Krvni test za virus Epstein-Barr za protitelesa in PCR: kako opraviti, norme

S herpesom smo navajeni razumeti grde boleče mehurčkaste izpuščaje na obrazu v predelu ustnic, ki nato tvorijo rjave skorje. Žal je to le ena od oblik virusa herpesa, ki se pri ljudeh lahko pojavi v 8 oblikah. Kar običajno imenujemo herpes, je virus tipa 1 ali virus herpes simpleksa. Virus tipa 2 povzroča genitalni herpes, tip 3 - "norice" in skodle, tip 4 - infekcijsko mononukleozo in številne druge precej nevarne patologije itd. Ta seznam se lahko nadaljuje, vendar se bomo osredotočili na virus herpesa tipa 4, ki se sicer imenuje virus Epstein-Barr. Poskusimo ugotoviti, kaj je virus herpesa tipa 4, zakaj je nevaren, kdaj in zakaj se izvaja test za virus Epstein-Barr in kaj kažejo rezultati laboratorijskih testov.

Kaj je herpesvirus tipa 4?

Herpesvirus tipa 4, kot eno od različic okužbe s herpesvirusom, je pred 53 leti opisal angleški virolog Michael Epstein. Pri delu na projektu je profesorju pomagala njegova podiplomska študentka Yvonne Barr. Prav tem ljudem virus dolguje svoje ime. Vendar pa so 15 let po odkritju virusa njegovo znanstveno ime spremenili v humani herpesvirus 4, pred enim letom pa so virus poimenovali humani gamavirus tipa 4.

Kaj pa je virus Epstein-Barr? Kot kateri koli drug virus je tudi virion (virusni delec) herpesvirusa tipa 4 sestavljen iz genskega materiala (v tem primeru dvoverižne DNK) in beljakovinske lupine (kapside), ki ga obdaja. Poleg tega je virus obdan z membrano, ki mu omogoča lažji prodor v celice gostitelja.

Vsak virus je necelična oblika, ki je infekcijski dejavnik in se ne more razvijati in razmnoževati zunaj celic živega organizma. Najljubše okolje herpesvirusa tipa 4 so epitelijske celice nazofarinksa. Tudi levkocitov ne prezirajo, temveč dajejo prednost eni od njihovih vrst, imenovani B-limfociti. Prav B-celice aktivno sodelujejo pri zagotavljanju imunske obrambe telesa. Ko pridejo v stik z antigenom, ki je v našem primeru herpesvirus tipa 4 (oziroma njegovimi antigeni), B-limfociti proizvajajo protitelesa (imunoglobulinske beljakovine). V bolnikovi krvi jih je mogoče odkriti z analizo za virus Epstein-Barr (EBV).

Virus herpesa tipa 4 ima 4 antigene, ki se pojavljajo v strogo določenem zaporedju:

• EA je zgodnji antigen, ki se pojavi v začetni fazi bolezni, ko so virusni delci v fazi sinteze (primarna akutna okužba ali reaktivacija latentnega virusa, ko je imunost zmanjšana),
• VCA je kapsidni antigen, ki se nahaja v beljakovinski lupini in spada tudi med zgodnje, saj se bolezen v tem obdobju klinično morda sploh ne manifestira,
• MA – membranski antigen, se pojavi, ko je virion že oblikovan,
• EBNA – jedrski (polipeptidni ali jedrski) antigen je eden od poznih antigenov, protitelesa proti kateremu lahko odkrijemo še več mesecev po bolezni in ostanejo v krvi vse življenje.

Virus herpesa tipa 4 je zelo zahrbten. Ker je virus zunaj živega organizma neaktiven, se z njim lahko okužimo le od osebe, ki je vir okužbe. In sploh ni nujno, da ta oseba kaže vse simptome bolezni; okužba je lahko latentna, prikrita kot navadna utrujenost. Sindrom kronične utrujenosti je na primer v večini primerov povezan z virusom Epstein-Barr.

Posamezne virione lahko najdemo v krvi, slini, spermi, vaginalnih izločkih in tkivih različnih organov. Virusni delci lahko skupaj s slino in krvjo vstopijo v predmete okoli nas, kjer ostanejo neaktivni, dokler nekako ne vstopijo v človeško telo. V veliki večini primerov se okužba zgodi po kapljicah v zraku ali s stikom (s poljubljanjem). Možni pa so tudi intrauterini prenos virusa z matere na plod, okužba med transfuzijo krvi (če je kri darovalca vsebovala virusne virione) in spolni stik.

