Krvni test za prisotnost rakavih celic v telesu: ime, kako ga vzeti

Danes se medicina vse pogosteje srečuje z onkološkimi boleznimi. Kljub široki razširjenosti rakavih tumorjev mehanizem njihovega nastanka in širjenja ostaja neraziskan. Širjenje onkoloških bolezni poteka z neverjetno hitrostjo. Najpogosteje te bolezni prizadenejo ljudi v upokojitveni dobi. Če pa je bila ta bolezen prej obravnavana predvsem kot bolezen starejše generacije, danes obstaja težnja, da se bolezen pomlajuje. Za to bolezen so dovzetni mladi, najstniki in celo majhni otroci. Nevarnost je, da lahko rakavi tumorji prizadenejo popolnoma kateri koli organ. Rastejo in na določeni točki se celica odlomi, prodre v drugo tkivo in se pritrdi. Posledično nastane nov tumor (metastaze). Razvoj tumorjev in nastanek metastaz je mogoče preprečiti, če se tumor odkrije pravočasno in se sprejmejo potrebni ukrepi. Analiza rakavih celic ima vodilno vlogo pri zgodnji diagnozi malignih tumorjev.

Testi omogočajo odkrivanje tumorja, njegovo diagnozo in, kar je najpomembneje, pravočasno ukrepanje. V zgodnjih fazah je razvoj še vedno mogoče preprečiti. Najpogosteje pa se tumorji odkrijejo v poznih fazah, ko bolniku pogosto ni mogoče pomagati. Težava diagnoze je v tem, da se tumor v zgodnjih fazah razvija skoraj asimptomatsko in ga je mogoče odkriti le med preventivnim pregledom ali med laboratorijskimi preiskavami.

Kateri testi obstajajo za odkrivanje rakavih celic?

Pri pregledu raka se opravi splošni objektivni pregled z uporabo različnih instrumentalnih metod, uporabljajo pa se tudi laboratorijski testi. Najprej se pacientu predpišejo standardni klinični testi. Z njimi lahko dobite splošno predstavo o procesih, ki se dogajajo v telesu. Maligne neoplazme lahko posredno nakazuje povečano število levkocitov, pa tudi povečanje sedimentacije eritrocitov (ESR). Vendar te informacije niso dovolj, saj se pri kateri koli bolezni, infekcijskem ali vnetnem procesu ti kazalniki prav tako povečajo. Rak se lahko kaže tudi v močnem znižanju hemoglobina, zlasti če primerjamo kazalnike v dinamiki. Če se odkrijejo takšni znaki, se predpiše posebna študija, namenjena odkrivanju rakavih celic.

Izvede se razširjen krvni test, med katerim se določijo specifični onkološki markerji. Ti markerji se tvorijo takoj, že v fazi nastanka tumorja. Zato omogočajo identifikacijo transformiranih celic in rakavih tumorjev v začetnih fazah njihovega nastajanja.

Načelo diagnostične metode je, da posebni testni sistemi v krvi zaznajo tumorske markerje, ki jih proizvajajo rakavi tumorji. Težji kot je stadij bolezni, višja je njihova koncentracija v krvi. Telo zdrave osebe ne proizvaja tumorskih markerjev. Zato je njihova prisotnost neposredna potrditev rakavega tumorja. Na podlagi rezultatov je mogoče presoditi o velikosti tumorja, njegovi vrsti in lokalizaciji.

Indikacije za postopek za analizo rakavih celic

Testiranje rakavih celic se izvaja ob sumu na raka, pa tudi v preventivne namene za zgodnje odkrivanje rakavih tumorjev. Občasno naj bi test opravljali tudi ljudje, starejši od 50 let, in tisti, ki spadajo v skupino tveganja za razvoj rakavih tumorjev. Test se opravi, ko se odkrije tumor, katerega narava ni jasna. Omogoča ugotovitev, ali je tumor benigen ali maligen. Test se izvaja tudi za spremljanje rezultatov v dinamiki pri bolnikih z rakom, da se preveri učinkovitost zdravljenja.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Priprava

