Splošna analiza cerebrospinalne tekočine

Splošna analiza cerebrospinalne tekočine vključuje štetje števila in sestave oblikovanih elementov krvi. Običajno 1 μl cerebrospinalne tekočine vsebuje 4-6 celic (limfocitov). Pri patoloških procesih (vnetje možganskih ovojnic, encefalitis, volumetrični procesi, akutna možganska odpoved krvnega obtoka) se število celičnih elementov poveča. Pri gnojnem meningitisu se nevtrofilci v cerebrospinalni tekočini pojavijo v velikih količinah (do nekaj deset tisoč v 1 μl), pri seroznem meningitisu pa se število celic zaradi limfocitov poveča z nekaj deset na 1-2 tisoč. Razmerje med nevtrofilci in limfociti se izračuna v odstotkih (citogram). Pogosto se odkrije in prešteje število eritrocitov. Poleg tega se v cerebrospinalni tekočini lahko odkrijejo eozinofilci (pri parazitskih boleznih osrednjega živčevja), makrofagi (pri dolgotrajnih vnetnih procesih) in atipične celice (pri tumorjih možganskih ovojnic, levkemiji). Če obstaja sum na prisotnost atipičnih celic, citolog pregleda razmaz cerebrospinalne tekočine. Štetje citoze in citograma nima le diagnostične vrednosti, temveč omogoča tudi oceno učinkovitosti antibakterijske terapije pri bakterijskem meningitisu.

Kot dodatni testi se uporabljajo citokemične metode, ki nam omogočajo presojo funkcionalnega stanja celic cerebrospinalne tekočine (določanje vsebnosti glikogena in aktivnosti mielopiroksidaze v nevtrofilcih, aktivnosti alkalne fosfataze v limfocitih itd.).

Zaželeno je, da se celice v cerebrospinalni tekočini preštejejo v 1-2 urah po punkciji. V kasnejših fazah se lahko celična sestava znatno spremeni zaradi lize celic, precipitacije in nastajanja fibrinskih strdkov. Ker se eritrociti v cerebrospinalni tekočini hitro lizirajo, jih določamo le ob prisotnosti sveže krvi v subarahnoidnem prostoru: po travmatskih punkcijah, subarahnoidnih krvavitvah, parenhimskih krvavitvah s prodiranjem eritrocitov v poti cerebrospinalne tekočine, pri venskih trombotičnih okluzijah z otekanjem ven in sekundarno difuzijo krvnih celic skozi vensko steno.

Zgornja meja normalnega števila levkocitov v cerebrospinalni tekočini je 5 v 1 μl. Vendar pa nekateri sifilologi menijo, da zgornja meja norme ni 5, temveč 9 celic. Rahla pleocitoza do 20 v 1 μl se običajno opazi po pielografiji, spinalni anesteziji in kapi. Neprimerljivo hujše spremembe opazimo pri nalezljivih boleznih osrednjega živčevja. Akutni bakterijski meningitis običajno spremlja veliko bolj izrazita pleocitoza kot aseptični meningitis. Tako je pri večini bakterijskih meningitisov pleocitoza večja od 1000 v 1 μl; vendar je v zgodnjih fazah ali v primeru delno zdravljenega meningitisa (!) pleocitoza lahko manjša. Pri aseptičnem meningitisu je tako visoka pleocitoza redka. V primerih, ko je pleocitoza še posebej visoka (5.000–10.000 v 1 μl), lahko poleg meningitisa posumimo tudi na rupturo intracerebralnega ali perimeningealnega abscesa; v tem primeru običajno opazimo bliskovito hitro povečanje kliničnih simptomov. Pri bakterijskem meningitisu običajno opazimo povečanje koncentracije polimorfonuklearnih levkocitov. Povečana vsebnost limfocitov se običajno opazi pri kroničnih okužbah (tuberkulozni in glivični meningitis), nezdravljenih bakterijskih okužbah, virusnih okužbah, neinfekcijskih vnetnih procesih (na primer poslabšanje multiple skleroze). Eozinofilija je redka in kaže na helmintozo, vključno s cisticerkozo, včasih pa jo opazimo tudi pri tuberkuloznem meningitisu, limfomih osrednjega živčevja in tujkih.