Po vstopu v telo in prodiranju v celične strukture lahko traja od 5 do 50 dni, preden se bolezen pokaže. Lahko pa se ne pokaže, saj poteka v latentni obliki, kot je to v večini primerov.

Da, glede na raziskave je približno 90 % odrasle populacije vsaj enkrat v življenju prebolelo herpes okužbo, povezano z virusom EBV. Večina ljudi tega sploh ne ve, saj se njihovo telo lahko ubrani pred virusnim napadom. Vendar to ni vedno tako.

Kako se manifestira virus Epstein-Barr?

Najpogosteje se zdravniki v svoji praksi soočajo z naslednjimi vrstami okužbe s herpesvirusom tipa 4:

• Kronična oblika (pojavi se po akutni fazi bolezni, ima nekatere splošne simptome slabega zdravja),
• Latentna ali skrita oblika (ni simptomov, vendar virus ostaja aktiven in se sprošča v okolje),
• Počasna oblika (manj pogosta, simptomi se pojavljajo drug za drugim v daljšem obdobju, kar se konča s smrtjo bolnika).

Ljudje se prvič okužijo z virusom Epstein-Barr, predvsem v otroštvu in adolescenci. Najvišja incidenca se pojavi med 14. in 18. letom starosti.

Primarna virusna okužba ima 3 različne oblike:

• asimptomatski (brez kliničnih manifestacij),
• dihala (simptomi okužbe dihal: vročina, izcedek iz nosu, splošna šibkost itd.),
• Infekcijska mononukleoza s triado glavnih simptomov: visoka temperatura, znaki bolečega grla z rumenkastimi skorjami na tonzilah, povečanje organov, kot sta jetra in vranica; poveča se raven levkocitov in povečajo se bezgavke.

Obstaja več možnosti za izhod iz akutne faze bolezni:

• popolno okrevanje,
• simptomi bolezni izginejo, vendar virus ostane v telesu in se razvija, čeprav ne povzroča več opaznih sprememb v celicah (nosilno stanje),
• ni simptomov bolezni, virus ne zapusti telesa, vendar kaže tudi malo aktivnosti (latentna oblika),
• reaktivacija virusa iz latentne oblike,
• kronični potek okužbe (z recidivi bolezni, kronično aktivno obliko, generalizirano s poškodbo organov in telesnih sistemov).

Posledica dolgotrajnega bivanja virusa v telesu je lahko:

• Kronična oblika infekcijske mononukleoze.
• Hematofagocitni sindrom: stabilna vročina, zmanjšane krvne sestavine (povečana strjevanje krvi), povečana jetra in vranica, krvavitve v sluznicah, zlatenica (zaradi disfunkcije jeter), povečane bezgavke, nevrološki simptomi.
• Latentna oblika z razvojem sekundarne imunske pomanjkljivosti: dolgotrajna hipertermija, splošna šibkost, povečanje in bolečina bezgavk, bolečine v mišicah in sklepih, pogoste nalezljive bolezni.
• Razvoj avtoimunskih patologij v obliki eritematoznega lupusa, revmatoidnega artritisa itd.
• Manifestacije sindroma kronične utrujenosti s poslabšanjem splošnega počutja in učinkovitosti.
• Generalizirana oblika kronične okužbe s poškodbo osrednjega živčnega sistema, srčnega miokarda, ledvic, jeter in pljuč.
• Razvoj onkoloških bolezni (limfocitna levkemija in limfomi), pri katerih opazimo patološko povečanje števila celic limfnega sistema. Virus herpesa tipa 4 ne uniči nosilnih celic, temveč jih sili k aktivnemu razmnoževanju, zaradi česar se odkrijejo neoplazme iz limfoidnega tkiva.

Kot lahko vidimo, virus Epstein-Barr ni tako neškodljiv, kot se zdi na prvi pogled, kar pomeni, da ga ne smemo obravnavati brezbrižno. Poleg tega je za herpes virus tipa 4 značilno pogosto prenašanje virusa in latentna oblika, da ne omenjamo različnih oblik kronične okužbe, ko oseba ostane vir okužbe, ne da bi to sploh sumila.