Analiza tumorskih markerjev ne zahteva posebne priprave. Potrebujete le napotnico zdravnika. Nato se 2-3 dni pred analizo držite lahke prehrane (ne uživajte alkohola, začinjene, mastne, prekajene hrane, začimb). Analizo je treba opraviti na tešče. Zadnji obrok naj bo 8 ur pred testom. Zjutraj ne smete piti alkohola niti kaditi. Nekaj dni ne preobremenjujte telesa in se izogibajte fizičnemu delu.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Tehnika za analizo rakavih celic

Obstaja veliko tehnik. Vse je odvisno od vrste raziskave. Če se izvaja krvni test za določanje tumorskih markerjev, se izvaja z metodami encimskega imunološkega testa. Ta metoda temelji na aglutinacijski reakciji, med katero tumorski marker deluje kot tujek za telo (antigen). Imunski sistem se nanj takoj odzove in proizvede protitelo. Delovanje protiteles je usmerjeno v uničenje tujega organizma in njegovo nadaljnjo odstranitev. Protitelo najde antigen, ki je marker rakavega tumorja, ga napade in spodbudi uničenje. Med tem bojem se antigen in protitelo združita, pride do aglutinacijske reakcije. Ti kompleksi se med analizo odkrijejo, ko se protitelesa vnesejo v kri.

Za to se pacientovi krvi odvzame potrebna količina. Za preprečitev strjevanja se doda nekaj kapljic heparina. Nato se kri dostavi v laboratorij. Tam se kri razdeli na frakcije. Krvni serum se izolira ločeno, saj se v serumu nahajajo tumorski markerji. Za to se uporablja centrifugiranje. S posebno napravo – centrifugo – se kri v epruveti vrti z veliko hitrostjo. Posledično se vsi oblikovani elementi krvi usedejo na dno, epruveta pa vsebuje samo še serum. Z njim se izvajajo nadaljnje manipulacije.

Vzame se poseben komplet za analizo (ELISA), na dno celice se doda določena količina krvnega seruma. Doda se posebno protitelo proti rakavemu tumorju. Čaka se več ur. Če pride do reakcije kompleksacije, med katero se protitelesa in antigeni združijo, se v krvi pojavi antigen, ki deluje kot onkomarker, ki kaže na prisotnost rakavega tumorja. Nastanek kompleksov antigen-protitelo je mogoče videti s prostim očesom, saj se v epruveti pojavi motnost in usedlina v obliki kosmičev. Stopnja motnosti se lahko uporabi za presojo števila onkomarkerjev. Za natančnost rezultatov pa se izvajajo posebne meritve. Uporablja se mednarodni standard motnosti ali spektrofotometer, ki na podlagi lomnega kota svetlobe, ki prehaja skozi raztopino, določi njeno koncentracijo in poda končni rezultat.

Obstaja še ena metoda – imunomagnetna diferenciacija krvnih frakcij. Za to se uporablja posebna naprava, ki omogoča odkrivanje rakavih celic z določanjem tumorskih markerjev, ki se pritrdijo na spremenjeno celico in postanejo vidni v magnetnem polju. Natančnost te metode je precej visoka – celo od milijona zdravih celic je mogoče odkriti eno rakavo celico.

Prav tako je s pomočjo takšnih analiz mogoče ugotoviti natančno število rakavih celic, hitrost njihovega širjenja in napovedati dinamiko rasti. Prednost teh analiz je tudi v tem, da omogočajo spremljanje poteka zdravljenja, določanje učinkovitosti terapije ter izbiro zdravil in njihovega optimalnega odmerka z visoko natančnostjo. Natančnost odmerjanja med zdravljenjem igra vodilno vlogo, saj omogoča učinkovit boj proti zapletom, zmanjšanje števila rakavih celic in preprečevanje razvoja metastaz. Poleg tega takšno pravilno odmerjanje zmanjša toksični učinek zdravil na telo.

Obstaja tudi metoda preučevanja biopsije, pri kateri se za pregled odvzame košček tkiva. Nato se opravi citološki in histološki pregled. Citološka analiza vključuje pripravo mikropreparata iz pridobljenega vzorca tkiva za nadaljnjo preučitev njegovih lastnosti pod mikroskopom. Preučujejo se glavne morfološke in anatomske lastnosti. Mikropreparat iz vzorca zdravega tkiva se močno razlikuje od mikropreparata rakavega tumorja. Obstajajo določene razlike v strukturi, videzu in znotrajceličnih procesih, ki potekajo. Posebni vključki lahko prav tako kažejo na rakavi tumor.