Imunološke metode

Uporabljajo se metode, ki temeljijo na določanju antigenov in protiteles patogenov. Metoda RLA se najpogosteje uporablja za odkrivanje antigenov meningokoka, pnevmokoka in Haemophilus influenzae tipa b. Za diagnosticiranje tuberkuloznega meningitisa se uporablja encimsko vezan imunski test (ELISA); če obstaja sum na herpesni encefalitis, se v cerebrospinalni tekočini določijo specifična protitelesa.

Polimerazna verižna reakcija (PCR) se pogosto uvaja v prakso, saj omogoča identifikacijo velike večine povzročiteljev nevroinfekcij in v praktičnih pogojih ugotavljanje etiologije nevroinfekcije pri 90 % bolnikov. Prednosti metode so visoka občutljivost in specifičnost, sposobnost odkrivanja fragmentov genoma patogena med zdravljenjem in po potrebi določanje mikrobne obremenitve. Za zmanjšanje stroškov je priporočljivo, da se reakcija najprej izvede s primerji pogostih patogenov (meningokok, pnevmokok, Haemophilus influenzae tipa b, enterovirusi), nato pa z redkejšimi patogeni (gramnegativne bakterije, borelioze, mikobakterije tuberkuloze, herpesvirusi, virusi - povzročitelji otroških kapljičnih okužb itd.). Slika cerebrospinalne tekočine je odvisna od časa študije in zdravljenja.

Citološka preiskava cerebrospinalne tekočine včasih omogoča identifikacijo atipičnih celic, prisotnih celo v minimalnih količinah. To je precej pomembna metoda za odkrivanje tumorskih lezij osrednjega živčnega sistema.

Vnetni procesi, ki jih spremlja levkocitoza, imajo lahko tudi določene citološke značilnosti. Tako imajo limfociti, ki se pojavijo v cerebrospinalni tekočini kot odziv na virusno okužbo, lahko jasno vidna jedra, zaradi česar jih včasih zamenjamo z malignimi celicami. Herpes encefalitis lahko spremlja pojav velikih intranuklearnih vključkov v limfocitih ali ependimocitih; takšna ugotovitev je patognomonična. Pri kriptokoknih okužbah lahko kvasovkam podobne kolonije odkrijemo bodisi v prostem stanju bodisi znotrajcelično v makrofagih. Subarahnoidna krvavitev povzroči pojav makrofagov (eritrofagov), raztegnjenih z več vakuolami. Makrofagi so sprva napolnjeni z eritrociti in lipidnimi produkti njihovega razpada, nato pa s hemosiderinom. Pri nekaterih boleznih kopičenja, kot je Tay-Sachsova bolezen, odkrijemo makrofage s penasto citoplazmo, napolnjeno s produkti razgradnje ganglijskih celic. Identifikacija tumorskih celic temelji na odkrivanju številnih citoloških znakov, značilnih za neoplastični proces. Zanesljivost citološke diagnoze tumorja je večja, več kot je odkritih neoplastičnih znakov. Najpogosteje se citološke preiskave cerebrospinalne tekočine uporabljajo za diagnosticiranje poškodb osrednjega živčevja pri akutni levkemiji in limfomih, ki se običajno širijo v subarahnoidni prostor. Za imunodiagnostiko se uporabljajo posebna protitelesa proti B- in T-limfocitom. Tako pri splošnih vnetnih procesih prevladujejo T-limfociti, pri malignih procesih pa opazimo pretežno proliferacijo patoloških klonov B-limfocitov. Imunohistokemične preiskave se uporabljajo za identifikacijo specifične oblike levkemije. Vendar je treba upoštevati, da so lahko v primerih levkemije, ki jo spremlja sproščanje patoloških celic v krvni obtok, rezultati preiskave cerebrospinalne tekočine lažno pozitivni zaradi vstopa teh celic s krvnim obtokom. Pomembno si je zapomniti, da je citološka preiskava cerebrospinalne tekočine učinkovita le pri tistih malignih procesih, v katere so vključene možganske ovojnice. Karcinomatoza možganskih ovojnic se najpogosteje pojavi pri metastazah rakavih tumorjev pljuč, mlečne žleze, trebušne votline in melanoma.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]