V tem primeru je prisotnost povzročitelja okužbe v telesu mogoče ugotoviti le s posebno analizo za virus Epstein-Barr, katerega biomaterial je običajno kri.

Indikacije za postopek Test na virus Epstein-Barr.

Ker okužbe s herpesvirusom tipa 4 včasih ni tako enostavno odkriti, nanjo ni vedno mogoče posumiti. Vendar pa obstajajo določeni znaki, s katerimi lahko zdravnik posumi na prisotnost virusa v telesu:

• močno oslabljen imunski sistem (ogroženi so bolniki z okužbo z virusom HIV in aidsom, bolniki po presaditvi organov ali kemoterapiji),
• povečanje regionalnih bezgavk v bradi in okcipitalnem predelu glave ter njihova bolečina, zlasti če se to opazi po transfuziji krvi ali presaditvi organov darovalca.
• akutna respiratorna virusna okužba (ARVI), ki se pojavlja ob ozadju zelo visokih temperatur (38-40 stopinj),
• pojav znakov infekcijske mononukleoze, ki se najpogosteje pojavi pod vplivom virusa Epstein-Barr.

Tudi če oseba nima zgoraj omenjenih simptomov, lahko specialist posumi na podlagi nekaterih rezultatov rutinskih preiskav (splošna krvna analiza in biokemija) ter študij imunskega statusa.

Popolna krvna slika za virus Epstein-Barr lahko pokaže:

• povečanje števila limfocitov,
• nizek hemoglobin, kar kaže na zmanjšanje ravni rdečih krvnih celic,
• povečano strjevanje krvi zaradi velikega števila trombocitov,
• pojav virocitov (atipičnih limfocitov, ki so po strukturi podobni monocitom).

Biokemični krvni test, ki zagotavlja informacije o stanju notranjih organov, bo pokazal spremembe v delovanju jeter in vranice.

Imunoanaliza za EBV lahko pokaže spremembo v številu specifičnih limfocitov, neskladje v številu imunoglobulinov različnih razredov (disimunoglobulinemija) in pomanjkanje imunoglobulina G, kar kaže na šibek imunski sistem in njegovo nezmožnost, da bi zadržala napad virusa.

Takšni rezultati nespecifičnih analiz lahko opozorijo zdravnike, vendar je še vedno nemogoče natančno reči, s čim imajo opravka. Vse bo ostalo na stopnji predpostavk in predhodne diagnoze. V večini primerov zdravniki sumijo na latentno obliko infekcijske mononukleoze, čeprav se lahko na enak način manifestirajo tudi druge virusne patologije (gripa, hepatitis itd.).

Zaradi visoke razširjenosti hepatitisa tipa 4 in možnosti prenosa z matere na otroka bo test za virus Epstein-Barr koristen tudi pri načrtovanju nosečnosti. Če je mati že prej prebolela okužbo, je njeno telo razvilo protitelesa proti njej. Ponovna okužba je običajno izključena zaradi oblikovanja močne imunosti, in če se zgodi, ne bo imela več posledic, ki so možne ob prvem srečanju z virusom. Imunost bo zadrževala aktivnost virusa skozi vse življenje, čeprav bo virus sam ostal v telesu, tako kot kateri koli od herpesvirusov.

Če se bodoča mati med nosečnostjo okuži z virusom herpesa, lahko to povzroči splav in prezgodnji porod ali pa virus negativno vpliva na intrauterini razvoj otroka.

Onkolog lahko naroči test EBV, če obstaja sum na Burkettov limfom ali za diagnosticiranje tumorskih procesov pri ljudeh z virusom HIV. Terapevt lahko ta test uporabi za diagnosticiranje herpesnih okužb (diferencialna diagnostika za določitev vrste virusa). Včasih se test uporablja tudi za oceno učinkovitosti zdravljenja.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Priprava

Glede na vrsto raziskave je lahko biomaterial kri, slina, urin, sputum, vzorec amnijske tekočine, strganje iz cervikalnega kanala ali sečnice, cerebrospinalna tekočina (CSF). Najpogosteje se zdravniki zatečejo k krvnim preiskavam, ki veljajo za najbolj informativne.