Med histološkim pregledom se tkivo zaseje na posebna hranilna gojišča, namenjena gojenju tkivnih kultur. Setev se goji pod posebnimi pogoji 7 dni, nato pa se spremlja narava rasti tumorja, hitrost in smer. To ima pomemben diagnostični pomen.

Krvni test za odkrivanje rakavih tumorjev

Najhitrejši način za ugotavljanje onkološke bolezni je krvni test. Takšna študija se izvede v 1-2 dneh, po potrebi pa je mogoče nujne rezultate dobiti v 3-4 urah. To je ekspresna metoda, ki pa še vedno zahteva dodatne razjasnitvene preiskave. Vendar pa je to povsem dovolj za postavitev predhodne diagnoze in natančno identifikacijo tumorja. Analiza omogoča določitev celo natančne lokacije tumorja in stopnje onkološkega procesa.

Kot material za preiskavo služi bolnikova kri. Analiza se opravi zjutraj, na tešče. Uporablja se predvsem za potrditev ali ovrženje diagnoze in omogoča razlikovanje benignega tumorja od malignega. Uporablja se tudi za dinamično sledenje kazalnikov, da se ugotovi učinkovitost zdravljenja, spremlja stanje tumorja in preprečijo ponovitve.

Načelo metode je določitev glavnih antigenov, ki jih rakave celice proizvajajo med razvojem tumorja. Če jih odkrijemo, lahko z gotovostjo trdimo, da ima oseba raka. Če pa takih tumorskih markerjev ne odkrijemo, se negativen rezultat ne da. V tem primeru so predpisane dodatne študije.

Lokalizacijo tumorja je mogoče določiti z vrsto tumorskega markerja. Če v bolnikovi krvi odkrijemo antigen CA19-9, lahko to kaže na raka trebušne slinavke. Marker CEA kaže na lokalizacijo tumorja v črevesju, jetrih, ledvicah, pljučih in drugih notranjih organih. Če odkrijemo CA-125, to kaže na onkološki proces v jajčnikih ali okončinah. Markerja PSA in CA-15-3 kažeta na raka prostate oziroma raka dojke. CA72-3 kaže na raka želodca oziroma pljučnega raka, B-2-MG pa na levkemijo, levkemijo, mielom. ACE se pojavi pri raku jeter in metastazah. Krvni test ni edini dejavnik, ki potrjuje metodo. Uporabljati ga je treba v kombinaciji s številnimi drugimi dejavniki.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ]

Test celic raka materničnega vratu

Celice raka materničnega vratu je mogoče identificirati s krvno preiskavo, katere cilj je odkriti onkomarker. Praviloma se v takih primerih odkrije CEA ali karcinoembrionalni antigen. Za testiranje se odvzame tudi razmaz iz nožnice in materničnega vratu. Najprej se izvede predhodna citološka študija. Med citološko analizo je mogoče odkriti transformirane celice in specifične vključke, ki kažejo na onkološke procese.

Po tem se po potrebi opravi biopsija, med katero se odvzame košček tkiva za pregled. Poseje se na hranilne medije, inkubira, nakar se preučijo glavne morfološke in biokemične lastnosti. Na podlagi pridobljenih podatkov se sklepa o naravi tumorja, stopnji njegovega razvoja in koncentraciji rakavih celic.

[ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Test karcinoembrionalnega antigena

Je antigen, ki se uporablja za diagnosticiranje in zdravljenje raka želodca, črevesja, danke, ženskih reproduktivnih organov in mlečnih žlez. Pri odraslih ga v majhnih količinah proizvajajo bronhiji in pljuča, najdemo pa ga tudi v številnih bioloških tekočinah in izločkih. Njegova količina, ki se v onkologiji močno poveča, je indikator. Upoštevati je treba, da se njegova količina lahko poveča tudi pri ljudeh, ki trpijo za avtoimunskimi boleznimi, tuberkulozo, benignimi tumorji in celo pri kadilcih. Zato je odkrivanje visoke koncentracije teh markerjev (20 ng/ml in več) le posredna potrditev raka in je treba izvesti številne dodatne študije. Tudi ta indikator je treba dinamično spremljati, da bi lahko prišli do popolnih zaključkov. Kot raziskovalni material služi venska kri. Antigen se zazna v krvnem serumu.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ]

Analiza mutacij rakavih celic

Receptor epidermalnega rastnega faktorja je transmembranski receptor, ki interagira z zunajceličnimi ligandi epidermalnih rastnih faktorjev. Sodeluje pri nastanku rakavih tumorjev številnih organov, zlasti je zanesljiv znak pljučnega raka. Dejstvo je, da so običajno glavni geni namenjeni zagotavljanju nadzora nad rastjo in razmnoževanjem telesnih celic. Celice rastejo, se razmnožujejo do določene meje, po kateri gen da signal za ustavitev nadaljnjega razmnoževanja in celice se prenehajo deliti.

