklus in indukcijo apoptoze. Protein p53 je izražen v vseh celicah telesa. V odsotnosti poškodbe genetskega aparata je protein p53 v neaktivnem stanju in ob poškodbi DNA se aktivira DNA. Aktivacija vključuje pridobivanje sposobnost vezave na DNA in aktivira prepisovanje genov, ki vsebujejo regulatorno regijo z nukleotidno sekvenco, ki se imenuje p53-odzivni element. Mutacija p53 v celicah, ki se pojavljajo približno 50% raka, privede do sinteze proteinov z izgubo njegove funkcije, vendar ima visoko stabilnost in akumuliranje v jedru, ki imunohistokemično izraženo v posebnem jedrski obarvanje.

"Divji" tip genija oncosuppressorja wt-53 in proteina p53, ki ga kodira, igrajo osrednjo vlogo pri razvoju apoptoze. Ko je DNA poškodovana, pride do ekspresije gena wt53 in ustreznega proteina. Slednji blokira celični cikel v fazi G1-S in s tem preprečuje nadaljnjo replikacijo poškodovane DNA, ki se sintetizira v fazi S, in ustvarja pogoje za odstranitev poškodovanega mesta in popravilo spremenjenega mesta. Če pride do reparacije, se celica še naprej razdeli in daje generacijo zdravih celic. Če pa se reparacija ne zgodi, so vključeni drugi mehanizmi, ki zagotavljajo uničenje takšne celice s poškodovano (mutageno) DNK, tj. E. Se razvija genetski program celične smrti - apoptoza.
V zadnjih letih je bilo predlagano, da je p53-status lahko odločilni dejavnik, ki določa občutljivost tumorja na kemoterapijo in radioterapijo. Potrditev te predpostavke so številne študije, ki dokazujejo, da je mutiran p53 dejavnik slabe napovedi in neučinkovitosti adjuvantne terapije za različne neoplazme ustne sluznice.

Markeri proliferacije so tudi zelo informativna diagnostična vrednost pri napovedovanju razvoja malignih tumorjev. Proliferativna aktivnost je vodilni dejavnik tako v mehanizmu maligne transformacije celic kot tudi v biološkem vedenju že nastalih tumorjev. Obetajoč marker proliferativne aktivnosti je antigen Ki-67, ki se praktično izraža v vseh fazah celičnega cikla in zato odraža velikost proliferativnega bazena. Gen, ki kodira Ki-67, se nahaja na dolgi roki 10 kromosoma. Ki-67 se nanaša na regulatorne proteine. Njegov videz sovpada z vstopom celice v mitozo, kar omogoča uporabo kot univerzalni označevalec proliferacije pri ocenjevanju rasti malignih tumorjev.

Izvedene so bile številne študije, ki preučujejo diagnostično vrednost imunohistokemičnih markerjev pri napovedovanju sevanja predrakavih lezij ustne sluznice in rdečih robov ustnic. Murti PR et al. Preučevali izražanje p53 z rdečimi piktogrami SSRI. Ko je bila določena imunohistokemična metoda, ekspresija p53 ni pokazala malignega statusa predkužnika ustne sluznice. Avtorji so predlagali, da je vrh prekomerne ekspresije p53 blizu času preoblikovanja prednika v rak in ga ni mogoče uporabiti kot zgodnji marker za napovedovanje malignosti predhodnika ustne sluznice. Drugi raziskovalci so ugotovili, da človeški gen TP53 kodira vsaj 9 različnih izoform. Drugi član družine p53, p63, vsebuje 6 različnih izoform in igra ključno vlogo pri razvoju ustne sluznice, slinavke, zob in kože. Ugotovljeno je bilo, da je p63 povezan z razvojem skvamoznega celičnega karcinoma glave in vratu. Vendar pa v primerjavi z nespremenjenim tkivom niso opazili nobenih statistično značilnih sprememb v izražanju novih izoform p53 in p63 v predkukciji SSRI. Študije De Sousa FA so potrdile prognostični pomen markerja p53 pri določanju možnosti za maligno preoblikovanje prednika ustne sluznice. Ob istem času nekateri avtorji menijo, da p53 ni mogoče uporabiti kot enotni označevalec za napovedovanje razvoja raka.

Prav tako obetaven prognostični imunohistokemični ravnina zajemanja predstavlja v obravnavanem vzorce tkiva podoplanina - sestavni membrana mukoprotein izražen kot nespremenjen in spremenjen vnetna in neoplastične endotelija limfnih kapilar. Raziskovalci so našli statistično značilno razmerje ekspresijski podoplanina iABCG2 (ATP-vezavni protein podskupin G2) s tveganjem maligne transformacije lichen planus (tveganje bistveno večja pri soizražanjem podoplanina in ABCG2, kot brez soizražanjem podoplanina in ABCG2) in ugotovil, da podoplanin in ABCG2 se lahko uporabijo kot biomarkerjev za ocenjevanje tveganja maligne transformacije z predrakavih sprememb RBCU

Raziskave tujih znanstvenikov so potrdile diagnostični pomen izraza Fas / FasL kot biomarkerje za razvoj raka. Fas je tipa I transmembranski glikoprotein (besede APO-I, CD95), in inducira apoptozo v celicah po interakciji z Fas liganda (FasL) ali agonističnega monoklonskega protitelesa proti Fas.

Hkrati je znano, da je Fas izražen v skoraj vseh vrstah tkiv. V ledvicah, jetrih, srcu in timusu so opazili povečano izražanje Fas. Poleg tega je ta receptor izražen na številnih tumorjih, pa tudi na celicah, okuženih z virusom. Razlog za odpornost različnih tipov celic na Fas-odvisno apoptozo lahko poveča produkcijo topnih Fas s temi celicami. Topen Fas je produkt alternativnega spajanja in je sposoben zavirati apoptozo, ki jo povzročajo agonistična monoklonska protitelesa proti Fas ali FasL.

Tako je nejasen interpretacija rezultatov raziskav izvajata različni avtorji pripelje do zaključka, da v tej fazi molekularne onkologije izkoristili imunohistokemično označevalec naprej v kombinaciji z drugimi metodami diagnosticiranje in prognozo predrakavih lezij ustne sluznice.

Posebno pomemben je problem razvrščanja imunohistokemičnih markerjev za diagnostični pomen. Verjamemo, da jih je mogoče, glede na njihovo pomembnost, urediti po naslednjem vrstnem redu:

1. Imunohistokemični markerji z visokim diagnostičnim pomenom: podplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Imunohistokemični označevalci povprečne stopnje diagnostičnega pomena: Bax, MMP-9;
3. Obetavni imunohistokemični označevalci, katerih diagnostični pomen zahteva nadaljnje študije: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Imunohistokemični markerji, katerih diagnostićni pomen za napovedovanje sevanja predrakavih bolezni ni dokazan: p53, p63.

Na podlagi te analize podatkov literature je mogoče sklepati, da je določitev Imunohistokemične označevalcev ne bi smeli obravnavati kot edini način za napovedovanje poteka predrakavih sprememb na ustni sluznici in prepoznavanje nevarnosti maligno transformacijo, vendar kljub temu, metoda ima visoko diagnostično vrednost v kombinaciji z drugimi metode predvidevanja sevanja predrakavih bolezni.

Višja raziskovalka Kuznetsova Roza Gilevna. Imunohistokemični markerji pri diagnozi predrakavih lezij sluznice ust in rdeče obrobe ustnic // Praktična medicina. 8 (64) december 2012 / letnik 1

[1], [2], [3], [4], [5]