Jasno je, da lahko nekateri dejavniki negativno vplivajo na kakovost in količino biomateriala, zato je vredno dan prej upoštevati določena pravila:

• Vse preiskave (zlasti krvne) je priporočljivo opraviti zjutraj na tešče. Zadnji obrok naj bo najkasneje 12 ur pred odvzemom krvi, zato je za večerjo bolje piti vodo.
• Najbolj sprejemljiv material za analizo virusa Epstein-Barr velja za vensko kri, pred darovanjem krvi iz vene pa je vedno priporočljiv 15-minutni počitek, če je oseba pravkar prispela v laboratorij,
• Da bi odvzem krvi potekal brez posledic in da bi bili rezultati testa zanesljivi, ni priporočljivo opravljati aktivnega fizičnega dela ali se ukvarjati s športom, piti alkohola ali kaditi v 12 urah pred postopkom.
• Na rezultate testov lahko vplivajo tudi zdravila, ki jih jemljete. Zdravila morate prenehati jemati vsaj 2 dni pred testom. Če to ni mogoče, morate o zdravilih, ki jih jemljete, obvestiti laboratorijsko medicinsko sestro.
• Med nosečnostjo se pred testiranjem na EBV opravi test na toksoplazmozo, da se izključi lažno pozitivna reakcija.
• Če se pri otroku, mlajšem od 5 let, opravi krvni test za virus Epstein-Barr, je treba pol ure pred posegom otroku dati veliko prekuhane vode, ki jo lahko pije v relativno majhnih porcijah.

Če se za analizo vzame drug biomaterial, morate z zdravnikom vnaprej razjasniti vse nianse priprave na analizo, odvisno od uporabljenega materiala.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Tehnika Test na virus Epstein-Barr.

Zdravniki pomembno vlogo pri diagnozi herpesa tipa 4 in infekcijske mononukleoze pripisujejo specifičnim testom, ki pomagajo prepoznati DNK virusa ali edinstvena protitelesa v bolnikovem biomaterialu. Glavne vrste laboratorijskih testov, ki se uporabljajo za odkrivanje virusa Epstein-Barr v človeškem telesu, vključujejo encimsko imunski test (ELISA) in PCR diagnostiko. Oglejmo si podrobneje bistvo obeh metod in značilnosti njihovega izvajanja.

EBV encimski imunski test

ELISA je študija (analiza) venske krvi bolnikov na protitelesa proti virusu Epstein-Barr. Kot rezultat diagnostike se v krvi bolnikov z EBV odkrijejo imunoglobulini tipa IgG ali IgM (skupaj jih je 5 vrst) proti enemu od 3 antigenov virusa (zgodnji, kapsidni ali jedrni).

Analiza se izvede v imunološkem laboratoriju, kjer se iz pacientove vene odvzame približno 10 ml krvi. Biomaterial se nato četrt ure pusti pri sobni temperaturi, v tem času se kri strdi. Strdek se previdno loči od tekočega dela. Tekočino centrifugiramo in dobimo čisti krvni serum. Ta se nato podvrže nadaljnji preiskavi.

Ideja o metodi je nastala na podlagi podatkov, da naše telo proizvaja specifična protitelesa za vsako vrsto virusa in bakterij, ki prodrejo v telo od zunaj. Telo jih prepozna kot tujke in jih uniči s pomočjo edinstvenih protiteles, ki se trdno oprimejo antigena.

Bistvo ELISA analize temelji na tej reakciji. Protitelesa z oznakami, pritrjenimi nanje, se vežejo z antigeni. Na oznake se nanese snov, ki ob reakciji s posebnim encimom spremeni barvo vzorca. Več kot je takšnih "verig", intenzivnejša je barva biomateriala.

Encimski imunološki test se lahko izvede s tremi metodami:

• Neposredni ELISA. Testno tekočino damo v vdolbinice in pustimo približno pol ure, da se antigeni pritrdijo na stene vdolbinic. Tekočino z označenimi protitelesi dodamo adsorbiranim antigenom. Po zahtevanem času (od pol ure do 5 ur), ko protitelesa zaznamo in se vežejo na antigene, tekočino odcedimo, vdolbinice skrbno speremo in jim dodamo encim. Koncentracijo virusa v enoti krvi določimo z metodo barvanja.
• Posredni ELISA. Pri tej metodi se testirani krvni serum in označena protitelesa dodajo antigenom, sorbiranim na površini vdolbinic. Posledično dobimo 2 vrsti vezi, od katerih so nekatere označene. Rezultat je odvisen od koncentracije antigenov v testiranem vzorcu. Več kot je neoznačenih protiteles, manj spojin označi encim.