Gen nadzoruje tudi proces apoptoze – pravočasne smrti starih, zastarelih celic. Ko pride do mutacij v genih, ti prenehajo nadzorovati razmnoževanje (proliferacijo) in smrt (apoptozo) ter dajo signal za nenehno rast, zaradi česar celice rastejo neomejeno in se nenehno, nenadzorovano delijo. To vodi v nastanek rakavega tumorja, za katerega je značilna sposobnost neomejene rasti. V svoji najbolj primitivni obliki si raka lahko predstavljamo kot nenadzorovano delitev in nesmrtnost celice. Proces se obravnava tudi kot nezmožnost celice, da bi pravočasno umrla.

Kemoterapija in različna protitumorska zdravila so posebej usmerjena v uničenje in inaktivacijo tega gena. Če je mogoče zavreti njegovo aktivnost, je mogoče ustaviti razvoj raka. Toda v mnogih letih zdravljenja s takimi ciljno usmerjenimi zdravili se je gen, tako kot vsak organizem, prilagodil in postal odporen na številna zdravila.

Po tem so zdravila izboljšali, spremenili so njihovo formulo, ponovno so postala aktivna v odnosu do tega gena. Izboljšal pa se je tudi sam gen: večkrat je mutiral in vsakič razvil odpornost na zdravila. Z leti se je nabralo veliko vrst mutacij tega gena, več kot 25. To pomeni neučinkovitost specifične terapije. Da ne bi izgubljali časa z jalovim zdravljenjem, ki ne bo učinkovito, se izvede analiza za določitev mutacije tega gena.

Na primer, odkrivanje mutacij v genu KRAS kaže, da zdravljenje raka pljuč in debelega črevesa z zaviralci tirozin kinaze ne bo učinkovito. Če se odkrijejo mutacije v genih ALK in ROS1, to kaže na to, da je treba predpisati krizotinib, ki hitro in učinkovito zavira ta gen ter preprečuje nadaljnji razvoj tumorja. Gen BRAF vodi do nastanka melanoma.

Danes obstajajo zdravila, ki lahko blokirajo aktivnost tega gena in spremenijo njegovo nastavitev v neomejeno rast. To vodi do tega, da tumor upočasni svojo rast ali jo ustavi. V kombinaciji s protitumorskimi zdravili je mogoče doseči pomembne rezultate pri zdravljenju, vse do zmanjšanja velikosti tumorja.

[ 37 ], [ 38 ], [ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ]

Analiza blata za rakave celice

Običajno je bistvo analize odkrivanje skrite krvi v blatu. Ta znak lahko kaže na prisotnost onkološkega procesa v debelem črevesu ali danki. Ljudje, starejši od 45-50 let, ki so najbolj dovzetni za razvoj rakavih tumorjev, morajo ta test opraviti vsako leto. To lahko kaže na druge patologije, vendar so takrat potrebne dodatne preiskave za diferencialno diagnozo. To je zgodnja diagnostična metoda, ki omogoča odkrivanje tumorja v fazi njegovega nastanka in sprejemanje ukrepov za zdravljenje. Pogosto lahko ta metoda odkrije celo predrakavo stanje.

Biopsija za rakave celice

To je študija, ki daje najbolj natančne in zanesljive rezultate. Sestavljena je iz dveh faz. V prvi fazi se odvzame biološki material za nadaljnjo preiskavo. Material je košček tkiva, odvzet neposredno iz organa, v katerem se nahaja tumor. Pravzaprav zdravnik s posebno opremo in instrumenti odreže košček tumorja in ga pošlje v laboratorij na nadaljnjo preiskavo. Odvzem se običajno izvede z uporabo lokalne anestezije.