Nato se oprani sestavi doda poseben reagent, ki se uporablja za določanje encimske aktivnosti kompleksov antigen-protitelo.

• "Sendvič". Od posredne metode se razlikuje po tem, da se sprva na površino ne sorbirajo antigeni, temveč protitelesa. Doda se jim raztopina, ki vsebuje preučevane antigene. Po izpiranju nosilca se dodajo protitelesa z encimskimi oznakami. Presežek protiteles se ponovno odstrani in z uporabo vodikovega peroksida dobimo obarvano snov, ki jo preučujemo s spektrometrično metodo.

Ta vrsta analize omogoča ne le identifikacijo specifičnih protiteles in določitev koncentracije antigenov, temveč tudi razjasnitev stadija bolezni. Dejstvo je, da se različni antigeni virusa Epstein-Barr pojavljajo v različnih fazah herpesne okužbe, kar pomeni, da se protitelesa proti njim proizvajajo v določenem obdobju bolezni.

Tako se protitelesa IgG proti zgodnjemu antigenu (IgG EA) pojavijo v krvi 1-2 tedna po okužbi, ko je bolezen v akutni fazi ali fazi reaktivacije virusa. Imunoglobulini te vrste izginejo po 3-6 mesecih. Pri kroničnem poteku virusne okužbe so takšna protitelesa še posebej številna, pri atipični obliki pa so popolnoma odsotna.

Protitelesa IgG proti kapsidnemu antigenu (IgG VCA) se pojavijo tudi zgodaj, v prvih 4 tednih bolezni, vendar je njihovo največje število določeno v drugem mesecu okužbe. V akutni fazi jih najdemo pri večini bolnikov, vendar se pri otrocih morda ne pojavijo. Pri kroničnem poteku bolezni, zlasti v obdobjih reaktivacije virusa, je količina IgG VCA še posebej visoka. Ta protitelesa ostanejo v človeški krvi za vedno, tako kot sam virus, kar kaže na oblikovano imunost proti povzročitelju okužbe.

Protitelesa IgM proti kapsidnemu antigenu (IgM VCA) se lahko pojavijo že pred prvimi znaki bolezni. Njihova koncentracija (titer) je še posebej visoka v prvih 6 tednih bolezni. Ta vrsta protiteles je značilna za akutno okužbo in reaktivacijo kronične okužbe. IgM VCA izginejo po 1-6 mesecih.

Protitelesa IgG proti jedrnemu genu (IgG EBNA) lahko kažejo, da se je oseba že prej neposredno srečala s herpesno okužbo. V akutni fazi bolezni jih odkrijemo izjemno redko, običajno se pojavijo v obdobju okrevanja (v 3. do 10. mesecu). V krvi jih je mogoče odkriti več let po okužbi.

Odkrivanje posameznih antigenov ne daje popolne slike bolezni, zato je treba teste za različna protitelesa opraviti skupaj. Če je na primer prisoten le IgM VCA in IgG EBNA ni odkrit, gre za primarno okužbo.

Žal encimski imunološki test pogosto ni zadosten za odkrivanje primarne herpesne okužbe ali prirojene patologije. V slednjem primeru protiteles morda sploh ne bo mogoče odkriti. Kot potrditveni test za primarno bolezen se uporablja molekularna študija krvi ali drugega biološkega materiala za virus Epstein-Barr.

PRC analiza za virus Epstein-Barr

Ta analiza se izvaja v fazi akutne primarne okužbe, sicer bo njen rezultat napačen.

Bistvo metode PCR (polidimenzionalna verižna reakcija) je, da ima vsak povzročitelj okužbe svoj nabor genov, ki jih vsebuje molekula DNK. DNK patogena je v biomaterialu, odvzetem za raziskavo, vsebovana v majhnih količinah (virusi sami so mikroskopske velikosti), zato je zelo težko oceniti situacijo. Če pa se izvede specifična reakcija, se bo količina genskega materiala znatno povečala, kar bo omogočilo poimenovanje patogena.

Z uporabo instrumentov za enkratno uporabo se odvzame material za molekularne raziskave, ki se nato namesti v posebno napravo za analizo. Naprava je termostat s posebnim programom - termociklerjem ali ojačevalnikom. Naprava več desetkrat (približno 2-3 minute) izvede celoten cikel PRC, ki ima 3 faze:

• Denaturacija (pri temperaturi 95 stopinj se verige DNK ločijo).
• Žarjenje (pri temperaturi 75 stopinj se v preučevano snov vnesejo posebej pripravljeni "primerni oligonukleotidi" za EBV, ki se pritrdijo na DNK virusa).
• Razširitev ali razmnoževanje genskega materiala (semu se pri temperaturi 72 stopinj doda poseben encim, ki poustvari novo verigo DNK in s tem podvoji količino genskega materiala).

Če celoten cikel polidimenzionalne reakcije izvedemo 50-krat, se bo količina materiala povečala 100-krat. To pomeni, da bo patogen veliko lažje prepoznati.

Test za virus Epstein-Barr pri otroku

Kot že vemo, lahko virus Epstein-Barr povzroči razvoj številnih bolezni. Ko enkrat vstopi v človeško telo, ostane njegov stalni prebivalec in le dobro usklajeno delo imunskega sistema mu ne omogoča aktivnega parazitiranja v celicah.

Skoraj 95 % odraslega prebivalstva sveta živi z virusom EBV v sebi, večina pa se jih je z virusom seznanila že v zgodnjem otroštvu. Nekateri so ga podedovali od matere, drugi pa so se okužili od staršev in sorodnikov, ki so k otroku hiteli s poljubi, ali pa po kapljicah v zraku v vrtcu ali šoli (tam nalezljive bolezni običajno dobijo "univerzalne" razsežnosti).

Majhni otroci na splošno vse dajo v usta, največje število virionov pa najdemo v slini. In če več otrok v vrtcu liže isto igračo, medtem ko so vzgojiteljice zaposlene s svojimi zadevami, potem ni presenetljivo, da se virus tako aktivno širi v velikih skupinah otrok.

EBV lahko zlahka imenujemo bolezen otrok in mladostnikov, saj ima do adolescence že polovica otrok virus v telesu (do 30. leta starosti pa približno 90 % odraslih). Otroci različnih starosti zbolevajo na svoj način. Do enega leta, ko otrok aktivno ne komunicira z ljudmi, je verjetnost, da zboli, majhna. Otrok, starejši od enega leta, tudi če še ni hodil v vrtec, postane bolj družaben, se igra z vrstniki na ulici, aktivno hodi po nakupih z mamo itd., verjetnost okužbe z virusom pa postane veliko večja.

Vendar to ni razlog, da otroka zapremo med 4 stene. Pri starosti 1-3 let bolezen v veliki večini primerov poteka brez simptomov, razen morda z rahlim povišanjem temperature in rahlim izcedkom iz nosu, ki spominja na prehlad. Izkazalo se je, da prej ko se otrok seznani z virusom, lažje bo takšno spoznavanje potekalo.

Ni dobro, če otrok zboli brez pojava protiteles IgG VCA v krvi, kar lahko kaže na to, da imunost na virus ni bila oblikovana, ponovna aktivacija virusa pa je možna takoj, ko imunski sistem oslabi. Razlog je najverjetneje nepopolnost imunskega sistema majhnih otrok, ki je v procesu nastajanja že več let.

Šolsko življenje ponuja še več predpogojev za bolezen, zlasti v adolescenci, ko se mladi aktivno poljubljajo. Toda pri otrocih, starejših od 3 let, je bolezen manj pogosto asimptomatska. V večini primerov se zdravniki srečujejo z infekcijsko mononukleozo z njenimi značilnimi simptomi.

Kljub temu, da ima lahko patologija dolg potek (približno 2 meseca), ni tako nevarna in ne zahteva uporabe resnih zdravil. Zdravniki predpisujejo protivnetna in protivirusna zdravila, če se pridruži bakterijska okužba, pa poiščejo pomoč pri antibiotikih. Mimogrede, penicilini v tem primeru niso priporočljivi, ker lahko izzovejo pojav kožnega izpuščaja.