V drugi fazi se biološki material dodatno citološko in histološko pregleda. Med citološkim pregledom se pripravi mikropreparat, ki se pregleda pod mikroskopom. Na podlagi celotne slike, videza in narave vključkov je mogoče predhodno sklepati, ali je tumor benigen ali maligen. Ta faza ne presega 30 minut.

Po tem se tkivo namoči in zaseje v poseben hranilni medij, ki vsebuje vse pogoje za rast celic. Kultura se postavi v optimalne pogoje, v inkubator, in se tam hrani en mesec. Študija je precej dolga in jo določa hitrost rasti celic. Če gre za rakavi tumor, bo začel aktivno rasti. Benigni, nekancerozni tumor ne raste. Za pospešitev rasti se lahko dodajo rastni faktorji, ki dodatno spodbujajo rast tumorja. V tem primeru je rezultate mogoče dobiti v 7-10 dneh.

Zrasli tumor se podvrže nadaljnjim biokemijskim, mikroskopskim preiskavam in končni rezultat je podan v obliki končne diagnoze, ki določa vrsto tumorja, njegov stadij, razširjenost in smer rasti tumorja. To je običajno končna različica, ki določa rezultat s 100-odstotno natančnostjo.

[ 43 ], [ 44 ], [ 45 ], [ 46 ]

Normalna učinkovitost

Če se izvede analiza za določitev tumorskih markerjev, je analizo precej enostavno razvozlati. V prisotnosti onkološke bolezni se v telesu nahajajo tumorski markerji. V zdravem telesu tumorskih markerjev ni, saj jih proizvajajo le rakave celice. Izjema je rakavi embrionalni antigen, ki je običajno v telesu prisoten v minimalnih količinah. Rahlo povečanje koncentracije lahko kaže na različne somatske patologije, le močno povečanje, nad 20 ng/ml, pa kaže na prisotnost rakavega tumorja. Poleg tega lahko po tem, kateri antigen je zaznan, sodimo o lokalizaciji tumorja. Vsak organ proizvaja svojo vrsto markerjev.

Dešifriranje rezultatov biopsije je še lažje. Če na hranilnem mediju opazimo rast celic, je tumor maligni; če rasti ni, je benigni.

Norma testa rakavih celic

Za vse vrste raka ni nedvoumnih kazalnikov. Vsak specifični tumorski marker ima svoje normalne vrednosti. Poleg tega se te znatno razlikujejo glede na starost in fiziološke značilnosti osebe.

Na splošno je mogoče predstaviti naslednje kazalnike:

• 0-1 ng/ml – normalno;
• 1–20 – benigni tumor, predrakavo stanje, somatske patologije;
• 20-30 – rakavi tumor;
• Nad 30 – metastaze.

Pomembno si je zapomniti, da se lahko vsak tumor, tudi benigni, razvije v malignega. Odsotnost tumorskih markerjev ne pomeni vedno odsotnosti raka. To je razlog za dodatne raziskave.

[ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Naprava za analizo

Za izvedbo analize je potrebna celovita tehnološka laboratorijska oprema. Za odkrivanje tumorskih markerjev so potrebni posebni kompleti za encimsko-imunološki test, laboratorijska steklovina, razpršilniki, mikropipete, centrifuga, inkubator, kultivator, spektrofotometer ali masni spektrometer za merjenje optične gostote in imunomagnetni separator.

Za citološke, mikroskopske in histološke preiskave je potreben mikroskop z visoko ločljivostjo. Za histologijo so potrebni parna kopel, avtoklav, suhogrelna komora, termostat, inkubator, eksikator in digestor.

Koliko časa traja testiranje na rakave celice?

Odkrivanje tumorskih markerjev je ekspresna metoda, ki omogoča pridobitev predhodnih rezultatov in potrditev ali ovrženje diagnoze. Izvede se precej hitro - v 1-2 dneh, po potrebi pa se lahko pospeši na 3-4 ure.

Najbolj zanesljiva in natančna analiza rakavih celic je biopsija, ki omogoča dokončno diagnozo. Takšna analiza se izvaja od 14 do 28 dni (odvisno od hitrosti rasti celične kulture). Po potrebi jo lahko pospešimo na 7-10 dni z ustvarjanjem posebnih inkubacijskih pogojev in dodajanjem rastnih faktorjev.