Ne mislite, da če otrok ali najstnik zboli za infekcijsko mononukleozo, to pomeni, da se je v njegovem telesu naselil virus Epstein-Barr. Bolezen ima tudi druge manj pogoste povzročitelje, kot je citomegalovirus (herpesvirus tipa 5). Da bi razumeli, s čim se soočajo, zdravniki predpišejo test za virus Epstein-Barr in po potrebi še druge laboratorijske preiskave.

Res je tudi, da infekcijska mononukleoza ni edina manifestacija EBV v otroštvu. Obstajajo tudi druge bolezni, povezane s tem patogenom, vendar so v naši regiji redke.

Tako Burkittov limfom (ki mu EBV dolguje svoje odkrivanje) najdemo predvsem pri otrocih v afriških državah, zelo redko v Ameriki in še redkeje v Evropi (in to le na ozadju aidsa). Tumor čeljusti s poškodbo bezgavk, ledvic in drugih organov najdemo pri otrocih, starih od 3 do 8 let.

Rak nazofarinksa, znaten delež drugih limfomov, dlakava levkoplakija ust - vse to so manifestacije EBV na ozadju močno zmanjšane imunosti, ki se pojavi pri okužbi z virusom HIV in njeni poznejši fazi aidsa.

Prirojena imunska pomanjkljivost in dodatek virusa Epstein-Barr sta nevarna mešanica, ki lahko pri otroku privede do razvoja proliferativnega sindroma. V tem primeru povečanje števila B-limfocitov povzroči pojav granul v številnih organih, kar preprečuje njihovo normalno delovanje. To je bolezen z visoko stopnjo umrljivosti, vendar se ne razvije ob ozadju normalne imunosti.

Lahko rečemo, da je virus Epstein-Barr v otroštvu nevaren predvsem v primerih imunske pomanjkljivosti zaradi razvoja različnih zapletov. V večini primerov je vse omejeno na infekcijsko mononukleozo. In čeprav ne zahteva posebnega zdravljenja, zdravniki še vedno raje ugotavljajo naravo patogena, za kar otroku predpišejo splošni krvni test, encimski imunološki test in PCR.

Ker se v otroštvu pojavlja predvsem primarna okužba, se je povsem mogoče omejiti le na popolno krvno sliko in PCR, kar je precej informativno, ko se bolezen prvič odkrije.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Normalna učinkovitost

Rezultati PCR analize se obdelajo z elektroforezo ali z uporabo označenih "primerjev". V slednjem primeru zadostuje, da preprosto dodamo reagent (kromogen) in z barvo ugotovimo, ali so v vzorcu virioni. Pozitiven rezultat elektroforeze je indiciran, ko v preučevanem vzorcu odkrijemo verige DNK različnih dolžin.

Med inkubacijsko dobo bolezni in asimptomatskim virusnonosištvom bo PCR dal negativen rezultat, prav tako pa tudi v primeru absolutne odsotnosti virusa v telesu. Na začetku razvoja primarne okužbe in v njenih zgodnjih fazah lahko PCR v realnem času da tako pozitivne kot negativne rezultate, kar pa nikakor ne pojasni situacije.

Vendar pa bo analiza sredi bolezni (akutna faza), v njenem kroničnem poteku ali reaktivaciji virusa (poslabšanje) in v primeru atipičnih oblik pozitivna. Če je oseba bolna že dolgo časa in je virus v njenem telesu v neaktivnem stanju, bo PCR analiza dala negativen rezultat, tj. izvajanje te analize v tem obdobju je prav tako neprimerno, pa tudi v prezgodnjih fazah bolezni.

Treba je povedati, da so natančni rezultati te vrste laboratorijskih raziskav možni le v primeru primarne okužbe in odsotnosti virionov drugih virusov.

Zdaj pa glede encimskega imunološkega testa za virus Epstein-Barr. Ima enake zahteve. Prisotnost herpes virusa tipa 5 ali 6, toksoplazmoze in okužbe z virusom HIV v telesu lahko izkrivi rezultat, prav tako kot malomaren odnos do analize ali slaba kakovost uporabljenih reagentov. V tem primeru bodo morda potrebne dodatne študije, pri čemer se upoštevajo morebitni patogeni.

Normalni rezultati testov, ki kažejo na odsotnost virusa v telesu, se štejejo za negativne rezultate vseh 4 testov: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA in IgG EBNA. Da, vsak test se izvaja ločeno, ker se antigeni pojavljajo v različnih obdobjih bolezni. Včasih se lahko predpišejo le posamezni testi, v večini primerov pa je treba opraviti vse 4 teste, vendar v različnih obdobjih bolezni.

Na primer, med inkubacijsko dobo bolezni, pa tudi v odsotnosti okužbe, v krvi ni zaznana nobena od 4 vrst protiteles. Takšnega rezultata ni mogoče šteti za zadostnega, ker ne omogoča razlikovanja osebe, ki je prvič zbolela, od zdrave osebe.

Na začetku razvoja primarne bolezni se v krvi pojavijo le protitelesa IgM proti VCA. V zgodnjih fazah bolezni se jim pridružijo IgG protitelesa proti VCA.

Akutna faza primarne okužbe poteka z nastankom treh vrst protiteles: IgG VCA, IgM VCA in IgG EA, pri čemer je največ protiteles IgG zaznanih proti kapsidnemu antigenu. Enaka sestava protiteles se ohrani šest mesecev po akutni fazi bolezni, vendar se količina IgM VCA postopoma zmanjša na nič.

Šest mesecev po bolezni se v krvi pojavijo protitelesa IgG EBNA, imunoglobulinov IgG EA pa je vedno manj, protitelesa IgM VCA pa so popolnoma odsotna.

V kroničnih primerih bolezni ali reaktivacije virusa so lahko prisotni različni kazalniki. Najpogosteje se v krvi najdejo vse 4 vrste protiteles. Lahko pa se zgodi, da imunoglobulinov IgM VCA in IgG EBNA ne odkrijemo.

Zaplet virusne okužbe s tumorskimi procesi se pojavi ob odsotnosti protiteles IgM VCA, imunoglobulini IgG EBNA pa niso odkriti v vseh primerih.

Toda encimski imunološki test ne določa le prisotnosti določenih protiteles, temveč tudi njihovo koncentracijo, kar nam omogoča, da z večjo natančnostjo presodimo stopnjo patologije in njene morebitne posledice. Tukaj ni treba govoriti o konkretnih številkah. Navsezadnje vsak laboratorij izvaja analizo na enega od možnih načinov z uporabo različnih reagentov, zato se lahko rezultati analize različnih laboratorijev v digitalni obliki razlikujejo.

Pacientu je treba dati obrazec z navedbo mejnih (referenčnih) vrednosti. Če je rezultat pod pragom, se šteje za normalen (negativen) kazalnik. Če je določena številka nad referenčno vrednostjo, vse kaže na pozitiven rezultat, kar pomeni, da virus živi v telesu. Vrednost določene vrednosti kaže na stadij bolezni in kolonizacijo telesa z virioni EBV, torej na resnost patologije.

Če je test ELISA negativen, to pomeni le, da oseba v preteklosti ni bila v stiku z virusom EBV. Vendar pa je nemogoče z gotovostjo trditi, ali je virus trenutno prisoten v telesu. Negativen rezultat je lahko posledica inkubacije patogena v telesu in asimptomatskega prenašalstva virusa. Včasih je za zagotovitev, da virus ni prisoten v telesu, potrebno čez nekaj časa izvesti drugo serijo testov.

Če rezultat testa ELISA za virus Epstein-Barr le nekoliko presega referenčne vrednosti, se rezultat šteje za vprašljivega. Vzrok je najpogosteje zgodnja faza bolezni ali prisotnost virionov drugega virusa v telesu. V tem primeru je po 2 tednih priporočljivo ponoviti test za EBV in morebiti za druge patogene.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Kar zadeva vprašanje, koliko časa traja test za virus Epstein-Barr in kdaj lahko pričakujete rezultate, ni posebnih težav. V resnem, dobro opremljenem laboratoriju boste morali po oddaji biomateriala čakati največ 2 dni. V primerih, ki zahtevajo nujno analizo, je odgovor mogoče dobiti že po nekaj urah.

Test za virus Epstein-Barr je treba opraviti v zaupanja vrednem laboratoriju, kjer so na voljo tako visokokakovostni reagenti kot usposobljeni strokovnjaki. Navsezadnje test stane denar (in ne majhen znesek, test za eno vrsto protiteles stane približno 150-170 UAH), in ne bi rad dobil lažnega rezultata, nato pa se morda obrnil na drug laboratorij za ponovni test.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]